周萍，劉娜，焦瑞寶，章文

(銅陵市人民醫(yī)院臨床檢驗中心，安徽 銅陵 244009)

Sysmex XN-3000全自動血液分析流水線由XN-3000血液分析儀、SP 10血涂片制備儀和流水線軌道三部分組成，血液分析儀部分有三個通道可以分析血小板(PLT)數(shù)值。PLT-I通道是以電阻抗法檢測PLT數(shù)值，PLT-O通道是以激光法對熒光染料染色后的網(wǎng)織紅細胞和PLT進行檢測，得到網(wǎng)織紅細胞相關(guān)數(shù)值和PLT數(shù)值，新增的PLT-F通道也是激光法檢測，但所用染料是特殊的核酸染料，單獨對PLT進行核酸染色后檢測。本文以PLT計數(shù)的參考方法——手工法為對比的參照方法，以PLT減低程度不同分組比較，結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本來源2015年12月至2016年5月銅陵市人民醫(yī)院住院患者118例，其中男76例，女42例，年齡26～92歲。所有樣本PLT值均≤60×109·L-1。

1.2標(biāo)本采集真空靜脈采血以EDTA-K2抗凝，抗凝劑與血液比例嚴格符合標(biāo)準(zhǔn)，避免標(biāo)本有凝塊和溶血的情況。

1.3儀器和試劑血液分析儀為Sysmex公司生產(chǎn)XN-3000型全自動血液分析流水線，全部檢測試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品均為Sysmex公司產(chǎn)的儀器原裝配套試劑。顯微鏡為Olympus CX31型，手工法稀釋液按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[1]配制。

1.4方法每天在日常工作之前以校準(zhǔn)品校正儀器，先檢測不同水平的定值質(zhì)控物以保證儀器處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)。樣本按參考方法手工法PLT值結(jié)果的高低分為四組：PLT≤15×109·L-1組21例、15×109·L-1

表1 四組樣本PLT值比較

注：4種方法的比較為單因素重復(fù)測量方差分析

2 結(jié)果

2.1四種方法結(jié)果比較四組樣本分別以PLT-I法、PLT-O法、PLT-F法、手工法檢測的PLT值之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2PLT值相關(guān)性分析PLT-F法與手工法相關(guān)系數(shù)最高，r=0.995 7，P<0.05；較低的為PLT-I法，其與手工法相關(guān)系數(shù)：r=0.940 9，P<0.05；介于中間的為PLT-O法，其與手工法相關(guān)系數(shù)：r=0.962 3，P<0.05。

3 討論

住院患者的PLT值的結(jié)果異常中減低的表現(xiàn)明顯多見，有骨髓造血原因的增生減低和免疫性PLT減少的情況，也有治療藥物影響所造成的PLT破壞的情況等。由于PLT在止血和凝血方面的作用，低值PLT檢測的準(zhǔn)確性對判斷有無出血傾向很重要，準(zhǔn)確的結(jié)果對臨床用藥控制和補充PLT的輸注療法有重要價值。參考方法手工法雖然較為可靠，但操作相對繁瑣，不適合臨床多樣本和大規(guī)模體檢的需要，儀器檢測更為普遍和適合實際。Sysmex XN-3000全自動血液分析儀PLT-I法是根據(jù)PLT體積大小分析的電阻抗法，PLT-O法是熒光染料針對PLT α-顆粒染色后再以激光法檢測熒光強度，可以排除和PLT相同體積的小紅細胞和紅細胞碎片的檢測干擾，PLT-F法是以特殊的核酸染料針對PLT內(nèi)的含核酸豐富的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行標(biāo)記，對PLT體積的大小無選擇性，特別是在小體積PLT存在時標(biāo)記相對更為精確。我們以三種檢測方法在對低值PLT樣本的結(jié)果分組比較后發(fā)現(xiàn)，儀器三種方法的結(jié)果與手工法比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這可能因為在絕大多數(shù)的臨床樣本中，有小紅細胞和紅細胞碎片干擾的現(xiàn)象是少見的，低值PLT樣本中絕大多數(shù)病例的PLT的體積是正常的。

焦瑞寶等[2]研究中以Sysmex XT-2000i型血液分析儀為檢測儀器，將PLT值按照PLT-I法和PLT-O法結(jié)果誤差以10%為劃分線分群，再按高、中、低、極低值分組比較PLT-I法、PLT-O法、手工法結(jié)果的差異，發(fā)現(xiàn)在誤差<10%群中，各組病例的三種方法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這與我們的結(jié)果一致，而在誤差≥10%群中，極低值組和低值組的PLT-I法結(jié)果明顯低于PLT-O法和手工法，中值組和高值組的PLT-I法結(jié)果明顯高于PLT-O法和手工法。更多研究對其它型號血液分析儀與手工法PLT計數(shù)比較中也報道[3-4]：在低值PLT組，PLT-O檢測結(jié)果與顯微鏡計數(shù)法結(jié)果更接近，這與我們的研究結(jié)果一致。我們考慮在儀器上的兩種方法誤差明顯時可能因為低值組存在PLT聚集引起假性減低的情況和高值組可能存在將小紅細胞或紅細胞碎片當(dāng)成PLT的假性增高的情況，PLT-I法無法防止這些誤差的發(fā)生。我們在實踐中的經(jīng)驗證實，手工計數(shù)方法在確保檢驗質(zhì)量的前提下，有著儀器法無法比擬的直觀性，這與一些研究報道[5]相差顯微鏡手工計數(shù)法準(zhǔn)確性、特異性、穩(wěn)定性較好的情況相符。另有研究[6]以紅細胞平均體積(MCV)大小分組觀察后不同范圍PLT值后發(fā)現(xiàn)MCV低于正常組存在小紅細胞干擾PLT-I法檢測引起的PLT假性增高的情況。

我們總結(jié)：在日常的工作中較為簡便有效的檢測模式是初始選擇以PLT-I法為常規(guī)模式進行大批量樣本的檢測，如有PLT減低的病例，可以先觀察PLT體積分布的直方圖上有無分布曲線尾部抬高的情況，如有則說明可能存在小紅細胞、紅細胞碎片或

PLT聚集的干擾，在發(fā)現(xiàn)有PLT發(fā)布曲線異常的情況下，再結(jié)合PLT相關(guān)參數(shù)的觀察中如發(fā)現(xiàn)有PLT平均體積(MPV)低于或高于正常參考范圍或儀器未檢測出MPV值時，可以再用PLT-F法進行復(fù)檢，以提高檢測的準(zhǔn)確度。在相關(guān)性分析中可以發(fā)現(xiàn)，PLT-F法與手工法的相關(guān)性更高，這與方法的染色特性有關(guān)，也與PLT-F法使用的單獨通道中，樣本用量提高至5倍計數(shù)，顆粒計數(shù)更為精確有關(guān)。

綜上所述，XN-3000 全自動血液分析儀的PLT-F法檢測的準(zhǔn)確性相比電阻抗法和PLT-O法更高，在低值PLT樣本中，在有小紅細胞或碎片的干擾情況和PLT體積異常減小的情況下，使用PLT-F法進行復(fù)檢尤為必要。