韓超逸，湯德元，楊志剛，晏仁潭

(貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽550025)

兔大腸桿菌病又稱黏液性腸炎，是家兔養(yǎng)殖中的1種常見多發(fā)病，由致病性大腸桿菌引起，已成為目前危害家兔養(yǎng)殖業(yè)的主要傳染病之一[1]；在自然感染病例中發(fā)病率為50%～68%，病死率為50%～92.3%[2]。該病發(fā)病誘因較多，如飼養(yǎng)管理不當(dāng)導(dǎo)致腸道菌群紊亂，天氣突變和更換兔舍、飼料導(dǎo)致應(yīng)激反應(yīng)使免疫力下降，感染兔球蟲病后誘發(fā)大腸桿菌病等[3]。現(xiàn)將貴州省畢節(jié)市某兔場(chǎng)暴發(fā)大腸桿菌病的診斷及治療介紹如下，供臨床參考。

1 發(fā)病情況

2019年10月中旬，該養(yǎng)兔場(chǎng)的300只仔兔有50余只相繼出現(xiàn)腹瀉癥狀，發(fā)病率17%，7只嚴(yán)重者脫水死亡，病死率14%。該兔場(chǎng)曾使用氟苯尼考、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、微生物制劑對(duì)病兔進(jìn)行治療但效果不佳。養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)飼養(yǎng)用水進(jìn)行化驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)總菌群數(shù)超標(biāo)，但排除金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌導(dǎo)致疫情的可能性。養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)飲用水采用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，一定時(shí)間內(nèi)對(duì)病情有控制作用，但并未徹底根治。

2 臨床癥狀與病理變化

發(fā)病兔精神沉郁，食欲減退，脫水消瘦，四肢無力呈俯臥姿勢(shì)，排水樣糞便，肛門周圍被毛被糞便污染。主要病理變化為盲腸水腫、脹氣，腸壁擴(kuò)張，腸內(nèi)充滿水樣糞便(見圖1)。其他器官未見實(shí)質(zhì)性病變。

3 實(shí)驗(yàn)室檢查

3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)采集腸管內(nèi)糞便在超凈工作臺(tái)內(nèi)分別劃線接種于麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基，37 ℃培養(yǎng)12 h。結(jié)果：SS培養(yǎng)基及麥康凱培養(yǎng)基均有大量光滑、濕潤、粉紅色、圓形菌落生長(見圖2、圖3)。

3.2 分離菌純培養(yǎng)及染色鏡檢分別從麥康凱培養(yǎng)基及SS培養(yǎng)基中挑取單個(gè)菌落接種于LB肉湯培養(yǎng)基，37 ℃振蕩培養(yǎng)12 h。結(jié)果：肉湯變渾濁并有沉淀。取LB肉湯純培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，可見大量呈短桿狀、兩端鈍圓、散落或聚集排列的革蘭氏陰性桿菌(見圖4)，初步鑒定為大腸桿菌。

3.3 生化試驗(yàn)分別從麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基挑取單個(gè)菌落接種于葡萄糖、乳糖、甘露醇、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽、H2S生化試驗(yàn)管，放置37 ℃培養(yǎng)箱中12 h。結(jié)果：分離菌能分解麥芽糖、乳糖、葡萄糖、甘露醇，產(chǎn)酸產(chǎn)氣；甲基紅試驗(yàn)為陽性，枸櫞酸鹽、H2S、V-P試驗(yàn)為陰性(見表1)，符合大腸桿菌的生化特征，鑒定為大腸桿菌。

3.4 動(dòng)物回歸試驗(yàn)取LB肉湯純培養(yǎng)物以100倍生理鹽水進(jìn)行稀釋，抽取稀釋液0.5 mL分別對(duì)健康小鼠進(jìn)行腹腔注射。結(jié)果：小鼠出現(xiàn)畏寒發(fā)抖、精神不振的癥狀，但并未出現(xiàn)死亡，表明分離菌為致病性大腸桿菌。

表1 分離菌生化試驗(yàn)結(jié)果

4 診斷

根據(jù)病兔臨床癥狀、病理變化以及細(xì)菌分離培養(yǎng)、染色鏡檢、生化試驗(yàn)、動(dòng)物回歸試驗(yàn)，確診為大腸桿菌病。

5 藥敏試驗(yàn)

取LB肉湯菌液，劃線接種于LB培養(yǎng)基，待菌液吸收完全后，在LB培養(yǎng)基表面貼上13種藥敏紙片，將培養(yǎng)皿放置37 ℃培養(yǎng)箱中12 h，測(cè)定抑菌圈大小。結(jié)果：分離菌對(duì)慶大霉素、頭孢曲松高度敏感，對(duì)其他藥物表現(xiàn)低敏或耐藥。見表2。

表2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

6 治療與防控

6.1隔離病兔，對(duì)飼養(yǎng)用具、兔舍、飼養(yǎng)用水進(jìn)行嚴(yán)格消毒。

6.2根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果采取藥物治療方案：肌內(nèi)注射慶大霉素2～4 mg/kg，每日2次；肌內(nèi)注射頭孢曲松鈉25～50 mg/kg，腹腔注射5%葡萄糖注射液20～50 mL，每日1次；內(nèi)服碳酸氫鈉片0.5～5 g，每日1次，以補(bǔ)充能量及維持電解質(zhì)平衡。連續(xù)用藥3天后病情得到有效控制，無新病例出現(xiàn)。

6.3兔大腸桿菌病是兔的常見疾病，一年四季均可發(fā)病，且大腸桿菌易產(chǎn)生耐藥性，所以加強(qiáng)防控是重要環(huán)節(jié)。在潮濕或陰雨天氣要注意飼料防潮，以防飼料發(fā)生霉變，特別要注意斷奶仔兔的飼喂，以免發(fā)生胃腸失調(diào)[4]?？稍陲暳现刑砑狱S芪200 mg/kg，提高兔群免疫力[5]。同時(shí)要注意其他疾病的防控(如球蟲病等)，以免引起繼發(fā)性大腸桿菌病。注重兔場(chǎng)的清潔衛(wèi)生，及時(shí)對(duì)兔舍、水槽、飼養(yǎng)用具進(jìn)行清洗消毒，對(duì)糞便及時(shí)進(jìn)行清掃。兔舍的飼養(yǎng)數(shù)量要適中，不可過度擁擠。在天氣變化時(shí)要注意兔群狀態(tài)，適時(shí)使用抗應(yīng)激藥物保證兔群的健康。