張得平 梁瓊月 石保峰 梁永進(jìn) 袁維 李界秋 首安發(fā) 沈方科

(1.廣西壯族自治區(qū)煙草公司賀州市公司,廣西賀州 542899;2.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,廣西南寧 530005;3.植物科學(xué)國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心 (廣西大學(xué)),廣西南寧 530005;4.廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司,廣西南寧 530001)

煙草病毒病是煙草生產(chǎn)上最為棘手的問題之一,其分布廣、危害重,且沒有有效的預(yù)防措施,嚴(yán)重影響烤煙的產(chǎn)量和品質(zhì)[1-2]?，F(xiàn)我國已鑒定出浸染煙草的病毒有近20種,其中危害較為嚴(yán)重的主要有煙草花葉病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)、黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)和馬鈴薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)[3]。TMV為煙草病毒病主要毒源,CMV和PVY其次,田間常見兩種或兩種以上病毒復(fù)合浸染,CMV和TMV復(fù)合侵染較為普遍,TMV和PVY復(fù)合侵染次之[4]。煙草病毒病防治的最佳時(shí)期為苗期,若未能于苗期阻斷而將帶毒植株移栽大田,則成為浸染源致病毒病大規(guī)模爆發(fā)[5-6],一旦發(fā)病將難以控制,因此,減少初浸染源是生產(chǎn)上防治病毒病的重要措施之一。有調(diào)查表明2010～2011年富川縣朝東鎮(zhèn)塘源村、羅城縣龍岸鎮(zhèn)石龍村和靖西縣化垌鎮(zhèn)八德村煙草花葉病毒病發(fā)病率高達(dá)80.0%以上,同時(shí)發(fā)現(xiàn)一種廣西區(qū)新出病害——番茄斑萎病毒病(TsWV),該病由番茄環(huán)斑點(diǎn)病毒引起的[7-8]。本文于2017年就廣西賀州各育苗場(chǎng)進(jìn)行了煙苗帶毒抽樣檢測(cè)并跟蹤調(diào)查大田煙株發(fā)病情況,探明病毒病原及發(fā)生規(guī)律,并提出誘導(dǎo)抗逆性防治措施,以期為煙草栽培病毒病防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試煙草品種為云煙87。

1.2 樣品采集

煙苗帶病情況調(diào)查于2017年2月23日至3月10日進(jìn)行,分別對(duì)廣西賀州市石家、麥嶺、朝東、公安、黃姚等5個(gè)育苗場(chǎng)煙苗進(jìn)行抽樣采集檢測(cè),對(duì)741個(gè)育苗池進(jìn)行采樣,每個(gè)育苗池采集2～3個(gè)樣本,共采集樣品1788個(gè)。

煙草大田栽培跟蹤調(diào)查于2017年6月10日至6月25日進(jìn)行,調(diào)查了賀州市富川縣的朝東、城北、富陽、福利、葛坡、麥嶺、石家、新華等8個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)和鐘山、昭平縣的花山、公安、兩安、紅花、石龍、同古、回龍、珊瑚、鳳翔、燕塘、清塘、黃姚、鳳凰等13個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn),共調(diào)查57個(gè)點(diǎn)90個(gè)村委,每個(gè)點(diǎn)隨機(jī)調(diào)查50～100株煙,合計(jì)煙株22346株,分別統(tǒng)計(jì)煙草花葉病毒(TMV)、黃瓜花葉病毒(CMV)、馬鈴薯 Y病毒(PVY)三種病毒病的發(fā)生情況。

1.3 方法及試劑

采用間接酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)進(jìn)行病毒檢測(cè)(步驟參照試劑盒說明書),煙草花葉病毒(TMV)、黃瓜花葉病毒(CMV)、馬鈴薯 Y病毒(PVY)試劑盒購自美國Agdia公司。

樣品OD405與陰性對(duì)照OD405(健康植物樣品)比值大于2.1視為陽性,即含有目標(biāo)病毒。

1.4 煙苗抗性誘導(dǎo)試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2017年1月～4月在賀州市富川縣麥嶺涌泉育苗大棚進(jìn)行,試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理,CK(清水對(duì)照)、T1(誘抗劑I號(hào)500倍液)、T2(誘抗劑II號(hào)500倍液)、T3(5%氨基寡糖素水劑 800倍液)、T4(0.5%香菇多糖水劑400倍液),重復(fù)3次。于煙苗4葉1心期(定苗后),進(jìn)行葉面噴施處理,間隔5d進(jìn)行第2次噴施(總共噴2次),并于移栽前測(cè)定各處理煙苗的生物量及檢測(cè)煙苗的TMV、CMV、PVYR病毒病發(fā)生情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 育苗場(chǎng)煙苗帶毒情況調(diào)查

由表1可見,在5個(gè)育苗場(chǎng)中以麥嶺場(chǎng)煙苗帶毒率最高,達(dá)30.23%;黃姚場(chǎng)最低,僅為6.55%。除了朝東場(chǎng)僅帶有TMV、CMV兩種病毒外,其余4個(gè)場(chǎng)均帶有TMV、CMV和 PVY三種病毒;以PVY病毒發(fā)病率最低,而發(fā)病率最高的為CMV病毒。1780株煙苗中,TMV、CMV和 PVY檢出率分別為8.72%、12.81%和2.96%。

表1 各育苗工場(chǎng)煙苗帶毒率檢測(cè)結(jié)果表

2.2 不同育苗場(chǎng)煙苗的大田病毒發(fā)病率跟蹤調(diào)查

由表2可見,煙草田間發(fā)病率最高的是由朝東場(chǎng)提供的煙苗,發(fā)病率最低的為黃姚場(chǎng)提供的煙苗;5個(gè)育苗場(chǎng)提供的煙苗田間表現(xiàn)均以CMV病毒發(fā)病率最低,TMV病毒以麥嶺場(chǎng)和石家場(chǎng)提供的煙苗發(fā)病率較高,PVY病毒以朝東、公安和黃姚3個(gè)場(chǎng)提供的煙苗發(fā)病率較高。可見,田間發(fā)病情況與苗期不一致,這可能是由于煙草病毒病在田間的發(fā)病程度除了與煙苗的帶毒浸染有關(guān)外,還與栽培地的環(huán)境狀況以及栽培管理存在很大關(guān)系。

表2 各育苗工場(chǎng)煙苗在大田發(fā)病程度調(diào)查結(jié)果表

2.3 不同誘抗劑處理煙苗病毒發(fā)病情況調(diào)查

由表3可見,不同誘抗劑處理的煙苗病毒帶毒率有顯著差異,T1處理的煙苗帶毒率僅為16.67%,顯著低于對(duì)照CK,T2處理煙苗帶毒率與對(duì)照CK無顯著差異,T3、T4兩個(gè)處理的煙苗帶毒率均顯著高于對(duì)照處理,分別提高了50%和40%。

表3 不同誘抗劑處理煙苗病毒帶毒率

2.4 不同誘抗劑處理對(duì)煙苗生物量的影響

由表4可見,不同誘抗劑處理對(duì)煙苗的生物量有顯著影響,煙苗地下部鮮重以CK處理最大,T1和T3處理顯著低于對(duì)照,T2和T4處理與對(duì)照差異不顯著;煙苗地上部鮮重仍以CK處理最大,其次為T1,T2、T3和T4三者差異不顯著;根冠比以T2處理最大而T1處理最低;整株生物量以CK顯著高于各個(gè)處理。

表4 不同誘抗劑處理對(duì)煙苗生物量的影響

3 討論與結(jié)論

目前煙草病毒病發(fā)生日趨嚴(yán)重,有研究表明病毒病發(fā)生的原因較為復(fù)雜,栽培品種、病原類型、田間管理、栽培土壤類型、氣候因素等均可成為病毒病誘發(fā)的原因[9-11]。本研究發(fā)現(xiàn),同一批種子于不同育苗場(chǎng)培育的煙苗帶毒情況不一,同時(shí)同一育苗場(chǎng)培育的煙苗于不同田間栽培感病情況也差異顯著;煙苗帶毒可能是由于部分種子攜帶病毒導(dǎo)致煙苗感病,同時(shí)由于育苗場(chǎng)及田間環(huán)境、氣候及管理因素的差異導(dǎo)致煙苗感病,田間感病還可能是由于帶病煙苗田間傳播,并因環(huán)境因素影響傳播速率,進(jìn)而使得同一育苗場(chǎng)提供的煙苗感病率差異顯著。同時(shí)本研究還表明,使用誘抗劑處理對(duì)煙苗病毒病感病情況影響顯著,以T1(誘抗劑I號(hào)500倍液)處理顯著降低了煙苗感病率,但是煙株生物量也顯著降低了。有研究表明,20%病毒A可濕性粉劑、5%菌毒清水劑、3.95%病毒必克可濕性粉劑、22%金葉寶等抗病毒藥劑在烤煙生產(chǎn)上具有較好防治效果[12-15],這可能是由于誘抗劑可以誘導(dǎo)煙草植株產(chǎn)生抗病毒浸染的抗體,增強(qiáng)抗病能力。