潘新平 田立

（定西市人民醫(yī)院腫瘤科 甘肅 定西 743000）

胃癌患者的早期癥狀并不顯著，因此發(fā)現(xiàn)時(shí)大部分患者已是中晚期，化療或放療的治療效果均較差[1]。目前胃癌的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移的早期診斷及治療的特異性指標(biāo)尚未發(fā)現(xiàn)，因此尋找早期診斷及治療的靶標(biāo)是研究的熱點(diǎn)。近些年研究者發(fā)現(xiàn)微小RNAs（miRNAs）與胃癌患者細(xì)胞分化、發(fā)育、增殖、凋亡等多種生物學(xué)過程相關(guān)[2]。因此本研究對(duì)胃癌與癌旁組織中存在差異性表達(dá)的miR-193a-3p 進(jìn)行分析。觀察其在胃癌與癌旁組織中表達(dá)量的差異與病理分期、病理類型等之間的關(guān)系，為胃癌的臨床早期診斷提供參考。

1.資料與方法

1.1 一般資料

自2018 年4 月—2019 年5 月在本院收集38 例胃腸外科胃癌手術(shù)患者的腫瘤樣本作為研究對(duì)象，所有標(biāo)本均經(jīng)術(shù)后病理確診為胃癌。其中男性28 例，女性10 例，年齡27 ～69 歲，平均年齡為（56.6±15.2）歲。T 分期：T1 期22 例，T2 期12 例，T3 期3 例，T4 期1 例。臨床分期：Ⅰ期22 例，Ⅱ期12 例，Ⅲ期3 例，Ⅳ期1 例。所有標(biāo)本收集前均獲得患者及家屬的知情同意，并通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 主要儀器和試劑

ABI 7500 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀（美國ABI 公司）；美國Thermo 紫外分光光度計(jì)；RNA 提取試劑Trizol 試劑（美國invitrogen 公司）。

1.3 方法

1.3.1 總RNA 的提取 使用液氮研磨法將組織磨成粉末，按照說明書的步驟加入Trizol 試劑提取標(biāo)本中的總RNA，使用紫外分光光度計(jì)測(cè)定其濃度，記錄OD260 值，所提總RNA 放置于-80℃待測(cè)。

1.3.2 qRT-PCR 按照說明書的步驟操作。取1μl 總RNA 加入20μl 反應(yīng)體系中，在PCR 儀上進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，將反應(yīng)體系設(shè)置為37℃ 60 min，95℃ 5 min，合成cDNA。以U6 snRNA 作為內(nèi)參，引物序列（上海捷瑞生物工程有限公司）見表1。樣品目的基因相對(duì)表達(dá)量采用ΔΔCT 方法計(jì)算，其中相對(duì)表達(dá)量=2-ΔΔCT。

表1 RT-PCR 特異性引物

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其中計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t 檢驗(yàn)進(jìn)行兩組之間的比較，采用四格表χ2檢驗(yàn)分析miR 表達(dá)量和患者臨床病理特征的關(guān)系。以P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 miR-193a-3p 在胃癌和癌旁組織中的表達(dá)情況

在胃癌患者癌組織和癌旁組織中miR-193a-3p 的相對(duì)表達(dá)量為（1.98±0.20）和（0.75±0.12），miR-193a-3p 在癌組織的相對(duì)表達(dá)量顯著高于癌旁組織（P ＜0.05）。

2.2 胃癌及癌旁組織中miR-193a-3p 的表達(dá)差異與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性

以胃癌組織中miR-193a-3p 的表達(dá)量平均值作為分界，將38 例標(biāo)本分為miR-193a-3p 低表達(dá)組和miR-193a-3p 高表達(dá)組。按照患者平均年齡54.2 歲為分界，分為≤54.2 歲組和＞54.2歲組，對(duì)患者的臨床病理指標(biāo)進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。結(jié)果顯示胃癌組織中miR-193a-3p 表達(dá)水平的高低與T 分期、臨床分期相關(guān)，與患者性別、年齡無顯著相關(guān)性，見表2。

表2 miR-193a-3p 表達(dá)水平和胃癌臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性[n（%）]

3.討論

miRNA 在胃癌等惡性腫瘤重起著重要作用，有研究顯示胃癌組織中也存在miRNA 表達(dá)的異常[3]，miRNA 參與調(diào)控機(jī)體包括細(xì)胞增殖、分化和凋亡等的多種生理過程[4]。本研究對(duì)miR-193a-3p 在胃癌中的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行探討，以期服務(wù)于胃癌的臨床診斷。

本研究結(jié)果顯示miR-193a-3p 在胃癌者的癌組織中相對(duì)表達(dá)量顯著高于癌旁組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。胃癌組織中miR-193a-3p 表達(dá)水平的高低與T 分期、臨床分期相關(guān)，與患者性別、年齡無顯著相關(guān)性。結(jié)果提示miR-193a-3p 可能在促進(jìn)胃癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用，miR-193a-3p 有望成為早期診斷的新型標(biāo)志物。