常劍鋒　羅宇婷　陳莉

[摘要]目的 探討血紅蛋白A2（HbA2）和胎兒血紅蛋白（HbF）聯(lián)合檢測(cè)在兒童β-地中海貧血（β-地貧）篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 選擇2015年1月～2017年10月我院收治的48例β-地貧患兒為實(shí)驗(yàn)組，選同期于我院體檢的50例健康兒童作為參照組。觀察比較兩組血漿中HbA2和HbF含量，以基因檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，利用受試者工作特征（ROC）曲線分析比較HbA2、HbF及兩者聯(lián)合曲線下面積（AUC）、最適界值點(diǎn)（cutoff值）、敏感度及特異度，并采用Logistic回歸分析HbA2和HbF對(duì)β-地貧患兒的診斷價(jià)值。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HbA2、HbF及兩者聯(lián)合的AUC分別為0.923、0.896和0.954，其中HbA2和HbF的cutoff值分別為3.5%和0.6%，兩者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度分別為97.92%和86.00%。二分類Logistic回歸分析結(jié)果表明，HbA2和HbF指標(biāo)對(duì)診斷β-地貧患兒均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且HbA2的診斷價(jià)值顯著>HbF。結(jié)論 HbA2和HbF指標(biāo)檢測(cè)在兒童β-地貧篩查中均具有一定的應(yīng)用價(jià)值，且HbA2的診斷價(jià)值明顯優(yōu)于HbF，兩者聯(lián)合診斷可大大提高診斷符合率。

[關(guān)鍵詞] β-地中海貧血；HbA2；HbF；患兒；診斷

[中圖分類號(hào)] R556.61 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）6（c）-0115-03

[Abstract]Objective To investigate the value of combined detection of hemoglobin A2 （HbA2） and fetal hemoglobin（HbF） in the screening of β-thalassemia in children.Methods A total of 48 children with β-thalassemia admitted in our hospital from January 2015 to October 2017 were selected as the experimental group and 50 healthy children undergoing physical examination in our hospital as the reference group.The levels of HbA2 and HbF in the two groups were observed and compared.The gene test results were taken as the gold standard and used the ROC curve to compare HbA2，HbF and the area under the curve（AUC），cutoff value，sensitivity and specificity，and used the Logistic regression to analysis HbA2 and HbF in children with β-thalassemia diagnostic value.Results.The levels of HbA2 and HbF in the experimental group were （5.12±0.65）% and （1.27±0.86）%，which were significantly higher than those in the reference group （2.63 ± 0.76）% and （0.49 ±0.38）%，respectively （P<0.05）.The AUC of HbA2，HbF and their combination were 0.923，0.896 and 0.954，respectively and the cutoff values of them were 3.5% and 0.6% respectively.The diagnostic sensitivity and specificity of HbA2 and HbF joint diagnosis were 97.92% and 86.00% respectively.Logistic regression analysis showed that both HbA2 and HbF were statistically significant in diagnosing β-thalassemia children （P<0.05），and the diagnostic value of HbA2 was significantly higher than that of HbF.Conclusion Detection of HbA2 and HbF in children with β-thalassemia screening has a certain value，and the diagnostic value of HbA2 was significantly better than HbF，a combination of the two can greatly improve the diagnostic accuracy.

[Key words]β-thalassemia；HbA2；HbF；Children；Diagnosis

β-地中海貧血（β-地貧）主要是由于β-珠蛋白基因異常導(dǎo)致β鏈的合成受到部分甚至完全抑制的具有遺傳性的一種血紅蛋白病，患兒一般出生時(shí)無(wú)明顯癥狀，多于嬰兒期發(fā)病[1-2]。有研究表明，β-地貧通常跟結(jié)構(gòu)異常的血紅蛋白變異體一起出現(xiàn)，兩者會(huì)相互影響引起患兒出現(xiàn)輕重不一、更加多樣化的臨床表現(xiàn)[3]。目前對(duì)于該疾病臨床上還沒(méi)有切實(shí)有效的治療方法，故對(duì)人群中β-地貧攜帶者的篩查為控制本病的重要措施[4-5]。基因診斷是當(dāng)前作為可靠的診斷方式，但由于成本較高不適合人群的普遍篩查，而常規(guī)的檢測(cè)MCH、MCV和RDW雖然成本低且操作簡(jiǎn)便，但其靈敏度及特異度不高，容易出現(xiàn)誤診和漏診情況[6-7]。本研究探討HbA2和HbF聯(lián)合檢測(cè)在兒童β-地貧篩查中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2015年1月～2017年10月我院收治的48例β-地貧患兒為實(shí)驗(yàn)組，選同期于我院體檢的50例健康兒童作為參照組。所有研究對(duì)象及家屬知情同意并簽署知情同意書，且本研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)組納入標(biāo)準(zhǔn)：①基因診斷確診為β-地貧患兒；②無(wú)其他感染性或血液性疾病的患兒；③無(wú)并發(fā)嚴(yán)重內(nèi)科慢性疾病的患兒。參照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①基因診斷無(wú)珠蛋白基因異常的兒童；②體檢結(jié)果為健康的兒童。實(shí)驗(yàn)組男30例，女18例；年齡3～14歲，平均（7.69±3.64）歲。參照組男28例，女22例；年齡2～15歲，平均（7.85±3.97）歲。兩組的年齡和性別等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

所有研究對(duì)象于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下取2 ml EDTA-K2抗凝靜脈血，混合搖勻后，放置室溫環(huán)境可行檢測(cè)操作。利用capillarys 2 sebia fles piercing全自動(dòng)毛細(xì)管血紅蛋白電泳儀和配套試劑，對(duì)HbA2和HbF進(jìn)行檢測(cè)。其中HbA2含量>3.5%，HbF含量>2.6%為陽(yáng)性結(jié)果。所有操作均嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書進(jìn)行，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和真實(shí)性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選擇SPSS 22.0軟件對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)；利用ROC曲線及Logistic回歸分析HbA2、HbF及兩者聯(lián)合診斷β-地貧患兒的價(jià)值，取Youden指數(shù)最大值作為cutoff值，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組HbA2和HbF含量的比較

實(shí)驗(yàn)組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2繪制ROC曲線分析

HbA2、HbF及兩者聯(lián)合AUC分別為0.923、0.896和0.954，其中HbA2的cutoff值為3.5%，HbF的cutoff值為0.6%，兩者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度分別為97.92%（47/48）和86.00%（43/50）（表2、圖1）。

2.3二分類Logistic回歸分析

將HbA2和HbF診斷兒童β-地貧的作用大小利用二分類Logistic回歸分析進(jìn)行方程擬合，方程中兩項(xiàng)指標(biāo)對(duì)診斷均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且HbA2的診斷價(jià)值顯著>HbF（表3）。

3討論

β-地貧為我國(guó)南方較為常見(jiàn)的一種單基因遺傳病，且攜帶者數(shù)量較多，目前仍無(wú)有效的根治方法，故對(duì)兒童開(kāi)展大規(guī)模的篩查，并完善篩查方案選擇高效的聯(lián)合篩查方案對(duì)該疾病的早預(yù)防和早發(fā)現(xiàn)極其重要[8-9]?；蛟\斷是診斷地貧的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于檢測(cè)成本高，尚不能完全覆蓋α或β-型珠蛋白基因，故并不適合用于大規(guī)模的篩查[10-11]。地貧患者通常會(huì)發(fā)生多樣化的血紅蛋白變體，相關(guān)研究表明，通過(guò)對(duì)紅細(xì)胞一些參數(shù)如MCH和MCV等進(jìn)行篩查地貧患者有一定的可行性，但準(zhǔn)確性不高容易發(fā)生漏診和誤診的情況[12-13]。有研究表明，β-地貧患兒體內(nèi)HbA2和HbF含量普遍比正常人有所升高，這兩項(xiàng)指標(biāo)變化可作為β-地貧的重要特征[14]。本研究探討HbA2和HbF聯(lián)合檢測(cè)在兒童β-地貧篩查中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床診斷提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組血清的HbA2和HbF含量分別為（5.12±0.65）%和（1.27±0.86）%，明顯高于參照組的（2.63±0.76）%和（0.49±0.38）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示β-地貧患兒血清中HbA2和HbF含量明顯高于健康兒童。β-地貧患兒體內(nèi)因?yàn)棣滦椭榈鞍谆虍惓?dǎo)致β珠蛋白鏈合成受到抑制，而δ和γ型珠蛋白基因由于機(jī)體代償性增加轉(zhuǎn)錄過(guò)程，合成相應(yīng)的珠蛋白以及α珠蛋白均有所增加，因此導(dǎo)致生成HbA2和HbF含量有所增加[15-16]。此外，本研究將HbA2和HbF診斷兒童β-地貧的作用利用二分類Logistic回歸進(jìn)行分析，結(jié)果顯示兩項(xiàng)指標(biāo)的回歸系數(shù)B值均>0，提示兩項(xiàng)指標(biāo)和β-地貧患兒均有密切關(guān)系；兩項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)危險(xiǎn)因素比值OR值均>1，其中在其他條件不變的情況下，β-地貧患兒的HbA2含量發(fā)生異常的危險(xiǎn)是正常人兒童的10.293倍，明顯高于HbF的4.225倍，提示HbA2和HbF指標(biāo)對(duì)診斷β-地貧患兒均有一定的診斷價(jià)值，且HbA2的診斷價(jià)值顯著高于HbF，與石文等[17]的研究結(jié)果一致。

本研究以基因檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，繪制ROC曲線分析HbA2和HbF及聯(lián)合診斷兒童β-地貧的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果顯示HbA2、HbF及兩者聯(lián)合的AUC均>0.9，表明三者均具有較高的診斷價(jià)值，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[18-20]。其中HbF的AUC為0.896，具有一定的診斷價(jià)值，但其靈敏度較低（81.25%），診斷準(zhǔn)確率較低，容易造成漏診情況；HbA2的AUC為0.923，靈敏度和特異度分別為97.92%和86.00%，具有較高的診斷價(jià)值；HbA2和HbF聯(lián)合診斷的AUC最大達(dá)到0.954，且其靈敏度和特異度分別為97.95%和85.71%，明顯提高了診斷符合率。此外，本研究結(jié)果中HbA2和HbF的cutoff值分別為3.5%和0.6%，即HbA2含量為3.5%，HbF含量為0.6%時(shí)具有較高的靈敏度和特異度，診斷兒童β-地貧的準(zhǔn)確性最好。

綜上所述，HbA2和HbF指標(biāo)檢測(cè)在兒童β-地貧篩查中均具有一定的診斷價(jià)值，且HbA2的診斷價(jià)值明顯優(yōu)于HbF，兩者聯(lián)合診斷可以大大提高診斷符合率，可有效降低篩查過(guò)程中出現(xiàn)的誤診及漏診情況，在臨床上值得進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2018-03-06 本文編輯：崔建中）