姚炯濤

[摘要]目的 研究可溶性B7-H4在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中的意義。方法 選取2013年1月～2014年12月我院收治的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者65例為RA組，骨性關(guān)節(jié)炎（OA）66例為OA組，并選取同時(shí)期來我院行健康體檢對(duì)象70例為健康組。利用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)三組患者可溶性B7同源體4（sB7-H4）、抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體、葡萄糖6-磷酸異構(gòu)酶（GPI）水平，免疫比濁法測定患者的類風(fēng)濕因子（RF）。比較分析sB7-H4在RA診斷中的意義。結(jié)果 RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。sB7-H4與RF、抗CCP抗體成正相關(guān)關(guān)系，而與GPI水平無相關(guān)性。另外，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI陽性率顯著高于OA組與健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 sB7-H4在診斷RA中有著很高價(jià)值，臨床應(yīng)用前景較好。

[關(guān)鍵詞]可溶性B7-H4；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；診斷意義；抗CCP抗體水平

[中圖分類號(hào)] R593.22 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）6（c）-0112-03

[Abstract]Objective To study the significance of soluble B7-H4 in the diagnosis of rheumatoid arthritis.Methods A total of 65 rheumatoid arthritis （RA） patients and 66 osteoarthritis （OA） patients admitted to our hospital from January 2013 to December 2014 were selected.At the same time，70 patients were selected for physical examination in our hospital.The serum levels of sB7-H4，anti-cyclic citrullinated peptide （CCP） antibodies，and glucose 6-phosphate isomerase （GPI） levels were measured in three groups by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.The patient′s rheumatoid factor（RF） was measured by immunoturbidimetry.The significance of sB7-H4 in the diagnosis of RA was compared and analyzed.Results The levels of sB7-H4，RF，anti-CCP antibody and GPI in RA group were significantly higher than those in OA group and healthy group，the differences were statistically significant（P<0.05）.sB7-H4 was positively correlated with RF and anti-CCP antibodies but not with GPI levels.In addition，the positive rates of sB7-H4，RF，anti-CCP antibodies，and GPI in the RA group were significantly higher than those in the OA group and the healthy group，the differences were statistically significant （P<0.05）.Conclusion sB7-H4 has high value in diagnosing RA and has good clinical application prospects.

[Key words]Soluble B7-H4；Rheumatoid arthritis；Diagnostic significance；Anti CCP antibody level

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一個(gè)累及周圍關(guān)節(jié)為主的多系統(tǒng)炎癥性的自身免疫病，我國發(fā)生RA的概率為0.35%左右，是導(dǎo)致人們喪失較強(qiáng)勞動(dòng)力及致殘的重要病因[1]。盡管近年來發(fā)現(xiàn)的一些診斷指標(biāo)如類風(fēng)濕因子、抗核周因子、抗瓜氨酸環(huán)肽抗體等對(duì)RA的診斷有一定的價(jià)值，但這些指標(biāo)陽性或升高亦可見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合癥等其他免疫性疾病，因而RA臨床診斷存在著特異性不明顯、靈敏度較低等問題[2-3]。因此，在進(jìn)行RA早期診斷時(shí)，篩選新型的檢測物對(duì)這項(xiàng)工作有著重要影響。本研究選取我院收治的RA患者、骨性關(guān)節(jié)炎（OA），并選取同時(shí)期來我院行健康體檢對(duì)象70例，探討sB7-H4在診斷RA中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2014年12月我院收治的RA患者65例為RA組，男女性別比為32∶33，年齡28～69歲，平均（43.98±4.98）歲。OA患者66例為OA組，男女性別比為33∶33，年齡29～72歲，平均（43.43±4.25）歲。并選取同期來我院行健康體檢對(duì)象70例為健康組，男女性別比為36∶34，年齡31～71歲，平均（43.06±4.66）歲。三組研究對(duì)象的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。所有研究對(duì)象均知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審核。

1.2儀器與試劑

酶聯(lián)微量反應(yīng)板、抗小鼠可溶性B7同源體4（B7-H4）多克隆抗體、辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記羊抗兔IgG（免疫球蛋白G），TMB底物（3，3，5，5-四甲基聯(lián)苯胺底物溶液）、抗人B7-H4單克隆抗體及顯色劑?？弓h(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體、葡萄糖6-磷酸異構(gòu)酶（GPI）試劑，類風(fēng)濕因子（RF）試劑。全自動(dòng)生化分析儀（貝克曼公司，型號(hào)au480）、全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀（美國貝克曼庫爾特公司，型號(hào)DxI800）。

1.3采集標(biāo)本

清晨空腹取靜脈血3 ml離心留血清備用，采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法對(duì)B7-H4含量、CCP含量進(jìn)行測定，采取乳膠凝集法對(duì)RF予以檢驗(yàn)，采取抗核抗體制ANA（IIF）法對(duì)抗核周因子進(jìn)行檢測。

1.4判斷標(biāo)準(zhǔn)

RF>20 U/ml為陽性；抗CCP抗體>5 U/ml為陽性；GPI抗原>0.2 mg/L[4]為陽性；sB7-H4>36.5 μg/L為陽性。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)；多組計(jì)量資料比較采用F檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1三組sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平的比較

RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2三組sB7-H4與RF、抗CCP抗體、GPI水平的相關(guān)性分析

將RA組的sB7-H4水平與RF、抗CCP抗體、等進(jìn)行單因素分析，結(jié)果顯示，sB7-H4與這些指標(biāo)間成正相關(guān)關(guān)系，而與GPI水平無相關(guān)性，sB7-H4與RF的相關(guān)性（r=0.612，P<0.05）；sB7-H4與抗CCP抗體的相關(guān)性（r=0.536，P<0.05）；sB7-H4與GPI的相關(guān)性（r=0.209，P>0.05）。

2.3三組sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI診斷陽性率的比較

RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI診斷陽性率顯著高于OA與健康組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論新成員，有抑制細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞因子生長及阻礙細(xì)胞周期進(jìn)程的作用，可以對(duì)細(xì)胞的免疫應(yīng)答進(jìn)行負(fù)相調(diào)控[5]。B7-H4的mRNA在淋巴樣及非淋巴樣組織中得到廣泛表達(dá)，但實(shí)際上它的蛋白質(zhì)在各種組織中的表達(dá)性較低，而在樹突狀細(xì)胞及單核細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞表面有著較高的誘導(dǎo)性表達(dá)[6]。B7-H4可對(duì)腫瘤細(xì)胞的胞漿及胞膜進(jìn)行表達(dá)，另外還會(huì)發(fā)現(xiàn)其在血清中的存在形式為可溶性形式[7]。B7-H4可有效地對(duì)T細(xì)胞增殖產(chǎn)生抑制，并抑制細(xì)胞因子，抑制細(xì)胞周期進(jìn)程，進(jìn)而負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞免疫應(yīng)答；其能促進(jìn)上皮細(xì)胞向惡性轉(zhuǎn)化，并有效的保護(hù)腫瘤細(xì)胞，調(diào)控腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)歸。B7-H4中可能存在缺失跨膜區(qū)剪切體并在血清中表達(dá)，且能通過基質(zhì)金屬蛋白酶作用而從膜蛋白脫落到血清。

實(shí)驗(yàn)表明，乳腺癌及肺癌等癌癥類型的患者，其血清B7-H4水平出現(xiàn)顯著增高[8-9]。通過對(duì)RA患者發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在其中起主導(dǎo)作用的為T細(xì)胞[10-11]。這種細(xì)胞群會(huì)轉(zhuǎn)移到患者的病變關(guān)節(jié)，在對(duì)其中特定的抗原肽進(jìn)行識(shí)別后，釋放了多種炎癥因子，如白介素-17（IL-17）、干擾素-γ（INF-Y）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）[12-13]。通過這樣的作用，實(shí)現(xiàn)滑膜細(xì)胞增值，使其形成血管翳，最終破壞患者。通過研究T細(xì)胞活化機(jī)制得出，T細(xì)胞活化及效應(yīng)發(fā)揮需要有共刺激信號(hào)的作用。若是在其活化過程中，沒有共刺激信號(hào)，抗原刺激就容易出現(xiàn)免疫耐受的情況。已知的幾種共刺激分子在RA中占據(jù)主導(dǎo)作用[14]。如在對(duì)RA患者進(jìn)行治療時(shí)連續(xù)6個(gè)月使用細(xì)胞毒T細(xì)胞抗原4（CTLA-4-Ig）融合蛋白，會(huì)發(fā)現(xiàn)患者本身含有的關(guān)節(jié)炎癥出現(xiàn)減輕，生活情況也因關(guān)節(jié)炎癥的減輕而得到好轉(zhuǎn)。國內(nèi)外有關(guān)B7-H4與RA的關(guān)系報(bào)道甚少[15-16]。

本研究結(jié)果顯示，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組（P<0.05）。sB7-H4與RF、抗CCP抗體成正相關(guān)關(guān)系，而與GPI水平無相關(guān)性。另外，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI陽性率顯著高于OA組與健康組（P<0.05），提示可溶性B7-H4在RA診斷、判斷預(yù)后和轉(zhuǎn)歸及評(píng)價(jià)治療療效等方面，都具有較高的實(shí)用價(jià)值。如可溶性B7-H4可作為新的RA標(biāo)志物，且在發(fā)病早期就能檢測，那么采取有針對(duì)性的治療措施能降低病患的致殘率，有良好的經(jīng)濟(jì)效益及社會(huì)效益，此外還可將sB7-H4作為一種潛在的分子靶點(diǎn)，以提供新的腫瘤治療策略。

綜上所述，sB7-H4在診斷RA中有著很高價(jià)值，臨床應(yīng)用前景較好。

[參考文獻(xiàn)]

[1]李淑湘，張光波，孫海洪，等.人可溶性B7-H3酶聯(lián)試劑盒的研制及在肝病患者血清中水平的檢測[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2012，28（1）：84-86.

[2]陳俊俊，石紅兵，鄭曉，等.可溶性B7-H4分子在乳腺癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義[J].臨床腫瘤學(xué)雜志，2012， 17（7）：597-600.

[3]郭天坤.血清可溶性B7-H4水平對(duì)卵巢癌早期診斷和療效評(píng)價(jià)的價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（21）：2460-2461.

[4]葉世富，首峰，張景俊，等.放射粒子聯(lián)合TACE介入治療原發(fā)性肝癌的療效以及對(duì)可溶性B7-H4的影響[J].實(shí)用癌癥雜志，2016，31（9）：1402-1405.

[5]李虎年，何婷，許濤.甘氨雙唑鈉聯(lián)合鴉膽子油乳介入治療原發(fā)性肝癌的療效以及對(duì)可溶性B7-H4的影響[J].實(shí)用癌癥雜志，2017，32（7）：1139-1141.

[6]李春仙，李美紅，王峰.非小細(xì)胞肺癌患者血清可溶性B7-H4檢測的臨床意義[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25（10）：1582-1583.

[7]劉延彤，張茜，白海，等.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者間充質(zhì)干細(xì)胞治療后可溶性補(bǔ)體受體2的變化及意義[J].西北國防醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（12）：783-786.

[8]馬萬明，岳飛利，白珊珊，等.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者外周血白細(xì)胞介素-37及可溶性PD-1分子的檢測價(jià)值分析[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2017，12（4）：488-491.

[9]劉自金，王寧，賈立坤.sTREM-1、TNF-α、IL-6在老年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷中的應(yīng)用[J].中國骨質(zhì)疏松雜志，2015， 10（9）：1091-1094.

[10]張楊文.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎血清RF與抗-CCP抗體濃度檢測及其意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜雜，2015，31（1）：108-109.

[11]蘇榮華，劉穎，呂明莊，等.太乙神針對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠TNF-α和可溶性CD4、CD8的影響[J].貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，40（10）：1033-1035.

[12]周英霞，趙福濤.可溶性和膜結(jié)合性CD14在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血中的表達(dá)及臨床意義[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2015，40（4）：440-442.

[13]陳棲棲，田娟，張晶，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清IL-37和可溶性PD-1分子的表達(dá)水平及臨床意義[J].中國免疫學(xué)雜志，2017，33（3）：422-425.

[14]李偉青，王海東.GPI、抗-CCP和RF聯(lián)合檢測對(duì)診斷類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床意義[J].國外醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)地理分冊(cè)，2017，38（2）：179-181.

[15]王俊英，李亞蕊，楊蕊華，等.聯(lián)合檢測自身抗體在幼年類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎早期診斷中的意義[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病雜志（電子版），2016，4（21）：137-138.

[16]葛艷玲，宋慧，劉武征，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎早期診斷中抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測的意義[J].中國醫(yī)師進(jìn)修雜志，2015， 38（9）：629-631.

（收稿日期：2018-03-15 本文編輯：崔建中）