周芳 邢曉玲 余春苗 周洲 王薇
摘 要:地塞米松在動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)中廣泛使用,若使用不當(dāng)會(huì)造成動(dòng)物源性食品中藥物殘留超標(biāo),給食品安全帶來(lái)隱患。動(dòng)物源性食品中地塞米松殘留的檢測(cè)技術(shù)有儀器分析法和免疫分析法,儀器分析法包括氣相色譜、高效液相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜;免疫分析法包括免疫層析法和酶聯(lián)免疫法。本文通過(guò)對(duì)上述檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展的梳理和總結(jié),以期為動(dòng)物源性食品中地塞米松殘留檢測(cè)的相關(guān)研究和安全監(jiān)管提供參考。
關(guān)鍵詞:動(dòng)物源性食品;地塞米松;殘留檢測(cè);儀器分析;免疫分析法
Research Progress on Detection Technology of Dexamethasone Residues in Animal-derived Foods
ZHOU Fang, XING Xiaoling, YU Chunmiao, ZHOU Zhou, WANG Wei
(Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300, China)
Abstract: Dexamethasone is widely used in the animal breeding industry. Drug residues in animal-derived foods will be caused by improper use of dexamethasone, which will bring hidden dangers to food safety. There are two kinds of techniques for dexamethasone residue detection in animal-derived foods, one of which is based on instrument including gas chromatography, high performance liquid chromatography, gas chromatography-mass spectrometry, liquid chromatography-mass spectrometry, liquid chromatography-tandem mass spectrometry and ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; another is based on immunoassay including immunochromatography and enzyme-linked immunosorbent assay. By sorting out and summarizing the research progress of the above detection technology, it is expected to provide a reference for the research and safety supervision of dexamethasone residue detection in animal-derived foods.
Keywords: animal-derived foods; dexamethasone; residue detection; instrumental analysis; immunoassay
地塞米松(Dexamethasone)又稱(chēng)氟美松、氟甲強(qiáng)的松龍,是一種人工合成的糖皮質(zhì)激素,屬于甾體類(lèi)化合物,在獸醫(yī)臨床中常用到醋酸地塞米松和地塞米松磷酸鈉。醋酸地塞米松為白色或類(lèi)白色的結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,在乙醇或氯仿中略溶,在乙醚中極微溶,在水中不溶,常制成片劑。地塞米松磷酸鈉為白色或微黃色粉末,在水中或甲醇中溶解,在丙酮、乙醚中幾乎不溶,常制備為注射劑。地塞米松的藥理作用主要是抗炎、抗過(guò)敏、免疫抑制和抗休克,在獸醫(yī)臨床上廣泛應(yīng)用于治療母畜代謝病,或與抗生素聯(lián)合用于治療感染性疾病。由于其能提高飼料的轉(zhuǎn)化率,促進(jìn)畜禽生長(zhǎng),因此也用于畜牧生產(chǎn)[1-2]。然而,如果在動(dòng)物生長(zhǎng)過(guò)程中過(guò)量或不正確使用該藥,會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)水腫、低血鉀、肌肉萎縮、幼畜生長(zhǎng)停滯和骨質(zhì)疏松等癥狀;同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致其在動(dòng)物可食性組織中殘留。盡管這類(lèi)藥物殘留很低,但如果長(zhǎng)期食用地塞米松殘留超標(biāo)食品,會(huì)引起人體激素代謝紊亂、肥胖、致畸或致癌等,產(chǎn)生蓄積性毒性、生態(tài)毒性,對(duì)人體健康和生態(tài)環(huán)境都會(huì)產(chǎn)生危害[3-5]。
1 地塞米松殘留限量規(guī)定
由于用藥安全意識(shí)淡薄和經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)使,養(yǎng)殖過(guò)程中不遵守休藥期或過(guò)量使用地塞米松的現(xiàn)象時(shí)有存在。為規(guī)范該藥物的使用、確保動(dòng)物源性食品的質(zhì)量安全以及保證消費(fèi)者的健康,有必要對(duì)動(dòng)物源性食品中地塞米松的殘留加強(qiáng)管理。很多國(guó)家都嚴(yán)格禁止將地塞米松作為動(dòng)物的生長(zhǎng)激素進(jìn)行使用,同時(shí)限制其用于動(dòng)物源性食品中,并提出了嚴(yán)格的限量要求(表1)[6-7]。
2 地塞米松殘留檢測(cè)技術(shù)
2.1 儀器分析法
2.1.1 氣相色譜法
氣相色譜(Gas Chromatography,GC)是一種以氣體為流動(dòng)相的色譜法,氣體流動(dòng)相稱(chēng)為載氣,注入進(jìn)樣口的物質(zhì)或其衍生物被加熱氣化后,由載氣帶入色譜柱進(jìn)行分離,先后被檢測(cè)器檢出。氣相色譜一般適用于分析分子量不大、有一定揮發(fā)性、在氣化或高溫下不分解的物質(zhì),若分子量大可以通過(guò)各種處理衍生為易揮發(fā)的化合物進(jìn)行測(cè)定。
糖皮質(zhì)激素?fù)]發(fā)性不夠,應(yīng)用氣相色譜技術(shù)檢測(cè)時(shí)通常需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)难苌磻?yīng),所以樣品的前處理相對(duì)比較麻煩。早期用于檢測(cè)糖皮質(zhì)激素的氣相色譜分析方法使用的是OV-17柱,檢測(cè)的是糖皮質(zhì)激素的三甲基硅烷的衍生物[8]。氣相色譜的靈敏度可以基本達(dá)到獸藥殘留的要求,但不適合痕量獸藥殘留分析的要求。
2.1.2 高效液相色譜法
高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是目前應(yīng)用廣泛的一種分離分析技術(shù),采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵裝入有固定相的色譜柱中,柱內(nèi)各成分在兩相中分配系數(shù)存在微小差異而被分離,通過(guò)檢測(cè)器實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品的分析。該方法適合不揮發(fā)性化合物、極性化合物和熱不穩(wěn)定化合物的分析測(cè)定。糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)通常選用配有紫外檢測(cè)器的液相色譜儀,可以提供比較滿(mǎn)意的選擇性和靈敏度。
20世紀(jì)90年代初,研究人員用正相和反相色譜法檢測(cè)牛肉中的地塞米松,此后用于檢測(cè)糖皮質(zhì)激素的正相和反相色譜技術(shù)得到迅速發(fā)展[9-10]。2007年我國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布了高效液相色譜法檢測(cè)豬可食性組織中地塞米松殘留的標(biāo)準(zhǔn)[11]。周佳等[12]建立了同時(shí)檢測(cè)畜禽肉中地塞米松和呋喃唑酮?dú)埩舻母咝б合嗌V法,該方法分離效果良好,平均回收率為85.41%~95.20%,最低檢出限達(dá)1.0~2.0 μg/mL。與氣相色譜技術(shù)相比,高效液相色譜不需要對(duì)樣品進(jìn)行衍生化,易于操作;但由于糖皮質(zhì)激素的種類(lèi)較多且分子結(jié)構(gòu)相似程度大,導(dǎo)致在用該法檢測(cè)時(shí)存在地塞米松和其他糖皮質(zhì)激素分離度欠佳的問(wèn)題[6,13]。
2.1.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)是將GC和MS通過(guò)接口連接起來(lái),GC將復(fù)雜混合物分離成單組分后進(jìn)入MS。MS是在電場(chǎng)和磁場(chǎng)中將運(yùn)動(dòng)的離子,如帶電荷的原子、分子或分子碎片等,按它們的質(zhì)荷比分離后進(jìn)行檢測(cè)的方法。色譜法不能對(duì)分析物進(jìn)行準(zhǔn)確定性及結(jié)構(gòu)鑒定,而與質(zhì)譜法聯(lián)用能很好地解決這些問(wèn)題。隨著色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的出現(xiàn),許多研究者開(kāi)始使用GC-MS對(duì)尿樣、血液、動(dòng)物源性食品中的甾體激素殘留進(jìn)行測(cè)定與分析,并且具有較高的靈敏度。但是,MCLAUGHLIN等[9]在用GC-MS測(cè)定牛肝臟和肌肉組織中的地塞米松前,對(duì)待測(cè)物進(jìn)行三甲基硅烷-烯醇-三甲基硅烷衍生化,處理相對(duì)較煩瑣。
2.1.4 液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用法
液相色譜與質(zhì)譜在液相色譜中被分離,離子化后經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開(kāi),經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖。該方法有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS),LC-MS/MS相比LC-MS能提供更多的質(zhì)譜信號(hào),有更高的選擇性和靈敏度,對(duì)復(fù)雜樣品基質(zhì)中痕量組分的定性、定量分析具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),是分析糖皮質(zhì)激素的主要方法[2,6,14-15]。
使用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)能將糖皮質(zhì)激素中互為差向異構(gòu)體的地塞米松和倍他米松進(jìn)行有效區(qū)分。DRAISCI等[16]采用加速溶劑萃取法快速提取牛肝臟中的倍他米松和地塞米松,通過(guò)LC-MS檢測(cè)了這兩種物質(zhì),肝組織中的倍他米松和地塞米松的最低定量限可達(dá)1 μg/kg,回收率為74%~77%。ANTIGNAC等[17]用C18固相萃取柱濃縮和凈化樣品,用LC-MS/MS檢測(cè)了牛肉、尿、毛發(fā)中的倍他米松和地塞米松等12種糖皮質(zhì)激素殘留,其中肉和尿中的激素殘留最低檢測(cè)限為0.04~0.07 μg/kg,毛發(fā)中的激素殘留最低檢測(cè)限為2.9~9.3 μg/kg,回收率為32%~67%。候亞莉等[18]將牛肉樣品在堿性條件下經(jīng)乙酸乙酯提取,正己烷脫脂,通過(guò)MCX固相萃取小柱凈化,采用LC-MS/MS測(cè)定地塞米松、倍他米松、倍氯米松藥物殘留,檢出限和定量限分別為0.5 μg/kg和2.0 μg/kg,回收率在77.6%~97.9%。
對(duì)于牛奶中地塞米松的殘留檢測(cè),因其中含有較多的蛋白質(zhì)、脂肪,目標(biāo)化合物含量低,易對(duì)檢測(cè)造成干擾,因此前處理比較關(guān)鍵。任宏彬等[19]在用LC-MS測(cè)定牛奶中地塞米松時(shí),采用固相萃取法處理樣品并優(yōu)化色譜條件,方法的檢出限和定量限分別為0.08 μg/kg和0.25 μg/kg,回收率為65.7%~85.7%。陳妍等[20]建立了一種快速測(cè)定牛奶中地塞米松殘留的LC-MS/MS方法,檢出限為0.19 μg/kg,回收率為85%~107.2%,檢出限低于GB/T 22978—2008中牛奶中地塞米松殘留量的測(cè)定[21]。該法采用乙腈提取,正己烷液液萃取,不需要采用固相萃取柱,大大簡(jiǎn)化了提取凈化的過(guò)程,縮短了檢測(cè)時(shí)間,可用于牛奶中地塞米松殘留量的初步篩查。目前,檢測(cè)畜禽和牛奶中地塞米松和氯丙嗪均為單獨(dú)檢測(cè)或與其他同類(lèi)物質(zhì)同時(shí)檢測(cè),張燕等[22]開(kāi)發(fā)了同時(shí)測(cè)定畜禽肉和牛奶中這兩種藥物殘留的方法。樣品經(jīng)乙腈提取,C18固相分散萃取凈化,通過(guò)LC-MS/MS測(cè)定豬肉、牛肉、雞肉和牛奶中地塞米松及氯丙嗪,方法的檢出限為0.1 μg/kg,定量限為0.3 μg/kg,回收率為70.1%~119.4%。
2.1.5 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS),借助了液相色譜的理論及原理,基于小顆粒高性能微粒作為固定相,與傳統(tǒng)的HPLC技術(shù)相比提供了更高的效率,具有更強(qiáng)的分離能力。該方法分離能力高效、選擇性高、靈敏度高,在近些年的獸藥殘留分析中經(jīng)常被研究和應(yīng)用。
基于此方法,有研究者開(kāi)發(fā)出同時(shí)檢測(cè)一種動(dòng)物源性食品中多種獸藥殘留的方法或檢測(cè)不同動(dòng)物源食品中的地塞米松殘留的方法。仲伶俐等[23]將牛奶樣品通過(guò)乙腈提取后,采用Oasis PRiME HLB固相萃取小柱凈化,建立了同時(shí)測(cè)定牛奶中地塞米松、替米考星、氟苯尼考和氯霉素藥物殘留的UPLC-MS/MS,方法的檢測(cè)限達(dá)0.1~0.2 μg/kg,定量限為0.2~0.5 μg/kg,平均回收率為78.6%~94.7%。陳少莉等[24]在農(nóng)業(yè)部發(fā)布的LC-MS檢測(cè)動(dòng)物源性食品中糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物多殘留方法的基礎(chǔ)上,對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行優(yōu)化,開(kāi)發(fā)了UPLC-MS/MS測(cè)定豬、牛肉、雞蛋和牛奶中的地塞米松,平均回收率在83.2%~108.2%,最低定量限在0.2~1.0 μg/kg[25]。楊毅青等[26]分別將牛奶、雞蛋樣品經(jīng)乙酸-乙酸鈉和甲醇溶液處理,通過(guò)兩種固相萃取柱串聯(lián)凈化樣品,使用UPLC-MS/MS測(cè)定不同基質(zhì)中地塞米松殘留量,平均回收率為70.53%~118.25%,RSD為3.5%~7%。曹麗麗等[27]采用QuEChERS前處理,將不同動(dòng)物源性基質(zhì)進(jìn)行凈化后用UPLC-MS/MS測(cè)定多種動(dòng)物源性食品中的地塞米松殘留,檢出限為0.1 μg/kg,平均回收率為73.2%~95.9%。
2.2 免疫分析法
2.2.1 免疫層析法
免疫層析法(immunochromatography assay,ICA)是20世紀(jì)末發(fā)展起來(lái)的一種結(jié)合了免疫技術(shù)和色譜層析技術(shù)的檢測(cè)方法,是基于抗原抗體特性免疫反應(yīng)的一種新型膜檢測(cè)技術(shù)。在層析過(guò)程中,標(biāo)記了膠體金或熒光物質(zhì)的抗體與樣本中的待檢測(cè)物質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物,通過(guò)毛細(xì)作用力在試紙條上層析,并被硝酸纖維素膜上的特異性抗體或抗原捕獲而富集,根據(jù)肉眼或儀器對(duì)條帶上的標(biāo)記物進(jìn)行觀察或檢測(cè)來(lái)實(shí)現(xiàn)定性或定量檢測(cè)。目前研究應(yīng)用的熱點(diǎn)主要是膠體金免疫層析、熒光免疫層析和磁珠免疫層析[28]。免疫層析檢測(cè)技術(shù)具有單人份檢測(cè)、對(duì)操作者要求低、檢測(cè)快速和成本低等優(yōu)點(diǎn),是免疫檢測(cè)方法中的常見(jiàn)技術(shù)。近年來(lái),隨著地塞米松半抗原及抗體的開(kāi)發(fā),越來(lái)越多的研究者開(kāi)發(fā)了基于免疫層析原理的地塞米松快速檢測(cè)方法。
WANG等[29]制備了基于地塞米松琥珀酸酐衍生物半抗原的抗地塞米松單克隆抗體,該抗體對(duì)地塞米松具有高特異性,抗體的半抑制濃度(IC50)為0.095 ng/mL,并以此為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)了用于檢測(cè)牛奶中地塞米松殘留的免疫層析膠體金試紙條,在牛奶樣品中的視覺(jué)臨界值(cutoff值)為0.5 ng/mL,每次檢測(cè)僅需10 min。ZHANG等[30]開(kāi)發(fā)了基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光微球的免疫層析檢測(cè)方法,用于快速、定量檢測(cè)動(dòng)物組織中的地塞米松,IC50為0.58 ng/mL,檢出限為0.3 μg/kg,平均回收率達(dá)84.5%,同時(shí)配套了手持讀取儀進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)定量,可在10 min內(nèi)讀取結(jié)果。LI等[31]將膠乳顆粒應(yīng)用于免疫層析,實(shí)現(xiàn)了牛奶和豬肉中地塞米松的定量檢測(cè),15 min內(nèi)完成檢測(cè),肉眼判讀的檢出限分別為0.3 μg/L和0.7 μg/kg,定量限分別為0.047 μg/L和0.087 μg/kg,回收率為80.0%~122.8%。在此基礎(chǔ)上,LI等[32]又開(kāi)發(fā)了基于時(shí)間分辨熒光微球的地塞米松免疫層析檢測(cè)方法,配套手持式熒光讀取儀可定量檢測(cè)牛奶和豬肉中的地塞米松,cutoff值分別為0.25 μg/L和0.7 μg/kg,定量限分別達(dá)到0.003 μg/L和0.062 μg/kg,檢測(cè)結(jié)果與LC-MS/MS檢測(cè)結(jié)果基本一致。
免疫檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于人類(lèi)醫(yī)學(xué)、動(dòng)物醫(yī)學(xué)、食品安全和環(huán)境衛(wèi)生的檢驗(yàn)。早期的免疫層析技術(shù)主要利用膠體金顯色原理進(jìn)行定性檢測(cè),近10年來(lái),隨著熒光材料(包括熒光染料、普通熒光微球、時(shí)間分辨微球和上轉(zhuǎn)發(fā)光微球等各種微球)和超順磁性納米微球新型標(biāo)記物及檢測(cè)儀的開(kāi)發(fā),基于免疫層析平臺(tái)的定量檢測(cè)產(chǎn)品已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化。
2.2.2 酶聯(lián)免疫法
酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)是將抗原或抗體結(jié)合至某種固相載體表面,并保持其免疫活性,將抗原或抗體與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原或抗體,加入待測(cè)定樣品,使其與被吸附的抗原或抗體及后加入的酶標(biāo)二抗之間發(fā)生免疫反應(yīng),最后加入酶反應(yīng)底物,終止反應(yīng),根據(jù)顯色反應(yīng)所產(chǎn)生顏色的深淺用分光光度計(jì)進(jìn)行定性或定量分析。該方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、分析時(shí)間短、樣品檢測(cè)成本低和復(fù)雜樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單的特點(diǎn),適合于批量樣品的定性初篩工作。ELISA法的類(lèi)型有間接法、雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法。前兩種方法用于測(cè)定抗體和大分子抗原,應(yīng)用于臨床診斷;競(jìng)爭(zhēng)法按實(shí)驗(yàn)步驟的不同又可分為直接競(jìng)爭(zhēng)法和間接競(jìng)爭(zhēng)法,適合測(cè)定小分子抗原,尤其適用于食品安全檢測(cè)領(lǐng)域[33-34]。
早在1998年CERNI等[35]開(kāi)發(fā)了一種快速簡(jiǎn)單的提取方法,并通過(guò)酶聯(lián)免疫法測(cè)定牛肝中地塞米松,回收率為92%~154%,檢出限和定量限分別為1.43 μg/kg和2.09 μg/kg。KOLANOVI[36]對(duì)Euro-Proxima B.V.公司的皮質(zhì)類(lèi)固醇酶聯(lián)免疫試劑盒性能進(jìn)行了驗(yàn)證,此試劑盒可檢測(cè)奶、肝臟、尿液等樣本中的地塞米松等皮質(zhì)類(lèi)固醇,其中牛奶和肝臟中地塞米松的檢出限分別為0.2 μg/kg和0.6 μg/kg,定量限分別為0.3 μg/kg和1.4 μg/kg,回收率為68%~131%。VDOVENKO等[37]開(kāi)發(fā)了一種基于過(guò)氧化物酶檢測(cè)牛奶中地塞米松的化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法。通過(guò)對(duì)牛奶添加25%的甲醇并進(jìn)行離心,防止了牛奶的基質(zhì)效應(yīng)。檢測(cè)的IC50為0.9 ng/mL,檢測(cè)的變異系數(shù)為2.2%~9.9%,回收率在82%~142%。羅曉琴等[7]建立的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法對(duì)雞肉樣本的最低檢測(cè)限為0.1 μg/kg,變異系數(shù)為9.0%~12.2%,該方法的樣本前處理簡(jiǎn)單、靈敏度高、準(zhǔn)確度和精密度可滿(mǎn)足獸藥殘留檢測(cè)要求。WANG等[38]制備了地塞米松半抗原和多克隆抗體,并建立了間接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),檢測(cè)雞組織中的地塞米松,IC50為0.061 ng/mL,檢出限為0.015 μg/mL,回收率為83.3%~114.2%,變異系數(shù)為5.6%~9.5%;雞肉和雞肝中地塞米松的檢出限分別為0.3 μg/kg和0.5 μg/kg,具有靈敏度高、精密性好的特點(diǎn),不足之處在于抗體對(duì)地塞米松的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物有交叉反應(yīng),特異性欠缺。采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)地塞米松殘留,具有精確度和靈敏度較高、操作技術(shù)要求低、檢測(cè)時(shí)間短和檢測(cè)樣本量大等特點(diǎn),適合于大量樣本中地塞米松殘留檢測(cè)的快速篩選,已成為目前用于畜禽組織中獸藥殘留檢測(cè)的常用方法。
3 結(jié)語(yǔ)
GC、GC-MS檢測(cè)地塞米松殘留都需要對(duì)樣品進(jìn)行衍生化,樣品的前處理比較煩瑣,目前應(yīng)用不多。隨著聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展,液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)在地塞米松殘留檢測(cè)中應(yīng)用較多,LC-MS、LC-MS/MS、UPLC-MS/MS將色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力與質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度以及能夠提供相對(duì)分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來(lái),提高了樣品分析工作效率,目前在藥物分析、食品分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在法定的動(dòng)物源性食品中糖皮質(zhì)激素殘留檢測(cè)、地塞米松殘留檢測(cè)多采用該類(lèi)方法。因動(dòng)物源性食品中地塞米松的殘留水平較低,其屬于糖皮質(zhì)激素,內(nèi)源性的干擾物質(zhì)較多,基質(zhì)復(fù)雜難分離,會(huì)干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果、污染儀器,所以在測(cè)定前會(huì)采用各種凈化處理方式對(duì)樣品基質(zhì)進(jìn)行處理,如采用正己烷脫脂法、固相萃取法、QuEChERS前處理,以達(dá)到對(duì)檢測(cè)物富集和便于測(cè)定的目的。儀器測(cè)定方法結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度較好,但樣品前處理復(fù)雜、儀器昂貴、需專(zhuān)業(yè)人員操作且檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),由于檢測(cè)成本、檢測(cè)周期和人員要求的原因限制了其在基層的推廣及現(xiàn)場(chǎng)的高通量檢測(cè)。
目前地塞米松的免疫檢測(cè)方法主要是免疫層析和酶聯(lián)免疫,膠體金免疫層析法操作簡(jiǎn)單、使用方便,適合檢測(cè)機(jī)構(gòu)、監(jiān)督部門(mén)、生產(chǎn)企業(yè)的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),屬于定性檢測(cè)方法,缺點(diǎn)是靈敏度欠佳。酶聯(lián)免疫分析法具有通量大、靈敏度高、特異性強(qiáng)和成本較低的特點(diǎn),但操作過(guò)程需要專(zhuān)業(yè)人員操作,耗時(shí)較長(zhǎng)、操作較煩瑣,且需要樣本積累到一定的數(shù)量,否則容易造成浪費(fèi),比較適用于中心實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)。近些年,隨著生物技術(shù)的發(fā)展和人們對(duì)食品安全的關(guān)注,地塞米松免疫檢測(cè)的原料及成品試劑盒也越來(lái)越成熟。理論上而言,只要制備了地塞米松的半抗原和抗體,就可以開(kāi)發(fā)各種包括免疫層析、酶聯(lián)免疫、免疫熒光等在內(nèi)的免疫檢測(cè)方法。對(duì)于免疫層析而言,由于近年來(lái)出現(xiàn)了各種標(biāo)記物,有望提高檢測(cè)的靈敏度,但傳統(tǒng)的膠體金或微球免疫熒光已能滿(mǎn)足各國(guó)對(duì)食品中地塞米松的檢出要求,所以將來(lái)的發(fā)展方向可能是進(jìn)一步簡(jiǎn)化各種樣本的前處理,使檢測(cè)方法更加簡(jiǎn)單、快速。對(duì)于酶聯(lián)免疫檢測(cè)這種傳統(tǒng)的免疫檢測(cè)方法而言,因?yàn)殪`敏度足夠高,可能更側(cè)重于提高檢測(cè)的特異性,以防止檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況。
獸藥殘留是影響動(dòng)物源性食品安全的一個(gè)重要因素,檢測(cè)技術(shù)是保障食品安全的技術(shù)支撐,通過(guò)對(duì)地塞米松殘留檢測(cè)研究技術(shù)的綜述,以期為食品中該藥物的殘留檢測(cè)相關(guān)研究和安全監(jiān)管提供參考。同時(shí),仍需要主管部門(mén)完善法律體系,從養(yǎng)殖的源頭控制和規(guī)范使用獸藥,遵守休藥期,多方面確保食品質(zhì)量安全和人們的健康。
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基金項(xiàng)目:江蘇省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(202112806020Y)。
作者簡(jiǎn)介:周芳(1982—),女,新疆哈密人,碩士,講師。研究方向:藥學(xué)。