李玉青 方熙勤 石燕婷 杜倩雯 王珂黙 張冉冉 劉學伍

(山東大學齊魯醫(yī)院神經內科，山東 濟南 250000)

癲癇是一種復雜的疾病，以腦神經元異常放電引起的反復癇性發(fā)為臨床特征。癲癇綜合征患者中20%～30%各種獲得性事件的結果，另外剩余70%～80%患者中遺傳因素起了很重要的作用[1]。導致癲癇的單基因突變通常與大腦中的離子通道和細胞信號傳導過程相關[2]。從1995年確定了第一個與癲癇相關的基因，到2019年孟德爾遺傳在線數(shù)據(jù)庫中列出了超過140個與癲癇相關的基因或基因座[3]，癲癇遺傳性病因的診斷取得了巨大的進展。黏附類G蛋白耦聯(lián)受體V1(ADGRV1)基因位于人類的5號染色體長臂的1區(qū)4帶(5q14)，編碼一種在中樞神經系統(tǒng)中廣泛表達的ADGRV1蛋白[4-5]，其純合突變在ⅡC型Usher綜合征的發(fā)病中起著重要的作用[5-6]，其雜合突變則被發(fā)現(xiàn)可能與肌陣攣性癲癇發(fā)作和高熱驚厥有關[7-8]。LGI1基因是一個已明確的癲癇相關基因，ADGRV1基因與其有許多相似之處，首先兩種基因突變都可以導致聽源性癲癇[9-10]，其次，它們都編碼含有C端串聯(lián)重復序列的蛋白質[11]。這提示在癲癇發(fā)病機制中，ADGRV1基因可能與LGI1基因一樣遵循常染色體顯性遺傳規(guī)律。

本研究針對1例擬診斷為攜帶ADGRV1基因雜合錯義突變癲癇患者的臨床資料進行分析，對ADGRV1基因進行測序，同時與人類基因突變數(shù)據(jù)庫(HGMD)中其他攜帶ADGRV1基因突變的癲癇患者的突變信息、臨床表型相結合進行分析，以探討ADGRV1基因在癲癇中的致病性及致病規(guī)律。

1 臨床資料

患兒，男，14歲。8歲時開始頻繁出現(xiàn)點頭癥狀的肌陣攣性發(fā)作，發(fā)作時無意識障礙，多發(fā)生于激動或勞累后、晨起時，偶爾出現(xiàn)全面強直-陣攣性發(fā)作(GTCS)?；純赫J知功能和精神狀態(tài)均正常。腦電圖表現(xiàn)為彌漫性的棘-慢復合波，MRI檢查未見明顯異常。給予丙戊酸鈉(VPA，每天2次，每次0.5 g)和左乙拉西坦(LEV,每天2次，每次0.25 g)聯(lián)合治療。由北京金準醫(yī)學檢驗實驗室有限公司對該患者及其父母、弟弟進行血液標本全外顯子測序。

同時從HGMD數(shù)據(jù)庫中檢索ADGRV1基因突變患者的臨床信息?；颊叩募{入標準包括：①攜帶ADGRV1基因突變者；②具有詳細的突變相關信息(包括突變方式、突變位點)者；③單核苷酸多態(tài)性(SNP)的患者。針對HGMD數(shù)據(jù)庫中檢索到的所有患者和該例患者，總結分析ADGRV1基因突變患者的臨床表型、突變類型以及ADGRV1基因突變癲癇患者的突變表型。

2 結 果

2.1 患者及其家人基因檢測結果及治療情況

該例患者血液標本經基因測序，結果顯示，在chr5:90106885處存在c.15808G>C的雜合變異，并導致ADGRV1基因中的第5 270位的谷氨酸密碼子變成了谷氨酰胺密碼子，但其父母和弟弟該基因均未發(fā)生突變(圖1)，因此，推斷該患者的突變可能是后天獲得的。根據(jù)該患者的臨床表現(xiàn)以及基因突變檢測結果，該例患者診斷為肌陣攣性癲癇、遺傳性全面性癲癇(GGE)。該例患者在進行基因測序前已經開始接受VPA和LEV的聯(lián)合治療，效果較好，截至最近一次隨訪(15個月)，GTCS已被完全控制。

圖1 患者及其父母、弟弟全外顯子測序結果

2.2 HGMD數(shù)據(jù)庫中ADGRV1基因突變患者的臨床表型和突變類型

HGMD數(shù)據(jù)庫中共檢索到ADGRV1基因突變患者288例，排除變異情況不明確或基因拷貝數(shù)量發(fā)生變異的患者16例，最終共有272例患者納入分析。272例ADGRV1基因突變患者的臨床表型為：Usher綜合征151例，聽力喪失/耳聾69例，視網膜疾病21例，癲癇18例，小耳癥4例，精神障礙3例，神經障礙3例，驚厥2例，發(fā)育異常1例。對所有272例ADGRV1基因突變患者的基因突變類型分析，錯義突變128例，無義突變69例，移碼突變51例，剪切位點突變16例，剪切突變3 例，大片段突變2例，非編碼突變1例，框架突變1例，同義突變1例。

2.3 ADGRV1基因突變癲癇患者的突變表型

通過HGMD數(shù)據(jù)庫共獲得了ADGRV1基因突變的癲癇患者18例，連同本例患者，共有19例。對19例患者的臨床表現(xiàn)進行分析顯示，10例表現(xiàn)為肌陣攣性發(fā)作，2例發(fā)作類型不明確，2例表現(xiàn)為伴中央-中顳棘波的兒童癲癇，1例表現(xiàn)為DRAVET綜合征，1例表現(xiàn)為局灶性發(fā)作，1例表現(xiàn)為失神性發(fā)作，1例表現(xiàn)為Lennox-Gastaut綜合征，1例表現(xiàn)為肌陣攣性發(fā)作合并高熱驚厥。對19例患者的基因變突類型分析顯示，除DRAVET綜合征患者的突變類型為移碼突變、高熱驚厥合并肌陣攣性發(fā)作患者為無義突變以外，其余17例患者突變類型均為錯義突變。

3 討 論

本研究報道了1例ADGRV1基因雜合錯義突變的癲癇患者，通過對該例患者的臨床資料進行分析，并進行基因測序，結合HGMD數(shù)據(jù)庫中其他攜帶ADGRV1基因突變患者的臨床信息，分析發(fā)現(xiàn)ADGRV1基因在純合突變時可導致包括Usher綜合征在內的多種疾病，但不會導致癲癇，只有在發(fā)生雜合突變時，才會導致癲癇的發(fā)生。在給予VPA和LEV聯(lián)合治療后，該例癲癇患者的癲癇發(fā)作得到了很好的控制。

ADGRV1基因在雜合突變時即可致病，這意味著該突變基因為顯性基因。但目前相關研究表明，ADGRV1基因純合突變以后可以導致Usher綜合征[10]。因此，ADGRV1基因可能遵循一種類似于不完全顯性遺傳的遺傳規(guī)律(傳統(tǒng)意義的不完全顯性遺傳中，雜合子的表型應介于顯性純合和隱性純合表型之間，然而癲癇和Usher綜合征是兩種完全不相關的疾病)。

GGE以前也被稱為是特發(fā)性全面性癲癇，是全面性癲癇的一種常見的類型，臨床常表現(xiàn)為失神性發(fā)作、肌陣攣性發(fā)作或者單純GTCS[11]?？拱d癇藥物對70%～80%的GGE患者治療有效[12]。因此，ADGRV1基因突變所致的癲癇可能屬于良性癲癇。VPA是GGE患者最有效的抗癲癇藥物[13]。LEV是一種新型抗癲癇藥物，具有獨特的作用機制和潛在的廣譜抗癲癇作用，無顯著的藥物間相互作用，不良反應較少，目前已被美國食品和藥物管理局批準作為GGE的輔助治療藥物[14]。因此，本例患者應用VPA、LEV聯(lián)合治療后，臨床效果較好。

本研究中的19例ADGRV1基因突變的癲癇患者中，17例患者的突變類型是錯義突變，提示ADGRV1基因的錯義突變與癲癇相關性較高。另外需要注意的是，表現(xiàn)為肌陣攣性發(fā)作的10例ADGRV1基因突變的癲癇患者的ADGRV1突變類型都是錯義突變，提示ADGRV1基因可能只有在發(fā)生錯義突變(而不是無義突變、同義突變和移碼突變)時才可以導致肌陣攣性發(fā)作。其余2例患者中，具有DRAVET綜合征表型的患者突變類型為移碼突變。DRAVET綜合征是一種早期發(fā)作型遺傳性癲癇綜合征，表現(xiàn)為頑固性癲癇和神經發(fā)育遲緩[15]。最新研究發(fā)現(xiàn)，人類5號染色體上有一個與DRAVET綜合征相關的疾病修飾基因[16]，雖然這個新發(fā)現(xiàn)的基因在ADGRV1基因的上游較遠處，但在5號染色體上，很有可能還有其他的DRAVET綜合征相關基因。目前研究發(fā)現(xiàn)，移碼突變是基于單個核苷酸改變發(fā)生的突變類型中最嚴重的一種突變類型，其可以導致突變位點下游所有密碼子的改變。因此，ADGRV1基因本身或者其下游的某個基因可能與DRAVET綜合征的疾病修飾有關，移碼突變導致它們的密碼子發(fā)生改變繼而導致了DRAVET綜合征的發(fā)生。另外1例具有高熱驚厥合并肌陣攣性發(fā)作表型的患者突變類型為無義突變。無義突變造成的后果雖然沒有移碼突變嚴重，但也可以導致肽鏈合成的提前終止。綜上所述，ADGRV1基因可能只有在發(fā)生錯義突變時才可能導致肌陣攣性發(fā)作，同時也只有在發(fā)生錯義突變時才可導致單純的癲癇發(fā)作(即不伴有其他神經或精神癥狀)。

ADGRV1基因在小鼠胚胎期的中樞神經系統(tǒng)的腦室區(qū)高度表達[17]。腦室區(qū)是神經元前體細胞增殖的區(qū)域。隨著細胞分化并進入有絲分裂以后，ADGRV1遷移出腦室區(qū)，沿神經膠質束徑向移動，從而形成皮質[18]。因此，ADGRV1在中樞神經系統(tǒng)的發(fā)育中發(fā)揮了至關重要的作用，其表達減少可能會影響大腦皮質的正常形成，繼而可能導致癲癇發(fā)作或驚厥。但由于癲癇患者的突變類型大多是雜合突變，單倍劑量不足可能只會導致癲癇的發(fā)生，而不會進一步導致更嚴重的疾病。

ADGRV1在小鼠胚胎期的視杯以及出生后處于生長發(fā)育狀態(tài)的晶狀體中也有表達[19]，同時ADGRV1基因功能的喪失會導致內耳毛細胞中靜纖毛形態(tài)的改變和聽力喪失[20]，從而可以解釋為什么ADGRV1基因突變患者的臨床表型多為Usher綜合征、視網膜疾病、聽力下降或喪失。

與人類的ADGRV1基因位于5號染色體不同，小鼠的ADGRV1基因位于第13號染色體[19]，因此在小鼠的疾病模型中，ADGRV1的純合無義突變才會導致癲癇發(fā)作[20]，這些和目前所獲得的人類ADGRV1基因的信息和突變情況不完全相同，可能與兩個物種的ADGRV1基因的結構差異有關系。人類ADGRV1基因內含子序列比小鼠的更長[17]，提示人類的ADGRV1基因的功能可能比小鼠的更加強大。

本研究也存在一定的局限性。首先，本研究的所有數(shù)據(jù)主要來源于HGMD數(shù)據(jù)庫；另外，由于本例患者的突變?yōu)閱蝹€堿基替換所致，即SNP，因此本研究僅對SNP的患者進行了分析，而沒有納入CNV(即基因組大片段的拷貝數(shù)增加或減少，CNV的突變率遠高于SNP，但檢測難度較SNP高)的患者進行分析。隨著樣本量的增加和研究的更加深入，ADGRV1基因突變的表型和遺傳方式可能會有新的發(fā)現(xiàn)。

總之，通過對本例ADGRV1基因突變癲癇患者及HGMD數(shù)據(jù)庫中其他攜帶ADGRV1基因突變患者的信息進行綜合分析，ADGRV1基因在癲癇的遺傳過程中遵循類似于常染色體不完全顯性遺傳的規(guī)律，雖然ADGRV1基因突變的表型眾多，但只有在雜合突變時才可能會導致癲癇，且其肌陣攣性發(fā)作的臨床表型可能是由雜合錯義突變所導致的。