任鼎鼎，鄭惠娜，2，3，4*，李晉禎，曹文紅，2，3，4，林海生，2，3，4，秦小明，2，3，4

（1 廣東海洋大學(xué)食品科技學(xué)院 廣東湛江524088 2 廣東海洋大學(xué)深圳研究院 廣東深圳518108 3 國(guó)家貝類加工技術(shù)研發(fā)分中心（湛江）廣東省水產(chǎn)品加工與安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣東省海洋生物制品工程實(shí)驗(yàn)室 廣東湛江524088 4 海洋食品精深加工關(guān)鍵技術(shù)省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心 大連工業(yè)大學(xué) 遼寧大連 116034）

營(yíng)養(yǎng)不良對(duì)癌癥患者有很強(qiáng)的負(fù)面影響，容易導(dǎo)致機(jī)體狀態(tài)和生活質(zhì)量下降，從而提高感染疾病以及增加死亡的風(fēng)險(xiǎn)，延長(zhǎng)住院時(shí)間[1]。因此，營(yíng)養(yǎng)支持對(duì)患者的生存和發(fā)展起著重要的作用[2]。有研究表明，在癌癥模型中，補(bǔ)充牛肉提取物可以通過(guò)調(diào)節(jié)能量?jī)?chǔ)存和抗氧化性，改善因化學(xué)療法引起的身體器官和體重減輕、疲勞以及毒性作用[3]。牡蠣多糖可以有效改善5-氟尿嘧啶（5-FU）引起的腸道黏膜損傷以及營(yíng)養(yǎng)不良，糾正荷瘤小鼠的蛋白代謝，改善人體能量消耗以及化療患者的身體狀況[4]，同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)支持對(duì)化療后臨床患者也具有重要的作用。Zhang 等[5]研究顯示增加蛋白質(zhì)的攝入以及免疫營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可減少患者術(shù)后并發(fā)癥及縮短住院時(shí)間。Lin 等[6]研究表明及時(shí)給予營(yíng)養(yǎng)支持可以維持化療患者的體重，并提高化療效果。Mele 等[7]研究顯示，改善患者營(yíng)養(yǎng)狀況可以減少術(shù)后并發(fā)癥和住院時(shí)間，從而降低患者及醫(yī)院成本。由此，可以看出，在腫瘤患者化療過(guò)程中，適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)支持可以改善腫瘤患者的營(yíng)養(yǎng)狀況，縮短機(jī)體恢復(fù)時(shí)間。

皺紋盤鮑（Haliotis discus hannai），又稱“腹魚”，是軟體動(dòng)物門單殼貝類的一種。我國(guó)鮑魚產(chǎn)量極為豐富，2020 年，中國(guó)的鮑魚養(yǎng)殖產(chǎn)量為203 485 t，比2019 年增長(zhǎng)12.88%[8]。鮑魚蛋白質(zhì)含量高達(dá)19.89%，脂肪含量為0.13%，氨基酸種類較為豐富（17 種）且含量較高（最高達(dá)18.12 g/100 g），8 種必需氨基酸含量可達(dá)5.08 g/100 g，同時(shí)還含有棕櫚酸、EPA、DHA、維生素以及微量元素等，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[9]。鮑魚肉質(zhì)嫩滑、味道鮮美，深受廣大消費(fèi)者喜愛(ài)[10]。

本研究通過(guò)構(gòu)建Lewis 肺癌化療小鼠模型，以鮑魚肌肉全蛋白為原料對(duì)化療后肺癌小鼠進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持，為開發(fā)腫瘤患者營(yíng)養(yǎng)支持相關(guān)特醫(yī)食品提供理論基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料 皺紋盤鮑11～12 月購(gòu)自湛江市霞山區(qū)東風(fēng)批發(fā)市場(chǎng)，規(guī)格70 g 左右；將新鮮鮑魚去除殼和內(nèi)臟，清洗打漿，打漿后在-45 ℃下冷凍干燥，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 試劑 順鉑（抗腫瘤藥物），中國(guó)山東齊魯制藥有限公司；磷酸緩沖鹽溶液（PBS）、南美胎牛血清、DMEM 培養(yǎng)基、青霉素-鏈霉素雙抗、胰蛋白酶，購(gòu)自美國(guó)Gibco 公司；血紅蛋白（Hemoglobin，Hb）試劑盒、白蛋白（Albumin，ALB）試劑盒，購(gòu)自南京建成生物工程研究所；前白蛋白（Prealbumin，PA）Elisa 試劑盒，購(gòu)自江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司；生理鹽水、醫(yī)用酒精，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

CKX41 型倒置顯微鏡，日本Olympus 公司；MCO-175 CO2培養(yǎng)箱，三洋（日本）公司；SW-CJ-2FD 型雙人超級(jí)操作臺(tái)，蘇州凈化設(shè)備有限公司；DM2000LED型顯微鏡，德國(guó)Leica公司；Cary60UV-Vis 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，美國(guó)Agilent Technologies 公司；Varioskan Flash 多功能酶標(biāo) 儀，美國(guó)Thermo Fisher Scentific 公司；Microfuge 22R Centrifuge 型低溫高速離心機(jī)，美國(guó)Beckman Coulter公司；Countstar IC1000 全 自 動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，北京眾力挽生物科技有限公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋，常州國(guó)華電器有限公司；立式壓力滅菌鍋，上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司；艾瑞澤電子游標(biāo)卡尺，青島易購(gòu)五金工具有限公司；JYL-CO12 九陽(yáng)料理機(jī)，山東九陽(yáng)股份有限公司；Eyela FD-5N 真空冷凍干燥機(jī)，日本Tokya Rikakikai 有限公司

1.3 方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及細(xì)胞 C57BL/6 雌性小鼠，6 周齡，體質(zhì)量為（20±2）g，由濟(jì)南鵬悅試驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司提供，小鼠全部在無(wú)特定病原體（Specific pathogen free，SPF）級(jí)環(huán)境中分籠飼養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物房12 h 明暗循環(huán)，溫度為（22±1）℃，濕度為60%～70%，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中小鼠自由飲食飲水。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（魯）2019-0003，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證編號(hào)：SYXK（粵）2019-0204（廣東海洋大學(xué)SPF 級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室）。

Lewis 肺癌細(xì)胞（LLC）購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)院細(xì)胞資源中心。將購(gòu)買的細(xì)胞拆掉包裝，培養(yǎng)瓶放置于37 ℃的CO2培養(yǎng)箱，靜置1～2 h，鏡下觀察，同時(shí)進(jìn)行拍照。待細(xì)胞穩(wěn)定且生長(zhǎng)狀態(tài)較好便可進(jìn)行傳代。

1.3.2 Lewis 肺癌化療小鼠模型的建立 取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的Lewis 肺癌細(xì)胞（LLC），用PBS 將細(xì)胞密度調(diào)為1×107個(gè)/mL，右腋下（每只小鼠0.1 mL）進(jìn)行注射接種[11]。建立模型后，用不同質(zhì)量濃度（0.02，0.04，0.06，0.08，0.10，0.20 mg/mL）順鉑進(jìn)行注射，以生長(zhǎng)指標(biāo)（體質(zhì)量、腫瘤體積、抑瘤率、免疫器官）和營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)（血清ALB、PA、Hb 水平）為依據(jù)，優(yōu)選最佳化療質(zhì)量濃度，建立化療小鼠模型。

1.3.3 Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持分組 參考文獻(xiàn)[12]的方法進(jìn)行一定修改，將成功建模的小鼠隨機(jī)分組，每組12 只。對(duì)小鼠進(jìn)行連續(xù)12 d 的營(yíng)養(yǎng)支持。實(shí)驗(yàn)分組：空白對(duì)照組（NT）灌胃生理鹽水；鮑魚肌肉全蛋白粉低、中、高劑量組（AMPPLD、AMPP-MD、AMPP-HD，分別灌胃AMPP 15，30，60 g/kg；陽(yáng)性瑞能組（PC-RN）根據(jù)產(chǎn)能比計(jì)算得到灌胃質(zhì)量濃度為0.585 g/mL；陽(yáng)性乳清蛋白組（PC-RQ），灌胃質(zhì)量濃度為0.585 g/mL。所有組分每只小鼠每天灌胃劑量為0.2 mL。

1.3.4 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后一般情況觀察及存活率 觀察接種Lewis 肺癌細(xì)胞后的小鼠精神狀態(tài)、體質(zhì)量變化、進(jìn)食情況以及體表特征，記錄每組小鼠的存活數(shù)量并計(jì)算存活率。

1.3.5 Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后體質(zhì)量、有效體質(zhì)量、體質(zhì)量變化及有效體質(zhì)量變化 采用電子天平對(duì)肺癌化療小鼠進(jìn)行體質(zhì)量監(jiān)測(cè)，對(duì)處死后小鼠的體質(zhì)量和瘤體質(zhì)量進(jìn)行測(cè)定并記錄。

1.3.6 Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后腫瘤體積、瘤體質(zhì)量及抑瘤率的變化

1.3.6.1 腫瘤體積的變化 用游標(biāo)卡尺對(duì)小鼠腫瘤的最大長(zhǎng)徑和最小短徑進(jìn)行測(cè)量（2 d 一次），并繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。

1.3.6.2 瘤體質(zhì)量及抑瘤率的變化 眼球取血后處死小鼠，從小鼠身上完全剝離瘤體，用電子天平對(duì)其精確稱量，記錄瘤體質(zhì)量。

1.3.7 Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后臟器指數(shù)的變化 眼球取血后處死小鼠，進(jìn)行解剖，取出脾臟和胸腺，對(duì)其進(jìn)行稱量后計(jì)算臟器指數(shù)。

1.3.8 Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的測(cè)定

1.3.8.1 血清處理 末次營(yíng)養(yǎng)支持24 h 后，進(jìn)行眼球取血并脫頸處死。將血液樣本放置于離心管中，室溫靜置4 h 后3 000 r/min 離心5 min，取上清液分裝于離心管中，置于-80 ℃冰箱中備用。

1.3.8.2 血清ALB 含量的測(cè)定 參考試劑盒說(shuō)明書，ALB 用溴甲酚綠法測(cè)定。設(shè)置空白孔（即加入2.5 μL 的蒸餾水）、標(biāo)準(zhǔn)孔（即加入2.5 μL 的標(biāo)準(zhǔn)液）、測(cè)定孔（即加入2.5 μL 的樣本），之后在每個(gè)孔中加入250 μL 的試劑一應(yīng)用液。輕輕振蕩混勻，室溫靜置10 min，在波長(zhǎng)630 nm 處用酶標(biāo)儀測(cè)量，ALB 含量按式（9）進(jìn)行計(jì)算。

1.3.8.3 血清PA 含量的測(cè)定 根據(jù)試劑盒在波長(zhǎng)450 nm 處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品活性；其中標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.005x＋0.1244，R2=0.994。

1.3.8.4 血清Hb 含量的測(cè)定 濃縮儲(chǔ)備試劑用蒸餾水1∶99 稀釋，配成Hb 稀釋液應(yīng)用液（即1 mL 加蒸餾水至100 mL），充分混勻，4 ℃保存。設(shè)置空白管（加入蒸餾水0.01 mL）和測(cè)定管（待測(cè)樣本0.01 mL），之后在每孔加入2.5 mL 的Hb 稀釋液應(yīng)用液，充分混勻，靜置5 min，在波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定吸光度值。血清Hb 含量按式（10）計(jì)算。

血紅蛋白含量（g/L）=（測(cè)定OD 值-空白OD值）×367.7 （10）

1.3.9 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 24.0 進(jìn)行顯著性差異（P＜0.05）分析，兩組數(shù)據(jù)之間采用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性差異（P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Origin 2018 進(jìn)行作圖，數(shù)據(jù)表示為（），多樣本比較采用單因素方差分析法（ANOVA）分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 順鉑化療質(zhì)量濃度篩選

2.1.1 Lewis 肺癌小鼠模型的建立 在雌性C57BL/6 小鼠右腋下注射Lewis 腫瘤細(xì)胞，小鼠生長(zhǎng)狀態(tài)良好，無(wú)不良反應(yīng)。5 d 后可以觸摸到綠豆大小的腫塊；接種7 d 后，接種部位可明顯看到腫瘤組織。形態(tài)大多呈橢圓形或圓形，大小不一，小鼠成模率為100%。

圖1 Lewis 肺癌小鼠實(shí)體瘤模型的構(gòu)建Fig.1 The construction of a solid tumor model of Lewis lung cancer mouse

2.1.2 不同化療質(zhì)量濃度對(duì)肺癌小鼠存活率的影響 表1 顯示了不同化療質(zhì)量濃度下Lewis 肺癌小鼠的存活情況，與對(duì)照組對(duì)比，化療質(zhì)量濃度為0.02 mg/mL 和0.04 mg/mL 的腫瘤小鼠無(wú)死亡現(xiàn)象，存活時(shí)間最長(zhǎng)，而其它化療質(zhì)量濃度的腫瘤小鼠在化療結(jié)束后均有不同程度的死亡，0.06 mg/mL化療后的腫瘤小鼠的存活率為37.5%，0.08，0.10 mg/mL 以及0.20 mg/mL 化療后的腫瘤小鼠在化療第6 天全部死亡。有研究表明，化療濃度較高時(shí)會(huì)增加腎臟毒性風(fēng)險(xiǎn)，從而影響小鼠的發(fā)病率和死亡率[13]。本研究結(jié)果顯示順鉑不僅影響Lewis 肺癌小鼠的存活率，且具有劑量依賴性。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)化療質(zhì)濃度為0.02 mg/mL 的腫瘤小鼠生命特征優(yōu)于0.04 mg/mL 的小鼠。因此，選用0.02 mg/mL 作為最佳化療質(zhì)量濃度。

表1 不同化療質(zhì)量濃度Lewis 肺癌小鼠存活率（n=8）Table 1 Survival rate of Lewis lung cancer mice with different chemotherapy mass concentrations（n=8）

2.1.3 不同化療質(zhì)量濃度對(duì)肺癌小鼠免疫器官的影響 脾臟和胸腺是最重要的免疫器官，在一定程度上不僅可以反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)、弱還可以反映營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收情況[14]。由圖2 所示，與NT 組相比，0.02 mg/mL 和0.04 mg/mL 順鉑化療后小鼠的臟器指數(shù)均明顯降低（P＜0.05），且具有劑量依賴性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，順鉑對(duì)Lewis 肺癌小鼠的免疫器官有一定的損傷作用，明顯降低了免疫器官的質(zhì)量[15]。然而，0.02 mg/mL 和0.04 mg/mL化療后的免疫器官結(jié)果顯示沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。

2.1.4 不同化療質(zhì)量濃度對(duì)Lewis 肺癌小鼠營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響 ALB 是營(yíng)養(yǎng)代謝的敏感性指標(biāo)，營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)與機(jī)體的免疫功能有著密不可分的聯(lián)系[16]。由圖3 可以看出，與NT 組對(duì)比，0.02 mg/mL 和0.04 mg/mL 化療處理的肺癌小鼠血清ALB 含量雖降低，但無(wú)顯著性差異（P＞0.05），可能是因?yàn)槟[瘤小鼠在化療后出現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)不良，從而導(dǎo)致ALB 表達(dá)量降低，與蔣妍等[17]的研究結(jié)果一致。

PA 由肝細(xì)胞合成，半衰期短，能更快地反映營(yíng)養(yǎng)攝入量正或負(fù)平衡，是目前國(guó)際上評(píng)價(jià)營(yíng)養(yǎng)狀況和監(jiān)測(cè)營(yíng)養(yǎng)支持效果的一種血清蛋白質(zhì)[18-19]。由圖3b 可以看出，0.02 mg/mL 化療后腫瘤小鼠的血清PA 水平略微升高且無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；而0.04 mg/mL 化療后腫瘤小鼠的血清PA水平下降，且無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。機(jī)體患有腫瘤時(shí)，其血漿水平會(huì)明顯下降，影響免疫功能[20]；同時(shí)，化療藥物的副作用會(huì)產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)一步破壞免疫系統(tǒng)[21]。

Hb 是機(jī)體運(yùn)送氧的主要蛋白，可以反映機(jī)體代謝水平，是反映營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)[22]。由圖3c 可以看出，與NT 組相比，0.02 mg/mL 和0.04 mg/mL 化療后肺癌小鼠的血清血紅蛋白含量不斷降低，且具有顯著性差異（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)中0.02 mg/mL 化療后小鼠的生命特征優(yōu)于0.04 mg/mL，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，選擇0.02 mg/mL 順鉑為L(zhǎng)ewis 肺癌化療小鼠的最佳化療質(zhì)量濃度。

圖3 順鉑對(duì)Lewis 肺癌小鼠營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響Fig.3 The effect of cisplatin on nutritional indicators of Lewis lung cancer mice

2.2 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠的營(yíng)養(yǎng)支持

2.2.1 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠的體質(zhì)量、有效體質(zhì)量、體質(zhì)量變化及有效體質(zhì)量變化的影響 體質(zhì)量是腫瘤病人最常用的營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，蛋白質(zhì)和熱量攝入不足會(huì)導(dǎo)致腫瘤病人體重降低[23]。由圖4 可以看出，在整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期，各組小鼠體質(zhì)量不斷增加。進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持后，與NT 組對(duì)比，各組小鼠的體質(zhì)量均低于NT 組。

圖4 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠體質(zhì)量的影響Fig.4 The effect of AMPP on the body weight of Lewis lung cancer chemotherapy mice

由表2 可以看出，使用AMPP 對(duì)Lewis 肺癌小鼠進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持后發(fā)現(xiàn)，處死時(shí)的各組小鼠體質(zhì)量較首次營(yíng)養(yǎng)支持時(shí)的體質(zhì)量明顯增加；與NT 組相比，處死時(shí)各組小鼠體質(zhì)量和小鼠有效體質(zhì)量無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。與NT 組相比，PC-RN 組小鼠的有效體質(zhì)量變化有顯著性差異（P＜0.05），可能是因?yàn)榛熀笮∈笊眢w機(jī)能受到影響導(dǎo)致小鼠營(yíng)養(yǎng)不良，從而表現(xiàn)為體質(zhì)量下降。與Grobler 等[24]研究食物或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充能夠增加患者的體重的結(jié)果一致。

表2 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠體質(zhì)量變化的影響（n=10）Table 2 The effect of AMPP on the weight change of Lewis lung cancer chemotherapy mice（n=10）

2.2.2 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠免疫器官的影響 脾臟和胸腺是最重要的免疫器官，在一定程度上直接反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)、弱[25]。臟器指數(shù)不僅可以反映內(nèi)臟功能強(qiáng)、弱還可以反映營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收情況[14]。如圖5 所示，與NT 組對(duì)比，AMPP-LD、AMPP-HD 組對(duì)小鼠的脾臟指數(shù)略微升高，而AMPP-MD 降低，且各組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P＞0.05）。與NT 組對(duì)比，AMPP-MD、AMPPHD 組對(duì)小鼠胸腺指數(shù)雖明顯高于NT 組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞＞0.05），表明AMPP 對(duì)機(jī)體免疫器官的影響較小，與趙凱麗[26]研究的結(jié)果一致，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因可能是AMPP 短期內(nèi)對(duì)小鼠機(jī)體免疫功能作用不明顯。

圖5 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠免疫器官的影響Fig.5 The effect of AMPP on the immune organs of Lewis lung cancer chemotherapy mice

2.2.3 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠腫瘤體積、瘤體質(zhì)量以及抑瘤率的影響 由圖6 可以看出，與NT 組相比，各組分腫瘤體積總體呈升高的趨勢(shì)。從整個(gè)營(yíng)養(yǎng)周期來(lái)看，AMPP-LD 組小鼠的腫瘤體積增長(zhǎng)最大，為5 133 mm3。AMPP-HD 組小鼠的腫瘤體積增長(zhǎng)最小，為3 900 mm3，與劉丹等[27]的研究結(jié)果一致，說(shuō)明在給予腫瘤小鼠營(yíng)養(yǎng)支持后，不會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)。

圖6 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠腫瘤體積的影響Fig.6 The effect of AMPP on tumor volume in Lewis lung cancer chemotherapy mice

由表3 可知，與NT 組相比，各組瘤體質(zhì)量沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。AMPP-MD 平均瘤重最小，為（5.09±2.16）g，抑瘤率為20.7%。PC-RN 組小鼠的平均瘤重為（7.60±1.44）g，抑瘤率為-18.4%，由此說(shuō)明與NT 組對(duì)比，PC-RN 組的瘤體質(zhì)量大于NT 組。此結(jié)果與段明珉等[28]的研究結(jié)果一致，出現(xiàn)不顯著的原因可能是使用鮑魚肌肉蛋白粉進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持后會(huì)導(dǎo)致小鼠進(jìn)食差、代謝增快而影響效果，很難在短時(shí)間內(nèi)提高小鼠的免疫力。

表3 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠腫瘤質(zhì)量和抑瘤率的影響Table 3 Effects of AMPP on tumor weight and tumor inhibition rate in Lewis lung cancer chemotherapy mice

2.2.4 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響 由圖7a 可以看出，與NT 組相比，AMPP 不同劑量組的ALB 高于NT 組（P＞0.05），可能是因?yàn)榛熀髮?dǎo)致蛋白合成減少，而ALB 的半衰期較長(zhǎng)，對(duì)其進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持的時(shí)間較短，因此短期白蛋白水平的變化不明顯[29]。AMPP-MD 組的ALB 最高說(shuō)明AMPP-MD 組對(duì)肺癌化療小鼠ALB 影響最大，此結(jié)果與抑瘤率呈正相關(guān)。由圖7b 可以看出，與NT 組對(duì)比，AMPP 組PA 明顯高于NT 組，且AMPP-LD 具有顯著性差異（P＜0.05），說(shuō)明AMPP 進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持后改善了化療小鼠的營(yíng)養(yǎng)狀況，這與李偉等[30]的研究結(jié)果一致。營(yíng)養(yǎng)支持后PA 質(zhì)量濃度迅速升高，較ALB 更能及時(shí)地反映機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)狀況，而ALB 和PA 出現(xiàn)不一致的原因可能是其兩種蛋白的半衰期不同，對(duì)營(yíng)養(yǎng)支持的敏感性存在差異[31]。由圖7c 可以看出，與NT 組對(duì)比，AMPP 組的Hb 明顯降低，且具有顯著性差異（P＜0.05），可能是因?yàn)榛熀髮?dǎo)致Hb 下降，同時(shí)隨著化療周期以及質(zhì)量濃度的增加，Hb 更低，表明腫瘤小鼠處于營(yíng)養(yǎng)不良的狀態(tài)，貧血可導(dǎo)致腫瘤組織缺氧，使腫瘤細(xì)胞的基因、蛋白質(zhì)組和基因組發(fā)生變化，進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤的侵襲[32]。

圖7 AMPP 對(duì)Lewis 肺癌化療小鼠營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響Fig.7 The effects of AMPP on nutritional indicators of Lewis lung cancer chemotherapy mice

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，順鉑化療后的腫瘤小鼠，其身體機(jī)能以及營(yíng)養(yǎng)狀況被明顯抑制，結(jié)合小鼠身體機(jī)能的變化，確定Lewis 肺癌小鼠的最佳化療質(zhì)量濃度為0.02 mg/mL。使用AMPP 進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)支持后，可明顯增加小鼠的體質(zhì)量、腫瘤體積等；與NT 組對(duì)比，各劑量組的AMPP 均能提高化療小鼠的血清ALB、PA 及Hb 水平。由此得出，AMPP 對(duì)肺癌化療小鼠的營(yíng)養(yǎng)狀況具有明顯地改善作用，由于營(yíng)養(yǎng)狀況受多種因素的影響，不同個(gè)體之間機(jī)體的消耗程度也有差異，因此采用3 種指標(biāo)，綜合考慮進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)評(píng)估。本研究結(jié)果為開發(fā)腫瘤患者營(yíng)養(yǎng)支持相關(guān)特醫(yī)食品研究提供理論基礎(chǔ)依據(jù)。