孫萍 李露 陳琳玲 劉樹文

摘 要 測(cè)定了高光強(qiáng)（4 000 lx）高接種密度（20 g·L-1）、高光強(qiáng)（4 000 lx）低接種密度（10 g·L-1）、低光強(qiáng)（2 000 lx）高接種密度（20 g·L-1）、低光強(qiáng)（2 000 lx）低接種密度（10 g·L-1）培養(yǎng)條件下，葛仙米的葉綠素a、類胡蘿卜素和藻膽蛋白等光合色素及可溶性糖、可溶性蛋白含量的變化、快速光響應(yīng)曲線及其相關(guān)參數(shù)，以及鮮重、干重、顆粒數(shù)量、顆粒大小、比生長(zhǎng)速率的變化。結(jié)果表明，在接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)條件培養(yǎng)的葛仙米的葉綠素a、類胡蘿卜素、藻膽蛋白等光合色素和可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、飽和光強(qiáng)（IK）、最大光化學(xué)效率（QYmax）、鮮重、干重，以及大顆粒個(gè)體的比例均比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米更高，比生長(zhǎng)速率也更高;在光強(qiáng)相同時(shí)，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米的各種光合色素及光合產(chǎn)物含量、光合效率（α）及最大相對(duì)電子傳遞速率（rETR）、每克鮮藻干重均比低接種密度（10 g·L-1）培養(yǎng)的葛仙米低，比生長(zhǎng)速率也低。結(jié)論：在葛仙米的人工養(yǎng)殖過(guò)程中，采用4 000 lx左右光強(qiáng)10 g·L-1接種密度較為合適，有利于提高葛仙米的產(chǎn)量和降低成本。

關(guān)鍵詞 葛仙米;光照強(qiáng)度;接種密度;生長(zhǎng);產(chǎn)量

中圖分類號(hào)：S968.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.22.017

葛仙米（Nostoc sphaeroides Kützing）屬于藍(lán)藻門（Cyanophyta）念珠藻科（Nostoceae）念珠藻屬（Nostoc）藻類植物[1]。其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，食用和藥用歷史悠久[2];含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、多糖、不飽和脂肪酸、多種光合色素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在食用、醫(yī)療保健、化工原料等領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用價(jià)值[3]。葛仙米主要分布在我國(guó)湖北省鶴峰縣走馬鎮(zhèn)的水稻田中[4]，生長(zhǎng)期為11月到次年4月，最佳采收期為3—4月，5月之后很難見到葛仙米的蹤跡[5]。由于化肥、殺蟲劑和除草劑的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致野生葛仙米資源減少[6]。

隨著人們對(duì)葛仙米的認(rèn)可及受到污染后葛仙米的數(shù)量不斷減少，葛仙米的現(xiàn)有產(chǎn)品數(shù)量已經(jīng)無(wú)法滿足市場(chǎng)需求。因此，國(guó)內(nèi)一些學(xué)者開展了葛仙米人工養(yǎng)殖研究，并取得了較大進(jìn)展[7]。如，鄧中洋等人研究了葛仙米在水稻田中的養(yǎng)殖技術(shù)，發(fā)現(xiàn)在水稻田中養(yǎng)殖的葛仙米生長(zhǎng)發(fā)育周期較長(zhǎng)，生產(chǎn)受到季節(jié)限制，產(chǎn)量低，且因含有較多的泥沙雜質(zhì)而采集困難。目前葛仙米的商業(yè)化、規(guī)?；B(yǎng)殖主要是采取室內(nèi)玻璃缸養(yǎng)殖或室外水池養(yǎng)殖[8]。野生葛仙米群體一般在11月至次年5月生長(zhǎng)，生長(zhǎng)期間平均氣溫為12.2 ℃左右，5月后葛仙米群體消失[9]。在湖北武漢地區(qū)進(jìn)行的室內(nèi)和室外養(yǎng)殖葛仙米的研究表明，夏季的高溫（培養(yǎng)液的溫度為35～45 ℃）和較高的光照強(qiáng)度（50 000～100 000 lx）是室外培養(yǎng)葛仙米在5—10月易發(fā)生群體破裂的主要因素[10]。通常室內(nèi)培養(yǎng)葛仙米在光照強(qiáng)度為500～10 000 lx的光照范圍內(nèi)，葛仙米能夠正常生長(zhǎng)[8]。接種密度對(duì)葛仙米的生長(zhǎng)和群體直徑的增加速率、群體的破裂率等，均產(chǎn)生一定的影響[1]。

本研究通過(guò)測(cè)定不同光照強(qiáng)度和接種密度培養(yǎng)條件下葛仙米的各種光合色素和可溶性糖、可溶性蛋白含量變化，以及光合參數(shù)、鮮重、干重的變化，數(shù)量和重量的變化、顆粒大小的變化，探討室內(nèi)養(yǎng)殖葛仙米在不同光照強(qiáng)度和接種密度下的生長(zhǎng)趨勢(shì)。

1? 材料與方法

1.1? 材料

粒徑為4～5 mm的葛仙米。

1.2? 儀器設(shè)備

濾紙，移液管（1 mL、5 mL），量杯（100 mL），不銹鋼分樣篩（1 mm、4 mm、5 mm、6 mm、7 mm、8 mm），玻璃錐形瓶（500 mL、1 000 mL），塑料瓶（500 mL、1 000 mL、2 500 mL、5 000 mL），玻璃勻漿器（20 mL），培養(yǎng)皿，高壓蒸汽滅菌鍋，離心機(jī)，空氣泵，LED燈，分光光度計(jì)。

1.3? 藥品及試劑

A液（MgSO4·7H2O、Na2CO3、H2O），B液（K2HPO4·3H2O、H2O），C液（CaCl2、H2O），D液（檸檬酸、檸檬酸鐵銨、Na2-EDTA、H2O），E液[H2O、H3BO3、MnSO4·7H2O、ZnSO4·7H2O、（NH4）6Mo7O24·4H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O]，95%乙醇，磷酸緩沖液，考馬斯亮藍(lán)溶液，牛清蛋白，蒽酮試劑，標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。

1.4? 藻種制備及培養(yǎng)

選取顆粒直徑為0.5～1.0 cm、成色較好的新鮮葛仙米若干，用自來(lái)水和蒸餾水沖洗干凈，然后在超凈工作臺(tái)內(nèi)用無(wú)菌水沖洗數(shù)次，再將藻體放在75%的乙醇中浸泡30 s，倒干凈乙醇后，再用無(wú)菌的BG-11培養(yǎng)基沖洗數(shù)次，取出后用滅菌的玻璃勻漿器分散藻體，將分散后的藻體用無(wú)菌的BG-11培養(yǎng)基稀釋至合適濃度后，倒入無(wú)菌的玻璃錐形瓶中，在弱光下靜置培養(yǎng)數(shù)天，每天定時(shí)搖動(dòng)錐形瓶。然后將葛仙米置于26 ℃，1 000 lx左右光強(qiáng)條件下進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)后得到的大量葛仙米藻種，用孔徑4 mm和孔徑5 mm的分樣篩選取顆粒直徑為4～5 mm的葛仙米作為實(shí)驗(yàn)藻種。藻種以10 g·L-1和20 g·L-1的接種密度各接種到6個(gè)2.5 L的塑料瓶中，加入2.5 L BG-11培養(yǎng)基，置于26 ℃條件下培養(yǎng)。每個(gè)接種密度設(shè)置2 000 lx和4 000 lx兩個(gè)光照強(qiáng)度，使用30 W LED燈提供光照，每組3個(gè)重復(fù)。

1.5? 葛仙米的生理指標(biāo)測(cè)定

1.5.1? 各種主要光合色素含量

分別從高光強(qiáng)（4 000 lx）高接種密度（20 g·L-1）、高光強(qiáng)（4 000 lx）低接種密度（10 g·L-1）、低光強(qiáng)（2 000 lx）高接種密度（20 g·L-1）、低光強(qiáng)（2 000 lx）低接種密度（10 g·L-1）4種不同培養(yǎng)條件的3個(gè)重復(fù)組的塑料瓶中各取1.0 g新鮮葛仙米，加入20 mL95%乙醇，震蕩均勻后，置于4 ℃冰箱中24 h后用20 mL玻璃勻漿器進(jìn)行勻漿。4 000 r·min-1離心10 min后取上清液，用分光光度計(jì)分別測(cè)量波長(zhǎng)為665 nm、649 nm、470 nm處的吸光度，分別記為A665、A649、A470。葉綠素a（Chl a）和類胡蘿卜素（Car）含量（單位均為mg·mL-1）的計(jì)算公式如下[11]：Chl a=13.95×A665-6.88×A649;Car=（1000×A470-2.05×Chl a）/245。

分別從高光強(qiáng)高接種密度、高光強(qiáng)低接種密度、低光強(qiáng)高接種密度、低光強(qiáng)低接種密度條件下培養(yǎng)的3組重復(fù)的塑料瓶中各取出1.0 g新鮮葛仙米，加入20 mL磷酸緩沖液，置于-40 ℃的冰箱中冷凍24 h，取出后置于4 ℃冰箱中解凍，解凍后取出葛仙米，冰浴勻漿60次，4 000 r·min-1離心10 min后取上清液，用紫外分光光度計(jì)測(cè)量波長(zhǎng)為562 nm、615 nm、652 nm的吸光度A，分別記為A562、A615、A652。藻藍(lán)蛋白（PC）、別藻藍(lán)蛋白（APC）、藻紅蛋白（PE）的含量（單位均為mg·mL-1）根據(jù)Siegelman & Kycia[12]計(jì)算：PC=（A615-0.474×A652）/5.34;APC=（A652-0.208×A615）/5.09;PE=（A562-2.41×PC-0.849×APC）/9.62。

1.5.2? 可溶性蛋白含量

分別從高光強(qiáng)高接種密度、高光強(qiáng)低接種密度、低光強(qiáng)高接種密度、低光強(qiáng)低接種密度條件下培養(yǎng)的3組重復(fù)的塑料瓶中各取出1.0 g新鮮葛仙米，加入20 mL磷酸緩沖液，置于-40 ℃的冰箱中冷凍24 h，取出后置于4 ℃冰箱中解凍，解凍后取出葛仙米，用20 mL的玻璃勻漿器冰浴勻漿60次。4 000 r·min-1離心10 min后取1 mL上清液，分別加入到12支試管中，再分別加入5 mL考馬斯亮藍(lán)溶液，震蕩后靜置20 min。用分光光度計(jì)測(cè)量波長(zhǎng)為595 nm的吸光度A。另取6支試管，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出各樣品中可溶性蛋白的含量[13]。

1.5.3? 可溶性糖含量

分別從高光強(qiáng)高接種密度、高光強(qiáng)低接種密度、低光強(qiáng)高接種密度、低光強(qiáng)低接種密度條件下培養(yǎng)的3組重復(fù)的塑料瓶中各取出1.0 g新鮮葛仙米，加入20 mL磷酸緩沖液，置于-40 ℃的冰箱中冷凍24 h，取出后置于4 ℃冰箱中解凍，解凍后取出葛仙米，用20 mL的玻璃勻漿器冰浴勻漿60次。4 000 r·min-1離心10 min后取上清液，分別取1 mL加入到12支試管中，再分別加入2.5 mL蒽酮試劑，搖勻后在沸水中水浴加熱20 min，用分光光度計(jì)測(cè)量波長(zhǎng)為625 nm的吸光度A。另取6支試管，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出各樣品中可溶性糖的含量[11]。

1.5.4? 快速光響應(yīng)曲線及相關(guān)參數(shù)

分別從高光強(qiáng)高接種密度、高光強(qiáng)低接種密度、低光強(qiáng)高接種密度、低光強(qiáng)低接種密度條件下培養(yǎng)的3組重復(fù)的塑料瓶中各取出100 mL藻樣，用20 mL的玻璃勻漿器分5次進(jìn)行勻漿，將5次勻漿的藻液混合均勻后倒出2 mL藻液置于黑暗處20 min進(jìn)行暗處理，將經(jīng)過(guò)暗處理的藻液用葉綠素?zé)晒鈨x測(cè)定最大相對(duì)電子傳遞速率（rETR）、光合效率（α）、飽和光強(qiáng)（Ik）等光合作用相關(guān)參數(shù)。飽和光強(qiáng)的計(jì)算公式為：Ik = rETR /α[10]。

1.5.5? 比生長(zhǎng)速率

每隔一天從12個(gè)培養(yǎng)瓶中各取100 mL藻樣，用孔徑1 mm的篩網(wǎng)過(guò)濾后放置于篩網(wǎng)上5 min，濾去水分，然后用濾紙吸干群體表面水分后稱量其鮮重。比生長(zhǎng)速率的計(jì)算公式為：μ=（lnX1-lnX2）/（T2-T1），其中X1、X2分別是T1（第0天）、T2（第8天）的鮮重（g/100 mL）。

1.5.6? 葛仙米顆粒直徑

培養(yǎng)8 d后，分別把12個(gè)培養(yǎng)瓶中的葛仙米倒出，用孔徑為4 mm、5 mm、6 mm、7 mm、8 mm的篩網(wǎng)將葛仙米分為顆粒直徑為4～5 mm、5～6 mm、6～7 mm、7～8 mm四個(gè)等級(jí)，記錄每個(gè)等級(jí)的顆粒數(shù)量。

1.5.7? 葛仙米群體干重

培養(yǎng)8 d后，分別把12個(gè)培養(yǎng)瓶中的葛仙米倒出，用蒸餾水和超純水各沖洗3次后放置于孔徑1 mm的篩網(wǎng)上1 h濾去水分，然后用濾紙吸干群體表面水分，在分析天平上分別稱取適量葛仙米鮮品（重量為m1），轉(zhuǎn)移到烘成恒重的濾紙上（重量為m2），移入烘箱中于105 ℃烘12 h至恒重（重量為m3），最后計(jì)算葛仙米群體每克鮮藻干重（單位為g），其計(jì)算公式為：每克鮮藻干重m=（m3-m2）/m1[10]。

1.6? 數(shù)據(jù)處理

本文主要利用軟件Origin 8.0，STATISTICA?7.0（StatSoft Inc，Tulsa，OK，USA）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。單因素方差分析（ANOVA）和Tukey顯著性檢驗(yàn)（HSD）用來(lái)檢測(cè)不同處理間的顯著性水平。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 各種光合色素和光合產(chǎn)物的含量

由表1可見，在接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米中葉綠素a、類胡蘿卜素、藻藍(lán)蛋白、別藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白等光合色素含量均高于低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米。高光強(qiáng)培養(yǎng)的每克新鮮葛仙米中葉綠素a含量分別比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高63.31%（高接種密度）和47.62%（低接種密度）;類胡蘿卜素含量比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高57.23%和56.54%（Tukeys HSD，P<0.05）;藻藍(lán)蛋白含量比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高46.78%和22.73%;別藻藍(lán)蛋白含量比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高84.12%和20.91%;藻紅蛋白含量比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高43.06%和11.72%。

HH表示高光強(qiáng)（4 000 lx）、高接種密度（20 g·L-1），HL表示高光強(qiáng)（4 000 lx）、低接種密度（10 g·L-1），LH表示低光強(qiáng)（2 000 lx）、高接種密度（20 g·L-1），LL表示低光強(qiáng)（2 000 lx）、低接種密度（10 g·L-1）;表2同此

在光強(qiáng)相同時(shí)，總體趨勢(shì)為高接種密度培養(yǎng)的葛仙米中各種光合色素含量低于低接種密度培養(yǎng)的葛仙米。高接種密度培養(yǎng)的每克新鮮葛仙米中葉綠素a含量比低接種密度培養(yǎng)的葛仙米低9.03%（高光強(qiáng)）和17.77%（低光強(qiáng)），類胡蘿卜素含量低12.45%和12.47%（Tukeys HSD，P<0.05），藻藍(lán)蛋白含量低13.92%和28.28%;藻紅蛋白含量低5.48%和26.18%;高光強(qiáng)培養(yǎng)時(shí)，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米中別藻藍(lán)蛋白含量比低接種密度培養(yǎng)的葛仙米高3.93%，低光強(qiáng)培養(yǎng)時(shí)，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米中別藻藍(lán)蛋白含量比低接種密度培養(yǎng)的葛仙米低31.76%。

2.2? 可溶性糖和可溶性蛋白含量的變化

圖1為可溶性糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線，其直線方程為y=256.61x（R2=0.98）。圖2為可溶性蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)曲線，其直線方程為y=124.56x（R2=0.95）。

根據(jù)直線方程計(jì)算得到不同光強(qiáng)和接種密度條件下培養(yǎng)的葛仙米可溶性糖含量和可溶性蛋白含量。由表2可見，在接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)培養(yǎng)的每克新鮮葛仙米中可溶性糖含量比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高439.26%（高接種密度）和297.26%（低接種密度）;可溶性蛋白含量高41.01%和19.61%（Tukeys HSD，P<0.05）。在光強(qiáng)相同時(shí)，高接種密度培養(yǎng)的每克新鮮葛仙米中可溶性糖含量比低接種密度培養(yǎng)的葛仙米低25.53%（高光強(qiáng)）和45.14%（低光強(qiáng)）;可溶性蛋白含量低18.16%和30.51%（Tukeys HSD，P<0.05）。

2.3? 快速光響應(yīng)曲線及相關(guān)參數(shù)

葛仙米的快速光響應(yīng)曲線見圖3，由光響應(yīng)曲線計(jì)算得到的rETR（最大相對(duì)電子傳遞速率）、α（光合效率）、Ik（飽和光強(qiáng)）、QYmax（最大光化學(xué)效率）列于表3，可以看出，當(dāng)光強(qiáng)相同時(shí)，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米的α和rETR均顯著低于（Tukeys HSD， P<0.05）低接種密度培養(yǎng)的葛仙米，高光強(qiáng)條件下分別低20.31%和16.57%，低光強(qiáng)條件下分別低14.29%和21.26%。

數(shù)據(jù)通過(guò)平均值±偏差表示（n=3）;同列不同小寫字母表示不同處理之間在0.05水平上存在顯著差異

當(dāng)接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米的IK和QYmax均顯著高于低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米（Tukeys HSD，P<0.05），高接種密度條件下分別高1.57%和8.69%，低接種密度條件下分別高13.27%和14.29%。

2.4? 葛仙米生長(zhǎng)、粒徑變化

不同光強(qiáng)和接種密度培養(yǎng)條件下的葛仙米鮮重和顆粒數(shù)量變化列于表4，可以看出，培養(yǎng)8 d后，接種密度相同條件下，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米鮮重和顆粒數(shù)量增長(zhǎng)分別比低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米高35.67%（高接種密度）、50.49%（低接種密度）和279.84%、174.97%;光強(qiáng)相同條件下，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米鮮重和顆粒數(shù)量增長(zhǎng)分別比低接種密度培養(yǎng)的葛仙米低22.23%（高光強(qiáng)）、13.75%（低光強(qiáng)）和32.26%、50.97%。

培養(yǎng)8 d后，在接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米比生長(zhǎng)速率略高于低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米，分別高了10.28%（高光強(qiáng)）和5.26%（低光強(qiáng)）;在光強(qiáng)相同時(shí)，高接種密度條件培養(yǎng)的葛仙米的比生長(zhǎng)速率略低于低接種密度培養(yǎng)的葛仙米，分別低了13.43%和17.36%。

不同光強(qiáng)和接種密度培養(yǎng)條件下的每克新鮮葛仙米干重統(tǒng)計(jì)結(jié)果：HH、HL、LH和LL分別為0.016 9 g、0.020 2 g、0.010 6 g和0.012 2 g，即接種密度相同條件下，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米干重顯著高于低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米（Tukeys HSD，P<0.05），分別高了59.33%（高光強(qiáng)）和65.29%（低光強(qiáng)）;光強(qiáng)相同條件下，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米干重低于低接種密度培養(yǎng)的葛仙米，分別低了16.72%和13.61%。

不同光強(qiáng)和接種密度培養(yǎng)條件下葛仙米不同粒徑分布統(tǒng)計(jì)結(jié)果列于表5，可以看出，接種密度相同時(shí)，在高接種密度條件下，高光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米群體大小以6～7 mm為主，占56%，其次是7～8 mm的藻群體，占26%，4～5 mm的藻體減少至無(wú);低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米群體大小以6～7 mm和7～8 mm為主，分別占36%和47%，有少量4～5 mm的藻體，占3%。在低接種密度條件下，高光強(qiáng)和低光強(qiáng)培養(yǎng)的葛仙米群體大小均以6～7 mm和7～8 mm為主，分別占62%、27%（高光強(qiáng)）和49%、38%（低光強(qiáng)），均有少量4～5 mm的藻體，分別占1%和2%。光強(qiáng)相同時(shí)，在高光強(qiáng)條件下，高接種密度培養(yǎng)的葛仙米群體大小以6～7 mm為主，低接種密度培養(yǎng)的葛仙米群體大小以6～7 mm和7～8 mm為主;在低光強(qiáng)條件下，高接種密度和低接種密度培養(yǎng)的葛仙米群體大小均以7～8 mm為主。

3? 討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，不同的光照強(qiáng)度和接種密度對(duì)葛仙米的光合色素及可溶性糖和可溶性蛋白的含量、光合作用參數(shù)有顯著影響。光照影響藻類的光合作用效率，從而影響糖類等光合產(chǎn)物的合成，繼而影響到蛋白及光合色素等其他有機(jī)物的合成[14]。當(dāng)接種密度相同時(shí)，高光強(qiáng)（4 000 lx）培養(yǎng)的葛仙米藻細(xì)胞內(nèi)葉綠素a、類胡蘿卜素、藻藍(lán)蛋白、別藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白、可溶性糖及可溶性蛋白含量、飽和光強(qiáng)（IK）及最大光化學(xué)效率（QYmax）、每克鮮藻干重均比低光強(qiáng)（2 000 lx）培養(yǎng)的葛仙米更高，比生長(zhǎng)速率也更高。這是因?yàn)楣馐窃孱愡M(jìn)行光合作用的主要能量來(lái)源，在低光強(qiáng)下，光合作用受到一定限制，光合效率較低，產(chǎn)生的光合色素較少，藻體細(xì)胞內(nèi)積累的物質(zhì)較少;而在4 000 lx條件下，葛仙米吸收利用更多的光能，光合效率較高，葛仙米的生長(zhǎng)速度較快，藻體細(xì)胞內(nèi)積累的物質(zhì)較多，大顆粒群體所占比例也較高。因此，4 000 lx光強(qiáng)較適合葛仙米生長(zhǎng)。

當(dāng)光強(qiáng)相同時(shí)，高接種密度（20 g·L-1）培養(yǎng)的葛仙米藻細(xì)胞內(nèi)葉綠素a、類胡蘿卜素、藻藍(lán)蛋白、別藻藍(lán)蛋白、藻紅蛋白、可溶性糖及可溶性蛋白含量、光合效率（α）及最大相對(duì)電子傳遞速率（rETR）、每克鮮藻干重總體趨勢(shì)均比低接種密度（10 g·L-1）培養(yǎng)的葛仙米更低，比生長(zhǎng)速率也更低。這是因?yàn)樵谳^高的種群密度下，種內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)是劇烈的，理論上可以認(rèn)為，植物種群能夠通過(guò)種內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)而降低生長(zhǎng)速率。據(jù)推測(cè)，在高密度的單一種群中，較小的群體更容易受到生長(zhǎng)抑制甚至死亡。通常光照和營(yíng)養(yǎng)是限制種群生長(zhǎng)最主要的限制因子[8]。在高接種密度下，葛仙米群體會(huì)產(chǎn)生遮光效應(yīng)，光合作用會(huì)受到限制，光合效率較低，葛仙米生長(zhǎng)速度較慢，藻體細(xì)胞內(nèi)積累的物質(zhì)少;低接種密度下，產(chǎn)生的遮光效應(yīng)較低，光合作用受限少，光合效率較高，葛仙米生長(zhǎng)速度較快，大顆粒群體所占比例較高。除此之外，培養(yǎng)瓶的承載量有限，高接種密度下，葛仙米對(duì)鈣、磷、鈉、鎂等元素和CO2的吸收會(huì)受到抑制，葛仙米的生長(zhǎng)受到抑制;低接種密度下，葛仙米對(duì)鈣、磷、鈉、鎂等元素和CO2的吸收不會(huì)受到抑制或受限較少，葛仙米生長(zhǎng)速度較快。在本研究中，高光強(qiáng)低接種密度培養(yǎng)的葛仙米產(chǎn)量最高。因此，在葛仙米的人工養(yǎng)殖過(guò)程中，采用4 000 lx左右光強(qiáng)、10 g·L-1接種密度較為合適，有利于提高葛仙米的產(chǎn)量和降低成本。

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（責(zé)任編輯：丁志祥）