勾偉穎，段辛威，楊燕妮，趙金閣，鄭春松，王麗麗，李西海

（福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院1，藥學(xué)院2，中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院3，福建 福州 350122）

骨肉瘤（osteosarcoma）是最常見的惡性骨腫瘤，發(fā)病期呈雙峰，第一個(gè)高峰期在青春期，多發(fā)生于膝部等具有廣泛縱向骨生長的部位；第二個(gè)高峰期為60 歲以上的老年人，通常與佩吉病相關(guān)[1]。因骨肉瘤的強(qiáng)侵襲性、高轉(zhuǎn)移性及耐藥性，導(dǎo)致臨床治療效果有待提升，且其具體發(fā)病機(jī)制尚不明確[2]。明確骨肉瘤的研究方向，提升骨肉瘤的診斷水平，提高骨肉瘤的治療效果，是亟待解決的臨床問題。因此，本研究基于CNKI 與Web of Science（WOS）核心數(shù)據(jù)庫，采用CiteSpace 與VOSviewer 軟件，可視化分析2003-2022 年國內(nèi)外的骨肉瘤研究作者、高頻關(guān)鍵詞、突現(xiàn)關(guān)鍵詞，從而追蹤和分析研究熱點(diǎn)，以期了解骨肉瘤近20 年來的研究趨勢(shì)，為骨肉瘤的研究提供參考與借鑒。

1 數(shù)據(jù)與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源及處理 文獻(xiàn)數(shù)據(jù)來源于2003-2022 年中國知網(wǎng)的SCI、EI、核心期刊、CSCI、CSCD 數(shù)據(jù)庫的中文文獻(xiàn)與WOS 核心合集數(shù)據(jù)庫中的英文文獻(xiàn)。中文文獻(xiàn)以“骨肉瘤”為主題，剔除明顯與主題無關(guān)、無作者、無摘要的文章、廣告和會(huì)議論文，共7416 篇，去除綜述并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行去重，共得到5392篇文獻(xiàn)。WOS 數(shù)據(jù)則是以“Osteosarcoma”為主題，共得到24 137 篇，去除綜述及會(huì)議論文等并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行去重后，共得到18 768 篇文獻(xiàn)。

1.2 方法 將文獻(xiàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入CiteSpace 軟件進(jìn)行處理和數(shù)據(jù)分析，時(shí)間跨度設(shè)置為2003 年1 月1 日-2022 年12 月31 日，時(shí)間切片設(shè)置為1 年，分析發(fā)文作者，以“net”格式導(dǎo)出數(shù)據(jù)，導(dǎo)入VOSviewer 得到發(fā)文作者共現(xiàn)圖。選取每個(gè)時(shí)間切片長度TOP50的關(guān)鍵詞，并對(duì)構(gòu)建的網(wǎng)絡(luò)利用Pathfinder 方法進(jìn)行剪切，將詞頻高于5 的關(guān)鍵詞顯示在圖上，分析關(guān)鍵詞，導(dǎo)出數(shù)據(jù)為“net”格式，導(dǎo)入VOSviewer 得到關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖，使用CiteSpace 進(jìn)一步對(duì)關(guān)鍵詞進(jìn)行共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)聚類分析及前20 關(guān)鍵詞突顯分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體概況 近20 年來，國內(nèi)外骨肉瘤研究的發(fā)文量日益增加。英文文獻(xiàn)發(fā)文量的數(shù)目及增長趨勢(shì)更為明顯，而中文文獻(xiàn)在總體增長的同時(shí)出現(xiàn)了上升后下降的趨勢(shì)（圖1）。骨肉瘤文獻(xiàn)的作者圖譜提示，中文文獻(xiàn)發(fā)文量以空軍軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院骨腫瘤研究所的周勇和范清宇，以及東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院吳蘇稼在作者合作網(wǎng)絡(luò)屬前3（圖2）；英文文獻(xiàn)發(fā)文量以云南省第一人民醫(yī)院王靜、芝加哥大學(xué)何通川、上海交通大學(xué)瑞金醫(yī)院骨科張偉斌為合作網(wǎng)絡(luò)前3（圖3）。中文文獻(xiàn)發(fā)文作者主要以高?；蜥t(yī)院為集中合作，總體相對(duì)分散，缺乏合作，部分甚至呈現(xiàn)獨(dú)立研究的狀態(tài)，而英文文獻(xiàn)發(fā)文作者集中分布，合作較密切。

圖1 國內(nèi)外骨肉瘤研究的發(fā)文量（2003-2022 年）

圖2 國內(nèi)骨肉瘤研究作者合作圖譜

圖3 國外骨肉瘤研究作者合作圖譜

2.2 關(guān)鍵詞

2.2.1 關(guān)鍵詞共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò) 使用VOSviewer 進(jìn)行國內(nèi)外關(guān)鍵詞共現(xiàn)，結(jié)果提示中文文獻(xiàn)以“細(xì)胞凋亡”“細(xì)胞增殖”“化療”“侵襲”“診斷”為除“骨肉瘤”外前5 高頻關(guān)鍵詞（圖4）；英文文獻(xiàn)以“二期臨床實(shí)驗(yàn)”“甲氨蝶呤”“轉(zhuǎn)移”“復(fù)發(fā)”“堿性磷酸酶”為除“骨肉瘤”外前5 高頻關(guān)鍵詞（圖5）。

圖4 CNKI 關(guān)鍵詞共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)

圖5 WOS 關(guān)鍵詞共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)

2.2.2 關(guān)鍵詞共現(xiàn) 網(wǎng)絡(luò)聚類通過CiteSpace 中的LLR 算法對(duì)中文文獻(xiàn)外關(guān)鍵詞分別進(jìn)行共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)聚類分析，中文文獻(xiàn)Modularity Q=0.4542＞0.3、英文文獻(xiàn)ModularityQ=0.3796＞0.3，網(wǎng)絡(luò)社團(tuán)結(jié)構(gòu)合理；中文文獻(xiàn)Mean Silhouette=0.7377＞0.5、英文文獻(xiàn)Mean Silhouette=0.7238＞0.5，可以認(rèn)為該聚類合理的，其中“骨肉瘤”“增殖”“骨腫瘤”“診斷”“腫瘤轉(zhuǎn)移”為中文文獻(xiàn)關(guān)鍵詞前5 聚類（圖6）；“細(xì)胞增殖”“細(xì)胞凋亡”“羥基磷灰石”“唑來膦酸”“多態(tài)性”為英文文獻(xiàn)前5 聚類（圖7）。

圖6 CNKI 關(guān)鍵詞共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)聚類圖譜

圖7 WOS 關(guān)鍵詞共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)聚類圖譜

2.2.3 關(guān)鍵詞突現(xiàn) 對(duì)中文文獻(xiàn)關(guān)鍵詞突現(xiàn)詞分析得到2003-2014 年間研究熱點(diǎn)主要集中在“基因表達(dá)”“基因治療”“誤診”“護(hù)理”“保肢治療”，自2016年起“細(xì)胞增殖”“細(xì)胞侵襲”“自噬”“生活質(zhì)量”“細(xì)胞凋亡”逐漸增加，提示相關(guān)話題可能依舊是目前中文文獻(xiàn)研究的熱點(diǎn)話題（圖8）；英文文獻(xiàn)關(guān)鍵詞突現(xiàn)詞分析顯示2003-2013 年間研究熱點(diǎn)主要集中在“輔助性化療”“基因表達(dá)”“體內(nèi)”“大劑量甲氨蝶呤”“mRNA”，自2018 年起“侵襲”“遷移”“l(fā)ncRNA”“circRNA”“納米粒子”成為熱點(diǎn)話題，且可能依舊是目前英文文獻(xiàn)研究的熱點(diǎn)話題（圖9）。

圖8 CNKI 關(guān)鍵詞突現(xiàn)分析圖

圖9 WOS 關(guān)鍵詞突現(xiàn)分析圖

2.3 中文研究熱點(diǎn)分析

2.3.1 骨肉瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、自噬和凋亡 關(guān)鍵詞細(xì)胞增殖、侵襲及自噬、凋亡分別在2016 年、2017 年明顯增加，其中以骨肉瘤細(xì)胞及動(dòng)物模型探討藥物作用和分子機(jī)制的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)類文獻(xiàn)居多。細(xì)胞增殖方面以山慈菇多糖及NF-κB/MAPK 的藥物和通路為引用量排名首位[3，4]；侵襲方面以柴胡皂苷-α 及Wnt/β-catenin 的藥物和通路為引用量排名首位[4，5]；自噬方面以鴉膽子素D 及AKT/mTOR 為引用量排名前3 的藥物和通路[6，7]；凋亡方面以石見穿多糖及PI3K/AKT/mTOR 的藥物和通路為引用量排名首位[7，8]。

2.3.2 骨肉瘤的診斷 骨肉瘤早期易誤診為軟組織挫傷、骨關(guān)節(jié)炎等，一旦確診，腫瘤常發(fā)展至晚期或伴轉(zhuǎn)移，錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)。因此，提高骨肉瘤的診斷率極為重要。此類研究熱點(diǎn)主要集中在骨肉瘤的病理學(xué)及影像學(xué)檢查。病理學(xué)檢查方面：活檢是診斷骨肉瘤的金標(biāo)準(zhǔn)[9]。2003-2012 年以針吸和切開活檢技術(shù)為主[10]。2013-2022 年在前述基礎(chǔ)上，增加血清標(biāo)志物檢測(cè)[11]、二代測(cè)序及分子檢測(cè)技術(shù)[12]。影像學(xué)方面：2003-2012 年以常規(guī)X 線片檢測(cè)侵襲性改變、MRI 明確病變性質(zhì)、胸部CT 檢測(cè)肺轉(zhuǎn)移有無為主[13]；2013-2022 年在前述方法基礎(chǔ)上增加18F-FDG PET/CT 以及影像組學(xué)分析并構(gòu)建模型后與分子、基因等微觀信息關(guān)聯(lián)進(jìn)一步彌補(bǔ)常規(guī)影像分析的不足[14]。

2.3.3 骨肉瘤的治療 此類研究熱點(diǎn)主要集中在骨肉瘤的化療、保肢及基因治療?；煼矫妫?003-2012年，以術(shù)前化療-手術(shù)-術(shù)后化療作為最標(biāo)準(zhǔn)的骨肉瘤治療方案，選用4 種經(jīng)典藥物序貫用藥或聯(lián)合用藥并長期隨訪[15]。2013-2022 年著重研究化療耐藥，比如中藥單體成分的研究、化療耐藥機(jī)制的研究以期降低化療耐藥及副作用，提高治療效果，如：FoxM1 通過上調(diào)c-myc 表達(dá)促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞順鉑耐藥性[16]。保肢治療方面：治療中心80%的患者采取保肢治療，常采用異體骨關(guān)節(jié)移植或滅活骨再植重建，但因耐用性差及復(fù)發(fā)率高致應(yīng)用受限。在此基礎(chǔ)上，腫瘤瘤段切除加人工假體置換術(shù)、腫瘤瘤段切除加異體半關(guān)節(jié)移植術(shù)以及可延長式人工假體人工假體置換逐漸發(fā)展以期減少手術(shù)并發(fā)癥、增強(qiáng)耐用性和減少復(fù)發(fā)[17]。在前述基礎(chǔ)上，聯(lián)合新輔助化療，優(yōu)化肢體功能、增強(qiáng)治療效果、降低不良反應(yīng)[18]，或采用3D 打印定制假體應(yīng)用于骨腫瘤切除重建，比起生物重建能更快恢復(fù)行走及持物功能[19]?；蛑委煼矫妫憾鄶?shù)研究僅局限在細(xì)胞及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究層面，如自殺基因?qū)侨饬錾L的作用研究[20]。磁輔助轉(zhuǎn)染技術(shù)逐漸應(yīng)用于骨肉瘤中，制備超順磁性聚乙烯亞胺納米粒（PEI-SPION-NPs），證實(shí)可以抑制基因載體的擴(kuò)散，促進(jìn)基因的區(qū)域高效表達(dá)、降低基因載體的全身反應(yīng)性，從而將基因安全地靶向輸送到細(xì)胞和組織[21]。

2.4 英文研究熱點(diǎn)分析

2.4.1 骨肉瘤的發(fā)病 此類研究熱點(diǎn)主要集中在骨肉瘤中的發(fā)病機(jī)制及相關(guān)疾病。骨肉瘤的發(fā)病率與腫瘤抑制基因的種系改變相關(guān)遺傳性疾病呈正相關(guān)，如遺傳性視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤和利-弗勞梅尼癌癥家族綜合征[22]。DNA 甲基化和組蛋白改性均可促進(jìn)骨肉瘤的發(fā)病并因此使用DNMT 抑制劑和HDAC 抑制劑DNA 甲基化行抗癌治療[23]。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)TP53、MAPK1 和ESR1 在骨肉瘤的發(fā)生中起重要作用，并主要富集在FGFR、MAPK 和Notch 信號(hào)通路中[24]。

2.4.2 骨肉瘤中的miRNA、lncRNA、circRNAmiRNA-95-3p 的過表達(dá) 通過TGF-β/CDKN1A/p21/Cyclin D1 促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞生長并抑制凋亡[25]，循環(huán)miRNA被指出與骨肉瘤發(fā)展相關(guān)，如血清中microRNA-17的高表達(dá)與骨肉瘤預(yù)后差相關(guān)[26]。骨肉瘤中存在失調(diào)的lncRNA 表達(dá)模式，這可能作為癌基因或抑制因子來調(diào)節(jié)骨肉瘤的進(jìn)展[27]，LINC01128 通過激活Wnt/β-catenin 信號(hào)通路促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞增殖[28]，DLX6-AS1 與miR-129-5p 相互作用，形成相互反饋環(huán)以激活Wnt 級(jí)聯(lián)反應(yīng)，從而促進(jìn)骨肉瘤的干性[29]。骨肉瘤組織中circTCF25 表達(dá)明顯升高，從而降低miR-206 水平，進(jìn)而激活MEK/ERK 和AKT/mTOR 途徑[30]。

2.4.3 骨肉瘤的治療 此類研究熱點(diǎn)主要集中在骨肉瘤的新輔助化療、免疫療法和納米藥物。新輔助化療方面：當(dāng)前40 歲以下兒童和成人的標(biāo)準(zhǔn)化療方案是大劑量甲氨蝶呤、阿霉素和順鉑聯(lián)用[31]。免疫療法方面：骨肉瘤引發(fā)的免疫逃逸致免疫療法成為骨肉瘤治療的研究熱點(diǎn)之一，靶向免疫檢查點(diǎn)蛋白的人抗體可用于打破免疫耐受并激活T 細(xì)胞反應(yīng)，如CTLA4、PD-1 及PD-L1[32]，嵌合抗原受體T 細(xì)胞療法通過從患者身上取出免疫細(xì)胞在體外進(jìn)行/不進(jìn)行基因修飾的情況下擴(kuò)增后返回給患者，從而特異性地殺死癌癥。當(dāng)前HER2、GD2、IL-11RA、IGF-1R、ROR1 及B7-H3 被證明是體外或體內(nèi)的良好靶標(biāo)[33]。納米療法方面：骨特異性遞送受到骨的獨(dú)特解剖特征的限制，因此生產(chǎn)對(duì)羥基磷灰石具有高親和力的靶向藥物能提高骨特異性遞送的速率，如與四膦酸鹽絡(luò)合的釤-153 膦酸鹽偶聯(lián)放射性藥物能明顯緩解骨肉瘤導(dǎo)致的疼痛[34]。生物活性玻璃和羥基磷灰石等陶瓷材料不僅可以作為極好的遞送載體，還可以參與骨再生活動(dòng)[35]。

3 總結(jié)

本文基于CiteSpace 及VOSviewer 軟件對(duì)2003-2022 年國內(nèi)外骨肉瘤的研究熱點(diǎn)進(jìn)行文獻(xiàn)計(jì)量分析得到，國內(nèi)外可持續(xù)發(fā)展研究熱點(diǎn)有諸多相似之處，包括骨肉瘤細(xì)胞功能（增殖、遷移、凋亡及自噬）的影響與骨肉瘤診療的研究。由于研究背景、研究方法等方面的差異，導(dǎo)致國內(nèi)外學(xué)者的、研究熱點(diǎn)側(cè)重點(diǎn)有所不同。從研究內(nèi)容來看，在對(duì)骨肉瘤細(xì)胞功能研究方面，發(fā)表英文文獻(xiàn)的研究更注重綜合性，挖掘其發(fā)生發(fā)展與具體機(jī)制并引導(dǎo)診治，而國內(nèi)以基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究居多；對(duì)骨肉瘤的治療方面，發(fā)表英文文獻(xiàn)的研究更加深入，尤其使納米材料以及免疫療法的應(yīng)用。然而對(duì)中藥復(fù)方及單體的研究較中文文獻(xiàn)相比更欠缺；對(duì)于骨肉瘤相關(guān)基因方面，英文文獻(xiàn)對(duì)于組學(xué)、生物信息學(xué)技術(shù)的應(yīng)用更為廣泛深入。