張 媛 ，毛浩萍 ，樊官偉

（1.天津中醫(yī)藥大學現(xiàn)代中藥國家重點實驗室，天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學方劑學教育部重點實驗室，天津 300193）

丹參是唇形科鼠尾草屬多年生草本植物，以根入藥，具有活血化瘀、調(diào)經(jīng)止痛、祛瘀生新等功效，對冠心病等有良好的療效，目前在冠心病、高血脂、高血壓等治療中被大量使用，其化學成分主要分為脂溶性和水溶性兩類，研究發(fā)現(xiàn)丹參具有抗氧化、抑制血小板聚集和抗凝血、抑制平滑肌細胞的增殖和遷移、擴張冠狀動脈及抗炎作用[1-2]，因此開發(fā)丹參的藥用價值、完善丹參的藥理作用研究是很有意義的工作，文章對丹參中脂溶性成分丹參酮ⅡA藥理作用進行概述，為進一步研究丹參的作用機制及藥物的開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 藥理作用

丹參是中國傳統(tǒng)的活血化瘀藥，丹參酮ⅡA是丹參中的脂溶性成分的代表，集中分布在丹參根的皮部，木質(zhì)部沒有或甚微。丹參酮ⅡA（CAS：568-72-9）為一種櫻紅色針狀結(jié)晶，分子量為294.34，不溶或微溶于水，易溶于二甲基亞砜、乙醇、丙酮、乙醚和苯等有機溶劑。采用超臨界CO2從丹參中萃取丹參酮ⅡA，工藝條件為：萃取壓力25 MPa，萃取溫度為40℃，萃取時間2 h，乙醇流量1.0 mL/min。采用 PubChem Compound數(shù)據(jù)庫（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/pccompound）檢索，得到丹參酮ⅡA的2D、3D化學結(jié)構(gòu)圖，如圖1。丹參酮ⅡA與疾病同時提出的文獻中，最常提及的疾病有：腫瘤、心血管疾病、炎癥、藥物相關不良反應、缺血、腦血管疾病、缺氧、動脈粥樣硬化、纖維化、癌癥、肝細胞、腦缺血、心肌梗塞、乳腺腫瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移、缺血再灌注、白血病、心肌缺血、糖尿病、心臟病、肺腫瘤。丹參酮ⅡA與基因同時提出的文獻中，最常提及的基因有腫瘤壞死因子、caspase 3、Bcl2、凋亡調(diào)節(jié)劑、Akt絲氨酸/蘇氨酸激酶1、白細胞介素6、絲裂原活化蛋白激酶8、腫瘤蛋白p53、磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸三激酶催化亞單位α、Jun原癌基因、AP-1轉(zhuǎn)錄因子。結(jié)合根據(jù)前期文獻查閱，分析丹參酮ⅡA與常提及的疾病和基因，推斷丹參酮ⅡA可能從抗炎、抗氧化、雌激素樣活性等幾個方面發(fā)揮作用，因此本文將探討丹參酮ⅡA在抗炎、抗氧化、雌激素樣活性及抗腫瘤方面的藥理作用，以期為后續(xù)研究丹參酮ⅡA的工作提供參考，具體如下。

1.1 抗炎作用 炎癥反應在動脈粥樣硬化、糖尿病、骨質(zhì)疏松等疾病的發(fā)生、發(fā)展中占有重要的意義，細菌內(nèi)毒素（脂多糖，LPS）是革蘭氏陰性菌細胞壁的主要成分，是引起人和動物炎癥反應的重要因素，LPS通過其受體TLR4將信號傳導至細胞內(nèi)，引起核因子NF-κB的激活，它能誘導一系列致炎基因的表達，導致多種炎癥介質(zhì)和細胞因子的釋放，最終引起局部或全身炎癥反應綜合征。因而有效阻斷NF-κB的異常激活可能成為臨床抗炎的有效途徑。

圖1 丹參酮IIA的2D、3D結(jié)構(gòu)圖

丹參酮ⅡA可降低血漿中白細胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平[3]，抑制RAW264.7細胞的增殖及磷脂酶A2的產(chǎn)生[4]，并促進RAW264.7細胞中白細胞介素-10的釋放，同時減少白細胞介素-6（IL-6）的產(chǎn)生及其mRNA的表達[5]，另外，丹參酮ⅡA可抑制由LPS刺激引起的EA.hy926細胞中 TLR4和TNF-α mRNA 表達[6]，發(fā)揮其抗炎活性。Tang等研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可抑制血管細胞黏附分子-1（VCAM-1）和胞間黏附分子-1（ICAM-1）產(chǎn)生，并以劑量依賴方式抑制TNF-α誘導的腦微血管內(nèi)皮細胞（BMVECs）中性白細胞的黏附，同時其顯著抑制TNF-α誘導的活性氧及丙二醛（MDA）的產(chǎn)生，并抑制NF-κB的激活，表明其在腦微血管內(nèi)皮細胞中調(diào)節(jié)TNF-α誘導的VCAM-1和ICAM-1的表達是通過抑制NF-κB的激活和活性氧的產(chǎn)生來發(fā)揮作用[7]。相關研究也證實丹參酮ⅡA可通過抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的激活及其相關黏附分子ICAM-1、VCAM-1mRNA表達以實現(xiàn)抑制動脈粥樣硬化過程中的炎癥反應從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化作用[8]。丹參酮ⅡA亦通過抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的激活及其相關黏附分子ICAM-1[9-10]、巨噬細胞遷移抑制因子、腦缺血再灌注大鼠腦中炎癥因子（MIF）的表達、TNF-α和白細胞介素（IL）-6的釋放，減輕腦缺血再灌注神經(jīng)保護作用[11]。另有研究證實，丹參酮ⅡA可降低輻射誘發(fā)的前炎癥細胞因子的釋放及NF-κBp65核轉(zhuǎn)位，其作用機制為通過抑制與NF-κB信號通路相關的前炎癥細胞因子基因的轉(zhuǎn)錄發(fā)揮其抗炎特性[12]。Jang等進一步研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可減少LPS刺激RAW264.7細胞引起的前炎癥細胞因子的產(chǎn)生及以劑量依賴的方式抑制IκB-α的磷酸化，并通過抑制NIK-IKK 和 MAPKs（p38、ERK1/2、JNK）信號通路的激活，從而抑制LPS誘導的IκB-α降解和NF-κB激活，以發(fā)揮抗炎活性[13]。

1.2 抗氧化作用 巨噬細胞遷移抑制因子（MIF）酸脫氫酶（LDH）等脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物并引起DNA損傷，多數(shù)心血管疾病都起因于自由基脂質(zhì)過氧化作用，如低密度脂蛋白（LDL）的氧化被認為是導致冠心病的主要原因；已證明ox-LDL是可致動脈粥樣硬化的脂蛋白，在動脈粥樣硬化患者鈣化形成過程中發(fā)揮中樞作用。因此，脂質(zhì)過氧化與多種疾病相關，會引起癌癥、衰老、心血管疾病等多種慢性病的發(fā)生。

丹參酮可抑制LDL的氧化調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝過程，發(fā)揮抗氧化作用[14-15]。研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA可降低血漿中ox-LDL濃度，并減少超氧陰離子和MDA的產(chǎn)生，同時增加Cu/Zn SOD活性，及Cu/Zn SOD mRNA和蛋白的表達，而丹參酮ⅡA抑制ox-LDL的產(chǎn)生不依賴于血漿中脂類、鈣離子和活性維生素D的濃度，表明其對動脈粥樣硬化鼠模型具有抗氧化作用[16]。在2K2C高血壓大鼠模型中，丹參酮ⅡA抑制的NAD（P）H氧化酶活性及活性氧的產(chǎn)生，發(fā)揮抗氧化作用提高心臟功能[17]。研究發(fā)現(xiàn)，在過氧化氫（H2O2）所致J774巨噬細胞損傷模型[18]及線栓法致大腦中動脈閉塞復制大鼠局灶性腦缺血再灌注模型[19]中，丹參酮ⅡA均可顯著地增加谷胱甘肽過氧化物酶活性。王維蓉等研究發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA對H2O2誘導的人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞株CRL21730損傷引起的過氧化物MDA和LDH產(chǎn)生呈劑量依賴性減少，證實丹參酮ⅡA對CRL21730氧化損傷的保護作用[20]。陳海明等的研究證實丹參酮ⅡA可劑量依賴性地抑制H2O2所致的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（ECV304）活力降低，減少MDA生成，提高超氧化物歧化酶SOD活性，并可抑制細胞內(nèi)皮素ET-1 mRNA的表達，增加過氧化物酶體增生物激活受體PPAR-γ mRNA的表達，從而表明丹參酮ⅡA對H2O2所致人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷具有明顯的保護作用[21]。對于糖尿病腎病的硬化應激反應，丹參酮ⅡA可升高大鼠經(jīng)一側(cè)腎切除后腹腔注射鏈脲佐菌素致糖尿病腎病模型中的氧化應激指標MDA，降低SOD活力，起到保護腎臟延緩糖尿病腎病發(fā)生、發(fā)展的作用[22]。此外，丹參酮ⅡA通過清除脂類自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化的鏈式反應，從而抑制DNA加成物的生成以減少細胞毒性，能有效地抑制細胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物與DNA相互作用，發(fā)揮對DNA的保護作用[23-25]。

1.3 雌激素樣作用 植物雌激素（PE）是指一類非固醇植物來源的具有雌激素樣活性的化合物。大多數(shù)具有與雌二醇類似的結(jié)構(gòu)，可與17β-雌二醇競爭核內(nèi)的雌激素受體（ER）以調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮雌激素樣活性。另外，可通過非基因組效應調(diào)節(jié)細胞信號轉(zhuǎn)導有關酶的活性，如酪氨酸蛋白激酶，DNA拓撲異構(gòu)酶和核糖體S6蛋白激酶等。植物雌激素對神經(jīng)，心血管等方面具有保護作用，能改善圍絕經(jīng)期婦女的健康狀況。它不僅對許多疾病有預防作用，而且還能作為一種選擇性的治療手段，其臨床作用正受到眾多學者的關注。

早期對丹參酮的研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮增加雌性幼齡小鼠（體質(zhì)量11～12 g）子宮重量，隨后研究丹參酮對成年去卵巢雌性小鼠子宮重量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參酮組與對照組子宮重量無明顯差異，而與雌激素組有顯著性差異，說明丹參酮的雌激素樣活性是通過卵巢起作用的[26]。木海鷗等研究發(fā)現(xiàn)丹參酮能升高更年期大鼠降低的血清雌二醇（E2）水平，并顯著降低更年期大鼠所升高的促卵泡激素（FSH）和黃體生成素（LH），同時提高其子宮、卵巢和腎上腺系數(shù)，表明丹參酮對更年期大鼠的激素紊亂具有調(diào)節(jié)作用[27]。在瞬時轉(zhuǎn)染試驗中發(fā)現(xiàn)，當ERα或ERβ表達質(zhì)粒中的一者或兩者在Hela細胞中共同表達時，丹參酮ⅡA（1×10-5mol）可以雌激素受體依賴方式增加雌激素應答元件熒光素酶活性，表明其具有雌激素樣活性。此外，丹參酮ⅡA以雌激素受體依賴方式抑制LPS刺激的RAW 264.7細胞NO的產(chǎn)生和iNOSmRNA的表達及炎癥細胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）的表達[28]。

1.4 抗腫瘤作用 丹參酮通過對各種腫瘤細胞的殺傷、誘導分化及誘導凋亡等機制而發(fā)揮抗腫瘤作用。丹參酮除可通過抑制抗增殖細胞核抗原（PCNA）和細胞增殖相關基因表達影響DNA多聚酶δ活性，還可通過其呋喃環(huán)、醌類結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的自由基引起DNA損傷，抑制腫瘤細胞DNA合成；丹參酮對腫瘤細胞亦有誘導分化作用，可誘導腫瘤細胞分化成為正常細胞或接近正常細胞，而對正常細胞無殺傷作用；丹參酮可進一步誘導腫瘤細胞的凋亡。丹參酮ⅡA一方面通過對細胞周期的影響而抑制其增殖、誘導細胞分化；另一方面，通過Fas途徑、增加bax/bcl-2蛋白表達比例，以誘導凋亡，此外，丹參酮ⅡA還可通過選擇性的激活Caspase家族成員來發(fā)揮其抗癌作用[29]。

MosaddikMA等[30]研究發(fā)現(xiàn)丹參酮對小鼠類淋巴細胞白血病細胞（P388）的生長具有抑制作用，且有很強的細胞殺傷作用。Pan TL等[31]研究發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA對多種人癌細胞系具有殺傷作用，2.5 mg/mL丹參酮ⅡA可通過干擾微管形成抑制人宮頸癌細胞生長且呈劑量和時間依賴性，導致細胞G2/M期停滯進而誘導凋亡。研究發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA抑制Hela細胞生長[32]，并顯著上調(diào)人肺腺癌細胞（SPC-A-1）P53、P21基因的表達且抑制其DNA的合成，對SPC-A-1細胞增殖具有顯著抑制作用[33]。丹參酮ⅡA將白血病細胞（NB 4細胞株）阻滯于G0/G1期，而S期的細胞數(shù)明顯減少，c-myc、bcl-2基因蛋白表達降低，c-fos、p53基因蛋白表達增加，其可能是通過抑制細胞原癌基因、誘導腫瘤細胞分化而發(fā)揮作用[34]。丹參酮ⅡA通過抑制ERK通路而抑制卵巢癌細胞（CAOV-3）增殖，并誘導細胞凋亡，其途徑與上調(diào)Bax表達，降低bcl-2表達有關[35]。相關研究發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA誘導雌激素受體陽性乳腺癌細胞MCF-7和雌激素受體陰性細胞MDA-MB-231凋亡，丹參酮ⅡA以時間和劑量依賴的方式抑制MDA-MB-231細胞增殖，以劑量依賴的方式誘導細胞凋亡，其作用機制與抑制DNA合成，誘導凋亡相關[36]。近年研究發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA可通過下調(diào)NF-κB途徑的p65、IKK-β及其磷酸化蛋白水平抑制人胃癌SGC7901細胞增殖并促進凋亡，而對IKB-α水平無明顯變化，但其磷酸化蛋白水平明顯降低，同時對IKK-α及其磷酸化蛋白表達水平表達變化均不明顯，據(jù)此，丹參酮ⅡA抑制人胃癌SGC7901細胞增殖并促進凋亡的作用機制需進一步研究和證實[37]。

2 結(jié)語

文中丹參酮ⅡA對炎癥介質(zhì)和細胞因子的基因表達及其信號通路的影響進一步揭示丹參酮ⅡA在抗炎、抗氧化、抗腫瘤過程中的作用機制。目前，丹參酮ⅡA在心血管領域已得到廣泛應用，隨著對其雌激素樣活性的進一步研究，丹參酮ⅡA可以作為一個潛在的選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑來治療與抗炎、抗氧化相關的糖尿病、骨質(zhì)疏松、退行性神經(jīng)疾病和心血管疾病而不會增加乳腺癌的發(fā)病率，將為丹參酮ⅡA在臨床應用及丹參的新藥研發(fā)提供有力的理論依據(jù)。