Study on the Hypoglycemic Effect of Gnaphalium on Type 2 Diabetic Mice

CHEN Xia， ZHOU Meng -ting，YANG Hao （HunanMedicalCollege，Huaihua418ooO，China）

【Abstract】Objective：To explore the hypoglycemic efect of aqueous extract （TQ）of Gnaphaliumon type 2 diabetes mellitus（T2DM）. Methods：After 40KM male mice were adaptively raised for one week，1O were randomly selectedas thecontrol group.Theremaining mice wereraised with high sugarandhigh fatcombinedwith tail vein injection of streptozotocin （STZ）at 40mg/kg to establish the T2DM mouse model. The mice with successful modeling were randomly divided into a model group，a positive group and an experimental group.The experimental group was given the aqueous extract of Gnaphalium at 8g/kg ，the positive group was given metformin at 0.03g/kg ，and the control groupandthe model were given thesame volume of distilled water.After continuous intragastric administration for 4 weeks，the random blood glucose，triglycerides and total cholesterol ofthe mice in each group weredetected.The changes in the body weight，food intakeand water intake of the mice were recorded.Results：Compared with that of the normal group，the levelsof bloodglucose，triglyceridesand total cholesterol in the model group were significantly increased （ Plt;0.01 ），the body weight was significantly decreased （ Plt;0.01 ），and the food intake and water intake increased.Compared with theof the model group，the levelsof blood glucose and triglycerides in the experimental group were significantly decreased （ Plt;0.05 ， Plt;0.01 ），the weight increased，and the food intake and water intake decreased. Conclusion： This study found that Gnaphaliumcan reduce the blood glucose and triglyceride levels of type 2 diabetic mice and improve the symptoms of diabetes.

【Key Words】Gnaphalium； Herbal Medicine of Dong Nationality； Diabetes； Hypoglycemic ； Streptozotocin

近年來，由于生活水平的提高、飲食結(jié)構(gòu)的改變以及日趨緊張的生活節(jié)奏方式等諸多因素的影響，2019年國際糖尿病聯(lián)盟指出20歲～79歲的成年人中，患有糖尿?。―iabetesmellitus，DM）的人數(shù)已達(dá)4.63億，我國這一數(shù)據(jù)也達(dá)到了1.164億，已成為糖尿病\"第一大國”[]。糖尿病是一種由于胰島素分泌不足和（或）作用缺陷引起的，以慢性高血糖為特征的代謝性疾病[2]在眾多的糖尿病患者中，2型糖尿病的比例約占 90%～95% 。表現(xiàn)為胰島素分泌相對(duì)缺乏或產(chǎn)生了胰島素抵抗，高血糖，且出現(xiàn)多飲多食多尿、體重下降等現(xiàn)象。隨著我國人口老齡化程度持續(xù)加深，中、青、少年長期處于緊張焦慮狀態(tài)并缺乏體育鍛煉，以車代步，這些都預(yù)示著我國的糖尿病患者數(shù)量會(huì)持續(xù)增長，糖尿病的控制顯得愈發(fā)重要[3-4]。天然植物蘊(yùn)含大量降糖活性成分，是開發(fā)降糖相關(guān)保健食品與藥品的重要資源。天青地白（Gnaphaliumja-ponicumThunb.）來源為菊科植物細(xì)葉鼠曲草的全草，據(jù)《中華本草》記載，有毛女兒菜、翻底白等22 個(gè)別名，春季開花后采收，曬干或鮮用。味甘、淡，性微寒。能疏風(fēng)清熱，利濕，解毒[5]?！吨袊弊遽t(yī)藥》湖南省侗醫(yī)常用驗(yàn)方記載，治“糖尿病”方：天青地白適量，洗凈切碎煎水當(dāng)茶喝，1＼～2月為1療程[6]。本文根據(jù)書籍中記載的天青地白藥效，利用我國南方常見的侗藥天青地白研究其對(duì)2型糖尿病模型小鼠降血糖的作用，以期為開發(fā)安全性好、藥效明確且成本低廉的民族醫(yī)藥提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑和儀器清潔級(jí)KM雄性小鼠40只，8周齡，體重（ 30±5）g ，購于沅江市惠源科教工程有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（湘）2019-0011，飼養(yǎng)于湖南醫(yī)藥學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，飼養(yǎng)室溫 22^°C～24^°C ，相對(duì)濕度 40%～55% ，自由攝食、飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。維持飼料由湖南醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，高糖高脂飼料（在維持飼料中添加 15% 蔗糖、 15% 豬油， 1% 蛋黃粉和谷氨酸鈉）[7-8]。STZ（批號(hào)：20230207）、檸檬酸（批號(hào)：20230415）和檸檬酸鈉（批號(hào)：20230415）購自北京博愛港生物技術(shù)有限公司。血糖儀及同批號(hào)血糖試紙購自三諾生物，甘油三酯和總膽固醇測(cè)定試劑盒（批號(hào)：141723001；批號(hào)141623008）購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（型號(hào)：RE52-99）購自上海亞榮生化儀器廠，德國BertholdLB942多功能酶標(biāo)儀。

1.2天青地白供試液的制備取天青地白鮮草（3＼～

5月于花、草、葉茂盛時(shí)采摘），水煎3次，每次 30min

過濾，合并水提物， 80^°C 水浴濃縮至 （生藥） /mL 滅菌放入冰箱冷藏[1]，實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水配置至所需濃度。

1.3建立2型糖尿病小鼠模型、分組與給藥方式取40只KM小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分為正常組（10只）和造模組（30只）。其中正常組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，造模組給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，為期4周。4周后，小鼠禁食、不禁水12h，造模組連續(xù)3天尾靜脈注射 20mg/mL 的鏈脲佐菌素（STZ）溶液，注射當(dāng)量為 80mg/kg 。 72h 后禁食12h斷尾取血，測(cè)空腹血糖，血糖值 gt;11.1mmol/L 認(rèn)為造模成功[9-10]，不合格者棄去，期間給予高糖高脂飼料（空白組給予普通飼料）。將造模成功的小鼠隨機(jī)分成3組，分別為模型組（ n=10 ）、實(shí)驗(yàn)組（ 8g/kg 天青地白水提物灌胃）（ n=10 ）、陽性組（ （0.03g/kg 二甲雙胍灌胃）（ n= 10），正常組和模型組灌胃蒸餾水，以上各組每日灌胃1次。連續(xù)灌胃4周。用藥干預(yù)期間各組糖尿病大鼠每日飼以高糖高脂飼料，正常組給予普通飼料[]

1.4指標(biāo)檢測(cè)

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用GraphpadPrism8統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以 表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較用LSD檢驗(yàn)，以Plt;0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組小鼠一般情況正常組小鼠毛色光滑亮澤，精神狀態(tài)良好，對(duì)外界環(huán)境刺激反應(yīng)靈敏，動(dòng)作迅速。模型組小鼠毛色焦枯，精神萎靡，反應(yīng)遲緩，出現(xiàn)多飲多食多尿表現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)過程中模型組、陽性組、實(shí)驗(yàn)組均陸續(xù)有小鼠死亡。與模型組比較，陽性組和實(shí)驗(yàn)組小鼠毛色、精神狀態(tài)、體重、攝食量及飲水量均有所改善。

2.2各組小鼠體重水平正常組小鼠體重水平較為穩(wěn)定，與正常組比較，模型組、陽性組體重低于正常組且呈下降趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ ；實(shí)驗(yàn)組體重低于正常組呈增加趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Plt;0.01） 。與模型組比較，實(shí)驗(yàn)組體重增加，陽性組體重降低，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ Pgt;0.05 。見表2。

2.3各組小鼠攝食量正常組小鼠攝食量較為穩(wěn)定，與正常組比較，模型組、陽性組和實(shí)驗(yàn)組攝食量明顯增加。與模型組比較，實(shí)驗(yàn)組攝食量降低，陽性組攝食量增加。見表3。

2.4各組小鼠飲水量正常組小鼠飲水量較為穩(wěn)定，與正常組比較，模型組、陽性組和實(shí)驗(yàn)組飲水量明顯增加。與模型組比較，陽性組、實(shí)驗(yàn)組飲水量降低。見表4。

2.5各組小鼠隨機(jī)血糖水平與正常組比較，模型組、陽性組和實(shí)驗(yàn)組血糖明顯升高（其中第0周是空腹血糖，第1＼～4周是隨機(jī)血糖）。與模型組比較，實(shí)驗(yàn)組第1＼～2周和第4周血糖明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)意義（ ?Plt;0.05 ）。見表5。

2.6各組小鼠血脂水平與正常組比較，模型組、陽性組和實(shí)驗(yàn)組甘油三酯和總膽固醇明顯升高，（其中第0周是空腹血脂，第1＼～4周是隨機(jī)血脂）。與模型組比較，實(shí)驗(yàn)組第2周和第4周甘油三酯明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)意義（ Plt;0.05） 。見表6。與模型組相比，陽性組和實(shí)驗(yàn)組總膽固醇水平呈降低趨勢(shì)，差異無統(tǒng)計(jì)意義（ Pgt;0.05 ，見表7。

3 討論

糖尿病是目前全世界第三大嚴(yán)重威脅人類健康的慢性非傳染性疾病，尤其是2型糖尿病，而且發(fā)病率在持續(xù)地增長。2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制主要是由于機(jī)體代謝紊亂，導(dǎo)致胰島素抵抗及胰島功能障礙，胰島素分泌減少、敏感性降低，使機(jī)體糖脂代謝異常[12]。很多中草藥中的功效成分具有調(diào)節(jié)血糖代謝的作用，但侗藥天青地白只在侗醫(yī)驗(yàn)方中有記載，沒有降血糖的文獻(xiàn)報(bào)道。

本研究在給予高糖高脂喂養(yǎng)并聯(lián)合尾靜脈注射STZ后， FBGgt;11.1mmol/L ，小鼠體重明顯降低，出現(xiàn)多飲多食多尿癥狀，表明2型糖尿病模型小鼠復(fù)制成功。本研究結(jié)果顯示：給予天青地白水提物灌胃后，2型糖尿病模型小鼠在造模后第1周和第2周血糖和甘油三酯水平上升程度出現(xiàn)了緩解，第4周血糖水平明顯降低，總膽固醇水平呈降低趨勢(shì)，體重呈增加趨勢(shì)，攝食量和飲水量呈減少趨勢(shì)，表明天青地白水提物具有調(diào)節(jié)2 型糖尿病模型小鼠血糖、改善血脂水平和改善糖尿病“三多一少”癥狀的作用。由于注射STZ后，血糖水平會(huì)出現(xiàn)先急速降低再攀升的過程，模型組小鼠血糖變化規(guī)律與這個(gè)過程相符合；跟模型組相比，陽性組小鼠血糖水平明顯降低，體重降低，與二甲雙胍作用機(jī)制相符合；跟模型組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠血糖和甘油三酯水平明顯降低，體重增加，提示天青地白水提物降糖作用可能與保護(hù)小鼠胰島細(xì)胞免受STZ破壞，改善小鼠胰島素水平相關(guān)。

本研究初步驗(yàn)證了天青地白水提物降血糖的作用，有助于提升侗醫(yī)藥的科學(xué)性和實(shí)用性；可以激發(fā)更多的人來整理和保存民間珍貴的醫(yī)學(xué)知識(shí)，有助于侗醫(yī)藥的傳承和保護(hù)。

綜上所述，天青地白水提物可有效降低2型糖尿病模型小鼠血糖和甘油三酯水平，改善糖尿病“三多一少”癥狀，可為2型糖尿病的輔助治療提供幫助，并為研究民族醫(yī)藥提供一定的價(jià)值。

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（收稿日期：2024-09-13）