朱仙芝，邱建達(dá)，李再忠

·論著·

老年性癡呆患者血清中期因子水平檢測及意義

朱仙芝，邱建達(dá)，李再忠

目的探討血清中期因子（MK）表達(dá)水平與老年性癡呆（AD）疾病的關(guān)系。方法應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測39例AD患者和42例正常對照組血清MK表達(dá)水平。結(jié)果AD患者血清MK水平高于正常對照組（＜0.01）。28例AD患者(71.8%)血清MK表達(dá)水平高于界值（566pg/ml），對照組除1例外其他均低于界值（＜0.01)。MK與AD有較強(qiáng)關(guān)聯(lián)性（=0.723，＜0.05），兩組MK水平診斷試驗顯示特異性為0.98，陽性預(yù)測值為0.97，陽性似然比32倍，均顯示有較大臨床診斷價值。AD患者血清MK的高水平組與正常對照組的簡明精神狀態(tài)量表評分結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞0.05）。結(jié)論血清中MK表達(dá)水平在AD患者中顯著增加，可能與該疾病的病理進(jìn)程有一定相關(guān)性，對AD患者特異性診斷有較高的價值。

阿爾茨海默病；中期因子；生物學(xué)標(biāo)記；診斷試驗

中期因子（MK）屬于肝素結(jié)合生長/分化因子家族，能促進(jìn)多種細(xì)胞的生長和存活[1]，對神經(jīng)元有保護(hù)作用[2]。生理情況下，MK在胚胎期高表達(dá)，在成年人腦中幾乎檢測不到[3]。而在腫瘤發(fā)生，炎癥和組織細(xì)胞修復(fù)的過程中，MK的表達(dá)均明顯增強(qiáng)。阿爾茨海默病（AD），是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性病，其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，已有的研究證實其特征性病理改變?yōu)榈矸蹣拥鞍壮练e形成的細(xì)胞外老年斑和tau蛋白過度磷酸化形成的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)。有研究表明AD患者腦部老年斑組織與MK發(fā)生免疫反應(yīng)，還發(fā)現(xiàn)MK可以與淀粉樣蛋白結(jié)合并具有中和細(xì)胞毒性作用[4]。本研究用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測AD患者和正常人血清MK水平，以探討MK與AD的關(guān)聯(lián)性?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2010年11月至2012年12月浙江省象山縣中醫(yī)院收治的AD患者39例，其中男15例，女24例；年齡68～79歲，平均（73.49±5.65）歲；受教育年限（6.78±3.45）年。另選本院同期健康體檢者42例為對照組，其中男16例，女26例；年齡70～80歲，平均（75.21±5.39）歲；受教育年限（6.35±3.79）年。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞0.05）。

1.2 方法清晨抽取實驗對象的肘靜脈空腹血3.0ml，

所有樣本均在進(jìn)院未作治療前抽取，半小時內(nèi)以3000r/min離心5min，吸取上層血清于滅菌EP管，置－80℃保存。采用ELISA測定血清MK濃度，操作方法參照人中期因子蛋白酶聯(lián)免疫試驗檢測系統(tǒng)說明進(jìn)行，測試劑盒購自捷克Biovendor公司。MK異常判斷界值為566 pg/ml[5]。簡明精神狀態(tài)量表（MMSE）評分方法，受試者受教育程度，文盲≤17分，小學(xué)文化≤20分，中學(xué)及以上文化≤24分者作為老年癡呆疑似患者，并進(jìn)行進(jìn)一步的檢查確診。

1.3 統(tǒng)計方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間均數(shù)比較采用檢驗；非正態(tài)分布資料采用秩和檢驗；計數(shù)資料比較采用2檢驗；關(guān)聯(lián)性分析采用Cramer法。＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 討論

本研究顯示，AD患者血清MK表達(dá)水平顯著升高，提示AD患者腦和血清中MK表達(dá)水平增高可能抑制AD患者淀粉樣蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。然而，AD患者血清MK的來源和MK表達(dá)水平升高的機(jī)制并不清楚，推測AD患者腦組織和血清中MK改變是同步的。另外，有研究表明血管內(nèi)皮細(xì)胞也能釋放MK，推測是否為AD患者神經(jīng)遞質(zhì)異常釋放而刺激腦血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放MK。此外，AD患者在腦細(xì)胞功能紊亂前就有可能發(fā)生血腦屏障的破壞，而引起MK進(jìn)入外周血循環(huán)使得血清MK水平增高。所以AD患者血清和腦組織中MK表達(dá)水平都明顯增高，使AD與MK間具較高關(guān)聯(lián)性。

本研究顯示兩組血清MK檢測對診斷AD敏感性較高（72%），尤其是特異性高（97.6%）、誤診率低（2.4%），陽性預(yù)測值與驗后概率均高（96.6%），陽性似然比為30.2，對AD可能有較高的診斷價值。

表1 兩組血清MK含量比較pg/ml

有研究報道乳腺癌、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝癌、肝外膽管癌及宮頸癌等，與健康對照和良性食管疾病患者等相比血清MK均增高[6]。但胃癌、結(jié)腸癌等腫瘤病例是以血清MK500pg/ml為截斷界值，其特異性在30%左右。另外人群腫瘤總患病率也相對有限，不過在做AD特異診斷時仍應(yīng)排除該方面的影響；還有報道70%的惡性腫瘤患者尿液中也可檢測到MK值的升高，這也為人們提供了一個新的研究方向。

本文AD患者有71.8%MK表達(dá)水平異常，將AD患者分為高M(jìn)K組和正常MK組，兩組結(jié)果顯示患者血清MK水平的高低與MMSE評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義（＞0.05）。提示血清MK水平還不能夠敏感地反映AD疾病進(jìn)展及腦功能損傷程度。在反映AD患者疾病的特異性方面還有待做進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清MK水平在AD生物學(xué)診斷方面可能有較大參考價值，而血清MK水平是否可以成為一個AD標(biāo)志物，用于疾病診斷和發(fā)病風(fēng)險預(yù)測及預(yù)后還需做大樣本量的進(jìn)一步深入研究。

[1]Muramatsu H,Zou P,Suzuki H,et al.A4bl-and a6bl-Intrgrins are functionalreceptorsformidkine,aheparin-bindinggrowthfactor[J]. Cell Sci,2004,117(10):5405-5415.

[2]Wada M,KamataM,AizuY,et al.Alteration of midkine expression intheischemicbrainofhumans[J].JNeurol Sci,2002,200(1/2):67-73.

[3]Matsumoto K,Wanaka A,Takatsuji K,et al.A novel family of heparin-binding growth factors,pleiotrophin and midkine,is expressed in the developing rat cerebral cortex[J].Brain Res Dev Brain Res,1994,79(2):229-241.

[4]Monji A,Yoshida I,Tashiro K,et al.Inhibition of A beta fibril for mationandA beta-inducedcytotoxicityby senile plaque-associated proteins[J].Neurosci Lett,2000,278(1/2):81-84.

[5]Shimada H,Nabeya Y,Tagawa M,et al.Preoperative serum midkine concentration is a prognostic marker for esophageal squamous cell carcinoma[J].Cancer Sci,2003,94(7):628-632.

[6]曲杰,黃敏,許方,等.胃癌和結(jié)腸癌患者血清MK的定量檢測及其臨床意義[J].中國實驗診斷學(xué),2011,15(2):234-236.

Detection of serum midkine levels in patients with Alzheimer's disease

ZHU Xianzhi,QIU Jianda,LI Zaizhong.(Xiangshan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Xiangshan 315700,Zhejiang,China)

ObjectiveTo explore the correlation of serum midkine(MK)expression level and the pathophysiology of Alzheimer's disease(AD).MethodsSerum MK expression level in patients with AD(n=39)and healthy controls(n=42)were determined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsSerum MK expression level in patients with AD[(780.11±290.31)pg/ml]were significantly higher than those of healthy controls [(361.58±102.24)pg/ml,P＜0.05].MKhad a strong correlation with the AD(r=0.723,P＜0.05).SerumMKlevels in 28 patients(71.8%)were more than the dividing value(566pg/ml),but none of the controls did.Diagnostic tests revealed high value,high specificity(0.98)and positive predictive value(0.97).There were no significant difference in the MMSE score between the high-MK level group and normal-MK level group in the patients with AD (P＞0.05).ConclusionSerum MK levels were increased in patients with AD compared with those in controls, it may be contribute to the pathophysiology of this disease.

Alzheimer disease;Midkine;Biological markers;Diagnostic test [Modern Practical Medicine,2014,26(4):381-382]

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.003

R741

A

1671-0800(2014)04-0381-02

2013-11-10

（本文編輯：孫海兒）

315700浙江省象山，象山縣中醫(yī)醫(yī)院（朱仙芝、邱建達(dá)）；寧波市康寧醫(yī)院（李再忠）

李再忠，Email:lzznb@126.com