陸小玲　朱建清　張莉華

【摘要】 目的 評價Xpert MTB/RIF在診斷不典型肺結核中的潛在經(jīng)濟價值和臨床價值。方法 217例疑似結核病患者， 取痰樣本作為實驗材料分別進行肺結核檢測?；颊呤紫纫M行胸部CT掃描， 進行第一輪初診。將痰樣本分別進行對應的處理進行痰涂片抗酸染色檢測和Xpert MTB/RIF檢測， 按性別分別統(tǒng)計檢測結果。結果 通過胸部CT初診的結果為151例活動性肺結核患者， 誤診38例

肺結核， 誤診率為18.9%。在CT檢測結果與活動性肺結核影像學表現(xiàn)一致的男性患者中， 涂片結果和Xpert結果具有高度一致性（陰性和陽性）， 敏感性和特異性都為100.0%。但是影像學表現(xiàn)不一致的男性患者中， 敏感性和特異性分別為85.7%和92.1%。女性患者中， 在影像學特征一致的研究組中， 敏感性為92.9%， 特異性為90.0%， 而在影像學表現(xiàn)不一致的組中， 敏感性和特異性分別為66.7%和80.0%。

結論 Xpert MTB/RIF與其他傳統(tǒng)的診斷方法相比具有快速、準確的特點， 可作為一種準確可靠的手段來檢測不典型肺結核， 尤其是對于女性患者的診斷可提供有價值的輔助判斷。

【關鍵詞】 不典型肺結核；痰涂片抗酸染色；GeneXpert MTB/RIF；診斷準確性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.15.025

Xpert MTB/RIF是一種快速的結核分枝桿菌診斷系統(tǒng)， 同時可以檢測利福平抗藥性[1]。并且這種自動的檢測方法不需要專家團隊或設備先進的實驗室。用Xpert來檢測結核分枝桿菌和利福平的抗藥性， 其敏感性和特異性已經(jīng)在大量患有疑似肺結核抗生素敏感或耐多藥的檢測中得到有效證

實 [2-4]。本研究致力于評價Xpert MTB/RIF在診斷不典型肺結核中的潛在經(jīng)濟價值和臨床價值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2012年3月～2015年12月本院收治的217例疑似結核病患者， 年齡16～78歲， 平均年齡46.5歲， 男157例， 女61例， 均無法確診為活動性肺結核。取每個不典型肺結核患者早上第一口痰， 先用清水漱口， 用力咳出深部的痰， 置于無菌管中作為痰樣本， 每一個痰樣本分別置于2個小無菌管中作為不同實驗方法的實驗樣本， 每個樣本含量要大于1 ml。這些患者出現(xiàn)排痰性咳嗽（>2周）， 夜間盜汗、持續(xù)低燒等臨床癥狀， 成為疑似肺結核患者納入研究。最終所有患者通過B超或CT引導下經(jīng)皮肺穿刺或者病理學檢測確診是否為肺結核。

1. 2 實驗方法

1. 2. 1 影像學檢測 所有患者均進行胸部CT掃描， 通過掃描圖像來判定是否患有肺結核。

1. 2. 2 痰涂片抗酸染色檢測 將痰樣本高壓滅菌后， 自然冷卻。在痰樣本中加入與標本等量的氫氧化鈉-N乙酰半胱氨酸溶液（NaOH-NALC）， 采用振蕩器混勻10 min后， 加入pH=6.8的磷酸鹽緩沖液（PBS）至50 ml， 倒入潔凈的離心試管中， 以3000 r/min 離心10 min， 棄上清液后用pH=6.8的PBS

0.7 ml制備成懸浮液。取底部沉淀物放入載玻片中央， 涂抹成1 cm×2 cm的卵圓形痰膜， 自然干燥， 火焰固定后置于染色架上， 加染色劑浸滿痰膜后， 微火加溫染液染色5～10 min水洗加脫色劑脫色3～5 min至無紅色， 然后水洗自然涼干進行鏡檢。

1. 2. 3 GeneXpert MTB/RIF 檢測[5] 本實驗過程采取雙盲試驗方式。取新鮮的未加工的痰樣本1 ml加入2 ml GeneXpert專用消化液， 震蕩15～30 s， 室溫放置15 min， 用專用無菌吸管吸取2 ml， 處理液轉移至樣本反應盒中， 將反應盒放入GeneXpert儀器的反應艙中進行DNA提取， 聚合酶鏈反應擴增和結果檢測， 2 h后自動判讀結果。

1. 3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率（%）表示。計算GeneXpert MTB/RIF檢測的敏感性和特異性， 定義分別為：敏感性=[真陽性/（真陽性+假陰

性）]×100%；特異性=[真陰性/（真陰性+假陽性）]×100%。

2 結果

217例疑似肺結核患者中， 通過B超或CT引導下經(jīng)皮肺穿刺或者病理學檢測確診共有176例活動性肺結核患者。

2. 1 157例男性疑似肺結核病例實驗結果 在CT檢測結果與活動性肺結核影像學表現(xiàn)一致的男性患者中， 涂片結果和Xpert結果具有高度一致性（陰性和陽性）， 敏感性和特異性都達到了100.0%。但是在CT檢測結果與活動性肺結核影像學表現(xiàn)不一致的男性患者中， 涂片結果和Xpert檢測結果略有差異， 敏感性和特異性分別為85.7%和92.1%。見表1。

2. 2 60例女性疑似肺結核病例實驗結果 女性患者中， 由于樣本量較小， 尤其是在影像學表現(xiàn)不一致的組中， 敏感性和特異性的結果都不太理想， 分別為66.7%和80.0%。而在影像學特征一致的研究組中， 敏感性為92.9%， 特異性為90.0%。見表1。

3 討論

Xpert MTB/RIF檢測法是世界衛(wèi)生組織（WHO）為遏制結核病推行的檢驗方法， 是以半巢式實時定量PCR技術為基礎， 以rpob基因為靶基因， 自動提取DNA后擴增rpob基因的192bp片段進行檢測， 實現(xiàn)同時檢測結核分枝桿菌及利福平耐藥， 該系統(tǒng)封閉性及自動化程度高， 技術人員僅需將處理好樣本加入反應孔內， 系統(tǒng)可自動完成標本純化、離心、DNA提取、DNA特異序列檢測， 自動讀出結果， 且敏感度、特異度高， 為WHO推薦的結核分枝桿菌檢測方法[5]。并對鑒別診斷肺結核和非結核分枝桿菌肺病有較高的準確性[6]。從數(shù)據(jù)中可以看出Xpert MTB/RIF檢測結果與肺結核確診結果一致性很高。同時不論是痰涂片染色檢測還是Xpert檢測， 對于男性的診斷正確性都高于女性， 并且男性患者要多于女性患者， 因此， 對于女性患者的診斷就更應當引起足夠的重視， 應盡量避免由于漏診或誤診造成的肺結核病變或死亡的發(fā)生。有大量文獻證明痰Xpert MTB/RIF檢查在涂陰肺結核診斷中具有快速、敏感性及特異性高的優(yōu)點。WHO建議加快Xpert MTB/RIF檢測技術作為一種全新的結核病快速診斷新工具的使用， 有助于結核病患者較早的得到準確地診斷、充分的治療和患者管理。

參考文獻

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[3] 張治國， 歐喜超， 孫倩， 等. 利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增技術檢測痰標本中結核分枝桿菌及其耐藥性的研究. 中國防癆雜志， 2013， 35（1）：13-16.

[4] 夏輝， 趙雁林. Xpert MTB/RIF在我國的應用前景. 實用醫(yī)藥雜志. 2013， 29（23）：3799-3800.

[5] 宋世森. 利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測技術檢測菌株和痰標本的結果分析. 結核病與肺部健康雜志， 2014（2）：75.

[6] 譚英征， 李遠， 龍云鑄， 等. Xpert MTB/RIF檢測在肺結核和非結核分枝桿菌肺病中的鑒別診斷價值. 實用臨床醫(yī)藥雜志， 2016（7）：20.

[收稿日期：2018-01-09]