（寧夏大學，銀川 750021）

奶牛圍產期是指產前3周至產后3周，其中前三周為圍產初期，后三周為圍產后期。圍產期是奶牛泌乳周期中十分重要的時期，該時期由于奶牛干物質采食量急劇下降、胎兒營養(yǎng)需求大、泌乳啟動及采食量上升速度低于泌乳量的上升速度，造成能量供應不能滿足能量的輸出，導致奶牛處于能量負平衡狀態(tài)（negative energy balance,NEB）。圍產期奶牛通過體脂動員緩解能量負平衡，脂肪組織分解生成大量游離脂肪酸(nonesterified fatty acids,NEFA)，游離脂肪酸進入肝臟進行代謝，但圍產期奶牛對游離脂肪酸的代謝能力有限，使得大量游離脂肪酸在肝臟因不完全氧化而形成酮體，或酯化形成甘油三酯( triglyceride,TG)在肝臟積累，易導致酮病或脂肪肝的發(fā)生[1]。

大量的研究表明，在飼料中添加中草藥能夠明顯提高奶牛的采食量、免疫力和生產效能。山楂是薔薇科植物山里紅的成熟干燥果實，味酸、甘，微溫，歸脾、胃、肝經。它是人類常用的健胃消食藥，是中草藥中可以藥食兩用的一種，價格便宜，易于獲得。在飼料中適量地添加山楂可以提高奶牛產奶量，改善奶牛消化疾病和采食量低的情況[2]。山楂中含有大量的枸櫞酸、酒石酸、蘋果酸等有機酸和較多的維生素、微量元素、糖，由于營養(yǎng)豐富可以增強飼料的適口性[3]。同時，山楂中還含有具有降血壓、調血脂、改善心肌供血供氧、增加冠脈流量等功能的黃酮類化合物以及對疲勞和腫瘤有一定抵抗力的活性多糖、甾體類化合物[4～6]?？傮w來說山楂是一種很有開發(fā)價值的中草藥飼料添加劑，應用前景非常廣闊。本研究將山楂粉末作為圍產期奶牛飼料添加劑，通過測定奶牛血漿中各生化指標，以此來研究山楂對圍產期奶牛肝功能和血脂的影響。

1 材料和方法

1.1 試驗儀器

全自動生化分析儀（BS-180，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；離心機(TGL-16，江蘇中大儀器科技有限公司）。

1.2 試驗試劑

獸用生化試劑包括堿性磷酸酶（ALP）試劑盒、谷草轉氨酶（AST）試劑盒、谷氨酰轉肽酶（GGT）試劑盒、谷丙轉氨酶（ALT）試劑盒、甘油三酯（TG）試劑盒、總膽固醇（TC）試劑盒，均購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。

1.3 試驗分組與給藥

選取寧夏某奶牛場胎次、泌乳量和體格相近的20頭圍產期荷斯坦牛，隨機分為對照組和試驗組，每組10頭。對照組飼喂圍產期TMR，試驗組在圍產期TMR的基礎上添加100g/d山楂粉末。預飼期為1周，正常飼喂時間為42d（即產前21d至產后21d），每個處理組飼養(yǎng)條件一致，在每天早晨8:00TMR車添加完料后，迅速向日糧中加入山楂粉末，混合均勻。奶牛自由采食，自由飲水。

1.4 樣品采集

各組奶牛分別在分娩前21d、分娩當天、分娩后21d尾根靜脈采集靜脈血10mL，肝素鈉抗凝，以3 000r/min離心10min，檢測血漿中ALT、AST、ALP、GGT、TC和TG的含量。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用SPSS 13.0進行統(tǒng)計學分析處理，試驗結果均以平均值±標準差（Mean±SD）表示。數(shù)據(jù)經正態(tài)分布檢驗后，進行單因素方差分析，并用Duncan法進行多重比較。

2 結果與分析

由表1和圖1可知，試驗組AST、ALP、GGT、ALT、TC、TG的活性在產后21d均低于產前21d和分娩當天（P＜0.05），且分娩當天均低于產前21d（P＜0.05）。對照組這些指標的活性在產后21d均高于產前21d和分娩當天（P＞0.05）。在試驗期，試驗組這些指標的活性均呈持續(xù)下降趨勢，對照組均呈持續(xù)上升趨勢。試驗組血漿中這些指標的活性在分娩當天時均低于對照組相應指標（P＜0.05），在產后21d時也低于對照組（P＜0.05）。

表1 山楂對奶牛血漿中ALP、AST、GGT、ALT、TC、TG活性的影響

圖1 山楂對圍產期奶牛肝功能和血脂相關指標的影響(a: AST, b:ALP, c: GGT, d: ALT, e: TC, f:TG)

3 討論

3.1 山楂對奶牛肝功能的影響

近年，血液中谷氨酰轉肽酶(GGT)、谷草轉氨酶(AST)、谷丙轉氨酶(ALT)、堿性磷酸酶（ALP）等的水平已被臨床作為評估肝功能損傷程度的指標應用[7]。GGT在肝細胞線粒體中分泌，健康動物血液中表達水平較低，但是在研究中發(fā)現(xiàn)，當肝臟組織細胞出現(xiàn)異常時會導致這些組織細胞膜通透性增強，從而使得血液中GGT的表達升高[8]。ALT只存在于肝細胞胞質內，具有較高的特異性，如果肝細胞出現(xiàn)1%的損傷，那么血液中ALT水平就會升高1倍，因此，ALT被認為是檢測肝功能損害的最敏感指標。肝臟中存在大量的AST、ALP，當肝細胞受到損傷，AST、ALP的水平通常是升高的[9]。本試驗發(fā)現(xiàn)，在分娩前后21d內，AST、ALP、GGT、ALT這些肝功能損傷指標的檢測結果均表明試驗組優(yōu)于對照組，且隨分娩的時間的延長，試驗組指標越來越好。這說明在日糧中添加山楂具有減少奶牛肝臟內脂質沉積的作用，能很好地保護肝臟組織的生理功能。這與葉希韻等的研究結果一致[10]。

3.2 山楂對奶牛血脂的影響

血液中膽固醇和甘油三酯水平檢測對奶牛產后健康的診斷和監(jiān)控有著重要意義。血脂的主要成分是膽固醇和甘油三酯，隨著血液中膽固醇和甘油三酯含量過高奶牛的健康將會受到損傷。通過對血漿進行生化分析可以膽固醇和甘油三酯的指標變化來判斷山楂對血脂的影響。7α-羥化酶（cholesterol 7α-hydroxylase，CYP7A1）是肝臟合成并促使膽固醇轉化成膽汁酸的限速酶，在維持體內膽固醇代謝平衡上起關鍵作用。Kwok等研究發(fā)現(xiàn)，山楂主要作用機制是通過提高肝臟7α-羥化酶表達促使膽汁酸大量排出，抑制膽固醇的生物合成[11]。本試驗結果顯示，在分娩前后21d內，試驗組的TG、TC水平優(yōu)于對照組，且隨分娩后時間的延長，試驗組指標越來越好。這說明山楂作為日糧添加劑具有降低圍產期奶牛血脂的作用。這一結果與胡慧明等的研究結果相符合[12]。

4 結論

通過對圍產期奶牛血漿進行生化分析檢測，結果顯示試驗組ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在分娩當天和產后21d時逐漸下降，且與對照組差異顯著（P＜0.05）。且試驗組血漿中ALT、GGT、AST、ALP、TG、TC水平在產后21d時均顯著低于其余兩個階段（P＜0.05）。綜上所述山楂能顯著降低奶牛血脂和減輕肝損傷。