郝金奇，計(jì)晶晶，陸改玲，余艷琴，陳 霞

(內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014060)

He-Ne激光結(jié)合丹參對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型大鼠治療的研究

郝金奇，計(jì)晶晶，陸改玲，余艷琴，陳 霞*

(內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014060)

研究He-Ne激光結(jié)合丹參對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的治療效果，以期為臨床風(fēng)濕病治療提供參考依據(jù)。將40只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5組，分別是A空白對(duì)照組、B模型組、C激光治療組、D丹參治療組和E丹參結(jié)合激光治療組。除A空白對(duì)照組外，通過對(duì)其余各組大鼠注射雞Ⅱ型膠原誘導(dǎo)后，成功建立了大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型，分別給予對(duì)應(yīng)的治療，并分析各處理組大鼠大體情況、關(guān)節(jié)的腫脹度、評(píng)分及足踝關(guān)節(jié)X光片。研究表明：①與對(duì)照組相比，各處理組的大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分、腳掌厚度均不同程度升高且有顯著差異，其中模型組的最高，丹參結(jié)合激光治療組最低，其余兩組均降低且無顯著差異；②X片顯示：模型組大鼠關(guān)節(jié)出現(xiàn)了嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解、關(guān)節(jié)面融合，關(guān)節(jié)間隙變窄，關(guān)節(jié)基本損毀；丹參結(jié)合激光組可顯著保留關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)并使其免受侵蝕，而其余兩組效果比丹參結(jié)合激光組稍弱一些。③與對(duì)照組相比，各處理組類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子均升高，且有顯著差異；與模型組相比，各藥物組大鼠類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子均有所降低，且均具有顯著差異(P<0.05)，其中下降最明顯的是He-Ne激光結(jié)合丹參治療組。表明He-Ne激光結(jié)合丹參，能有效控制和改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的病情發(fā)展，具有良好的治療效果。

丹參；He-Ne激光穴位照射；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；治療效果;大鼠

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthrtis，RA)是一種慢性、以關(guān)節(jié)滑膜慢性炎癥病變?yōu)橹鞯南到y(tǒng)性、異質(zhì)性疾病。在風(fēng)濕病中危害最大且最難治愈[1-3]。目前治療風(fēng)濕病的常用西藥有免疫抑制劑、非甾抗炎藥、激素等[4]，對(duì)胃、肝、腎損傷很大，且不能治本。而常用中藥如雷公藤，青風(fēng)藤也有副作用[5-7]。因此，尋找安全、高效的創(chuàng)新療法成為該領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。風(fēng)濕病屬中醫(yī)“痹癥”，正如清代王清任的《醫(yī)林改錯(cuò)》中所說“痹證有瘀血”。明朝李中梓《醫(yī)宗必讀卷十·痹》書中提到“治風(fēng)先治血，血行風(fēng)自滅”，因?yàn)榈⒕哂幸种蒲“屦じ?、涼血消癰、活血生經(jīng)、降低血黏度、消腫止痛、祛瘀生新、改善微循環(huán)等獨(dú)特的藥理功效，所以應(yīng)該成為治痹之要藥。激光對(duì)組織有生物效應(yīng)，同時(shí)具有增強(qiáng)新陳代謝、消除腫脹、炎癥、鎮(zhèn)痛、改善血液流變學(xué)和微循環(huán)，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能[8-12]等功能，在治療風(fēng)濕病方面也有報(bào)道[13-17]?？梢?，激光結(jié)合丹參在風(fēng)濕病治療中前景廣闊。本文通過對(duì)健康大鼠注射雞Ⅱ型膠原誘導(dǎo)后，成功建立了大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的模型，并在此模型基礎(chǔ)上觀察、評(píng)價(jià)He-Ne激光結(jié)合丹參對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的治療效果，以期為臨床風(fēng)濕病的治療提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)健康雄性Wistar大鼠40只，內(nèi)蒙古大學(xué)動(dòng)物中心提供，編號(hào)為Scxk(蒙)2016-0001，8周齡～10周齡，體重180 g～200 g。所有大鼠飼養(yǎng)環(huán)境條件均一，溫度25℃，自然光照，環(huán)境清潔，標(biāo)準(zhǔn)顆粒鼠糧喂養(yǎng)，水分充足，隨機(jī)分籠，自由活動(dòng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，進(jìn)行試驗(yàn)，所有Wistar大鼠試驗(yàn)的方法、檢測(cè)均得到倫理委員會(huì)的認(rèn)可。隨機(jī)分為A空白對(duì)照組、 B模型組、C激光治療組、D丹參治療組、E丹參結(jié)合激光治療組。

1.1.2 主要試劑和設(shè)備 注射用青霉素鈉、丹參注射液、生理鹽水和戊巴比妥鈉粉劑，哈藥集團(tuán)制藥總廠產(chǎn)品；冰醋酸，臺(tái)山市新寧制藥有限公司產(chǎn)品；100 g/L多聚甲醛，天津市天大化工實(shí)驗(yàn)廠產(chǎn)品；完全弗氏佐劑(CFA)、雞Ⅱ型膠原(CⅡ)、大鼠類風(fēng)濕因子、大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、α腫瘤壞死因子試劑盒，美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品； FSH-2型高速勻漿機(jī)，江蘇省環(huán)宇科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；D7000型尼康單反相機(jī)，日本尼康公司產(chǎn)品；測(cè)量精度為0.02 mm的不銹鋼游標(biāo)卡尺，上海力衡儀器儀表有限公司產(chǎn)品；X線拍片機(jī)；HJ-1B型氦氖激光照射儀，南京激光儀器廠產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物試驗(yàn) 所有大鼠都通過腹腔注射10 g/L的戊巴比妥鈉溶液進(jìn)行麻醉，按照40 mg/kg體重。將冰醋酸0.05 mL加入到100 mL去離子水中，形成混合溶液a；取一定體積的a溶液加入一定質(zhì)量的雞Ⅱ型膠原得到2 mg/mL的混合溶液b；取一定體積的b溶液再加入相同體積的完全弗氏佐劑在冰浴條件下用高速勻漿機(jī)充分混合，制成混合乳劑c，于4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。于每只大鼠皮膚、腳掌、尾部，5點(diǎn)皮內(nèi)注射混合乳劑c(0.3 mL)進(jìn)行類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎造模，并用雙氧水、無菌生理鹽水沖洗注射針口處，再用碘伏消毒，空白對(duì)照組腹腔注射生理鹽水。每只大鼠腹腔每日注射1次青霉素鈉(每只每次30萬單位)預(yù)防感染，連續(xù)注射3 d。在試驗(yàn)第7天進(jìn)行第2次類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎造模，操作同上。

1.2.2 試驗(yàn)分組及藥物治療方案 把40只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只。A空白對(duì)照組：腹腔注射生理鹽水來代替造模的誘導(dǎo)乳劑，不給予治療。B模型組：造模成功后，不給予治療；C激光治療組：造模成功后，采用He-Ne激光隔日足三里穴位照射1次，照射時(shí)間為30 min；D丹參治療組：造模成功后，給予0.8 mg/kg丹參腹腔注射治療，隔天1次；E丹參結(jié)合激光治療組：造模成功后，給予0.8 mg/kg丹參腹腔注射治療，隔天1次，并且采用He-Ne激光隔日足三里穴位照射1次，照射時(shí)間為30 min。

1.2.3 He-Ne激光穴位照射 采用He-Ne激光(波長(zhǎng)是632.8 nm)隔日進(jìn)行穴位照射，光斑直徑約4 mm，輸出功率為1.2 mW～1.5 mW，用大鼠固定器固定大鼠，每次照射足三里30 min。足三里在膝關(guān)節(jié)后外側(cè)，在腓骨小頭下約5 mm處[18-19]。

1.2.4 后足評(píng)分方法 觀察并記錄各組大鼠的后足情況并量化評(píng)分(根據(jù)大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分標(biāo)準(zhǔn))。先算出每只大鼠后足評(píng)分的平均值，再算出每組大鼠后足評(píng)分的平均值(根據(jù)每只大鼠的評(píng)分)，并在第7、14、21、28、35天各記錄1次，一直到試驗(yàn)結(jié)束。

1.2.5 腳掌厚度測(cè)量方法 記錄并觀察各組大鼠后足軟組織的腫脹情況，并用游標(biāo)卡尺測(cè)量大鼠的腳掌厚度(兩后足)，用大鼠足部軟組織相對(duì)最薄處代表腳掌厚度；后求出每只大鼠腳掌厚度的平均值，再算出每組大鼠腳掌厚度的平均值(根據(jù)每只大鼠腳掌厚度的平均值)，并在第7、14、21、28、35天各記錄1次，一直到試驗(yàn)結(jié)束。

1.2.6 Elase法檢測(cè)細(xì)胞因子的表達(dá) 于試驗(yàn)第35日，處死各組大鼠取血，每只大鼠從腹主動(dòng)脈取全血5 mL，將血液放入離心管內(nèi)，待血液凝固，放入高速離心機(jī)，3 000r/min高速離心10 min取樣，用移液槍吸取上層血清，吸取血清至新離心管內(nèi)的標(biāo)本隨即封凍于-80℃冰柜中待檢。嚴(yán)格按照說明書操作，檢測(cè)各組大鼠血清中類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子的含量水平。

1.2.7 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 大鼠的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分,后足無關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)；1分,后足1個(gè)～2個(gè)關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織腫脹；2分，后足3個(gè)～4個(gè)關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織腫脹；3分，后足5個(gè)或多于5個(gè)關(guān)節(jié)發(fā)紅，軟組織腫脹；4分，后足嚴(yán)重關(guān)節(jié)炎。

2 結(jié)果

2.1 不同處理組大鼠外觀形態(tài)

對(duì)各組大鼠的后足、踝關(guān)節(jié)進(jìn)行觀察，觀察皮膚色澤、后足行動(dòng)、感染狀況、踝關(guān)節(jié)腫脹情況，進(jìn)行描述說明并拍照(圖1)。A空白組大鼠腳掌正常，無紅腫等；B模型組大鼠的腳掌普遍皮膚發(fā)紅、皮膚的溫度較高、關(guān)節(jié)強(qiáng)直、明顯軟組織腫脹、不能負(fù)重，少數(shù)大鼠的足部出現(xiàn)潰瘍和紅斑，行動(dòng)能力明顯受限；C激光治療組、D丹參治療組和E丹參結(jié)合激光組大鼠較B模型組大鼠整體有所改善，但仍然出現(xiàn)后足皮膚發(fā)紅、皮膚溫度高、行動(dòng)能力受限、關(guān)節(jié)紅腫等癥狀；E丹參結(jié)合激光組較模型組和其他治療組大鼠癥狀明顯好轉(zhuǎn)，行動(dòng)自如。

2.2 不同處理組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分、腳掌厚度

2.2.1 不同處理組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分 結(jié)果證實(shí)，A空白對(duì)照組的后足形態(tài)完全正常，評(píng)分記為0分；B模型組大鼠的腳掌關(guān)節(jié)發(fā)紅、軟組織腫脹嚴(yán)重，且在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎造模之后的第14天左右腫脹程度最大，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)腫脹程度稍有降低，到試驗(yàn)結(jié)束時(shí)本組大鼠的腳掌評(píng)分在各組中最高；而各治療組的大鼠與空白組大鼠相比，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分均降低，且具有顯著差異(P<0.05)；與模型組大鼠相比，各治療組大鼠的腳掌評(píng)分均降低，且都具有顯著差異(P<0.05)。其中下降最明顯的是E丹參結(jié)合激光治療組且具有顯著差異(P<0.05)(表1)。

A.空白對(duì)照組;B.模型組;C.激光治療組;D.丹參治療組;E.丹參結(jié)合激光組

A.Blank control group;B.Model group;C.Laser group;D.Salviamiltiorrhizagroup;E.Laser combined withSalviamiltiorrhizagroup

圖1不同處理組大鼠后足外觀形態(tài)

Fig.1 Hindfeet morphology of rats in different treatment groups

表1 不同處理組評(píng)分變化情況分析

2.2.2 不同處理組大鼠的腳掌厚度 結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組大鼠相比，各處理組大鼠的腳掌厚度呈明顯持續(xù)上升狀態(tài)，且有顯著差異(P<0.05)，其中模型組大鼠雙后足掌厚度最嚴(yán)重的程度；與模型組相比，各治療組大鼠的腳掌厚度均降低且具有顯著差異(P<0.05)；其中E丹參結(jié)合激光治療組下降最明顯，且具有顯著差異(P<0.05)(表2)。

2.3 不同處理組大鼠后足踝關(guān)節(jié)X光片

在試驗(yàn)第35天處死所有大鼠進(jìn)行取材，手術(shù)方法是取下各組大鼠的整體脛骨下段以及足部，并且立即標(biāo)注每一個(gè)標(biāo)本。同時(shí)取后足踝關(guān)節(jié)進(jìn)行X光片的拍攝，觀察各組大鼠的后足軟組織腫脹程度、關(guān)節(jié)面結(jié)構(gòu)和間隙的清晰程度以及關(guān)節(jié)的破壞程度(圖2)。X片示結(jié)果顯示，各組大鼠的掌指關(guān)節(jié)有明顯差異，其中A空白對(duì)照組關(guān)節(jié)面光滑，上下關(guān)節(jié)面結(jié)構(gòu)清晰，關(guān)節(jié)完整，骨質(zhì)未出現(xiàn)破壞現(xiàn)象，關(guān)節(jié)間隙正常，軟組織無腫脹；B模型組出現(xiàn)軟組織腫脹，關(guān)節(jié)面融合，關(guān)節(jié)間隙變窄及消失，結(jié)構(gòu)不清晰，出現(xiàn)了嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解現(xiàn)象，關(guān)節(jié)已經(jīng)基本損毀；C激光治療組和D丹參治療組大鼠出現(xiàn)了關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞，骨質(zhì)吸收、溶解，但損壞程度較B模型組有所降低，未出現(xiàn)明顯的軟組織腫脹表現(xiàn)；E丹參結(jié)合激光組無軟組織腫脹的表現(xiàn)，可顯著地保留關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)。可見通過丹參結(jié)合激光治療可使關(guān)節(jié)免受侵蝕。

表2 不同處理組腳掌厚度變化情況分析

A.空白對(duì)照組;B.模型組;C.激光治療組;D.丹參治療組;E.丹參結(jié)合激光組

A.Blank control group;B.Model group;C.Laser group;D.Salviamiltiorrhizagroup;E.Laser combined withSalviamiltiorrhizagroup

圖2大鼠后足踝關(guān)節(jié)X線片結(jié)果

Fig.2 Rat ankle joint X-ray results

2.4 不同處理組大鼠類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子的比較

與對(duì)照組相比，各處理組大鼠類風(fēng)濕因子(rheumatoid factor,RF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor α，TNF-α)增高，且有顯著差異(P<0.05)；其中模型組上升最明顯，與模型組大鼠相比，各治療組大鼠的RF、VEGF及TNF-α增高均有所降低，且都具有顯著差異(P<0.05)；其中下降最明顯的是E丹參結(jié)合激光治療組且具有顯著差異(P<0.05)(表3)。

表3 不同治療組大鼠類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子比較

3 討論

3.1 不同處理組大鼠外觀形態(tài)分析

本研究通過對(duì)健康大鼠注射雞Ⅱ型膠原誘導(dǎo)后，除空白對(duì)照組大鼠腳掌正常，其他大鼠的外觀形態(tài)有顯著的變化。模型組大鼠普遍腳掌皮膚發(fā)紅、溫度高，出現(xiàn)了明顯的軟組織腫脹且伴有關(guān)節(jié)強(qiáng)直、不能負(fù)重的癥狀，而且少數(shù)大鼠足部出現(xiàn)了潰瘍和紅斑，行動(dòng)受限。以上結(jié)果說明成功建立了大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的模型。激光治療組和丹參治療組的大鼠較模型組的大鼠整體有所改善，分析可能原因是激光對(duì)組織有生物效應(yīng)，激光直接照射或間接照射具有增強(qiáng)新陳代謝、消炎止痛、消除腫脹、還可以支配疼痛部位的交感神經(jīng)節(jié)引起血流增加，促進(jìn)致痛物質(zhì)代謝，進(jìn)而能夠緩解疼痛；而丹參具有抑制血小板黏附、聚集和釋放的作用，丹參可以改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎造成的關(guān)節(jié)傷害，因而可促使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的恢復(fù)[20]。而丹參結(jié)合激光治療組大鼠皮溫明顯降低，關(guān)節(jié)腫脹明顯好轉(zhuǎn)，行動(dòng)自如，這與王靜平[21]研究結(jié)果一致，表明丹參結(jié)合激光照射可以改善局部血液循環(huán)，抑制或降低炎癥致痛作用。所以可見丹參藥物治療結(jié)合適當(dāng)?shù)募す庹丈渲委熆梢允勾笫蟮念愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的癥狀得到顯著的改善，是治療風(fēng)濕病安全有效的方法。

3.2 不同處理組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分、腳掌厚度

空白組大鼠后足外觀形態(tài)完全正常，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分和腳掌厚度都是正常水平；各處理組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分和腳掌厚度呈持續(xù)的上升狀態(tài)，其中模型組大鼠雙后足類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分、腳掌厚度最高；說明類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎可以對(duì)大鼠關(guān)節(jié)造成一定程度的傷害。與模型組大鼠相比，C組、D組和E組大鼠的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分、腳掌厚度均有所降低，且都具有顯著差異(P<0.05)；因?yàn)榧す鈱?duì)組織有生物效應(yīng)，同時(shí)具有增強(qiáng)新陳代謝、消除腫脹、消炎止痛、改善血液流變學(xué)和微循環(huán)等作用，被廣泛應(yīng)用于臨床治療中，在治療風(fēng)濕病方面也有報(bào)道[22]。埃默里大學(xué)的風(fēng)濕病學(xué)家對(duì)一組類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人進(jìn)行激光治療后，患者雙手功能有明顯改善。丹參具有涼血消癰、活血生經(jīng)、消腫止痛、祛瘀生新等功能，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，丹參還能降低血黏度、抑制血小板黏附、改善血液的微循環(huán)，可以減少氧自由基的產(chǎn)生，提高組織缺氧的耐受性，所以丹參能夠促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎恢復(fù)。其中下降最明顯的是E丹參結(jié)合激光治療組，與崔淑蓮等[16]用激光治療風(fēng)濕痛結(jié)果一致，可見丹參結(jié)合激光可以顯著緩解類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠腳掌的腫脹程度，改善腳掌的評(píng)分?？梢娂す庹丈浣Y(jié)合丹參藥物治療風(fēng)濕病能有顯著的療效。

3.3 大鼠后足踝關(guān)節(jié)X線片檢查分析

X片研究結(jié)果證實(shí)，模型組大鼠和空白對(duì)照組大鼠的掌指關(guān)節(jié)對(duì)比發(fā)現(xiàn)了明顯的軟組織腫脹，嚴(yán)重的骨質(zhì)吸收、溶解現(xiàn)象，掌指關(guān)節(jié)已基本損毀；由X片表明B組大鼠出現(xiàn)了類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的典型表現(xiàn)，進(jìn)一步說明造模成功。C組和D組大鼠通過治療關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)破壞程度和骨質(zhì)吸收現(xiàn)象以及軟組織腫脹表現(xiàn)均較B組有所降低；可見經(jīng)激光、丹參單獨(dú)治療后可顯著保留關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)并使其免受侵蝕；因?yàn)榧す饩哂性鰪?qiáng)新陳代謝、消除腫脹、消炎止痛、等作用；丹參具有涼血消癰、活血生經(jīng)、消腫止痛、祛瘀生新等功能，可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎得到改善。而E組的關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)清晰未受侵蝕且只有輕微的軟組織腫脹表現(xiàn)。說明通過丹參結(jié)合激光治療可以降低Wistar大鼠的軟骨及骨破壞程度與范圍和關(guān)節(jié)的損毀程度，能夠有效的抑制病變周圍組織的纖維組織增生和炎癥反應(yīng)。表明了丹參結(jié)合激光照射治療可以抑制大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)的炎癥發(fā)展，同時(shí)可以保護(hù)關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)。

3.4 大鼠類風(fēng)濕因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及腫瘤壞死因子的分析

目前類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)臨床診斷的主要依據(jù)是臨床表現(xiàn)、X射線光片和血清指標(biāo)的類風(fēng)濕因子(RF)。但因?yàn)镽F不僅只見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者，在其他免疫性疾病患者的血清中RF也出現(xiàn)陽性表達(dá)，因此單獨(dú)的RF陽性也不足以確診為RA，而RA病情的高度易變性和病程的不可預(yù)知性要求診斷指標(biāo)的敏感性和特異性更高。目前研究表明，類風(fēng)濕因子(RF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)和腫瘤壞死因子(TNF-α)均參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病過程，所以本試驗(yàn)對(duì)RF、VEGF及TNF-α進(jìn)行分析。

RF是在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的血清中發(fā)現(xiàn)，主要存在于患者的血清和關(guān)節(jié)液中，是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎臨床診斷的標(biāo)準(zhǔn)。VEGF是具有高度生物活性的一種糖蛋白，上調(diào)的VEGF，通過其受體特異性作用于血管內(nèi)皮的細(xì)胞，促進(jìn)血管內(nèi)皮增生，從而促進(jìn)新生血管和血管翳的形成，而新生血管的生成是RA發(fā)生和發(fā)展的關(guān)鍵步驟，已有研究證實(shí)，血清VEGF與關(guān)節(jié)病變程度和關(guān)節(jié)受累的范圍呈正相關(guān)，所以血清 VEGF水平可以作為判斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情和預(yù)后的重要指標(biāo)。此外，VEGF還能明顯提高血管的通透性，促進(jìn)炎癥的形成和發(fā)展，尤其對(duì)慢性炎癥的形成具有重要意義。因此，降低異常升高的血清VEGF水平，可以有效抑制滑膜血管增生及滑膜炎的發(fā)展。TNF-α是一種重要的促炎細(xì)胞因子，能上調(diào)單核巨噬細(xì)胞MMP-9的表達(dá)與活化，加強(qiáng)炎癥細(xì)胞的侵蝕力，促進(jìn)RA關(guān)節(jié)破壞，在RA致病過程中起到了重要作用。所以抑制TNF-α等促炎細(xì)胞因子，是治療風(fēng)濕病的重要途徑。研究表明，與A組相比B組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及TNF-α增高且有顯著差異(P<0.05)；與B組大鼠相比，各治療組大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及TNF-α均有所降低，且均具有顯著差異，其中下降最為明顯的是E丹參結(jié)合激光治療組且有顯著差異?？梢?激光穴位照射結(jié)合丹參能夠降低類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型組大鼠的類風(fēng)濕因子(RF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)和腫瘤壞死因子(TNF-α)的水平，而且療效優(yōu)于其他治療組，對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠有較好的療效。

綜上所述，丹參結(jié)合激光穴位照射能夠有效的減輕類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的外觀形態(tài)，緩解炎癥關(guān)節(jié)的腫脹程度，降低大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎評(píng)分；同時(shí)從X片證實(shí)了丹參結(jié)合激光穴位照射治療，可以保護(hù)關(guān)節(jié)免受侵蝕，消除軟組織腫脹，具有顯著治療作用，還可以對(duì)各處理組大鼠的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎因子、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、腫瘤壞死因子具有重要調(diào)節(jié)作用，說明丹參結(jié)合激光穴位照射對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎具有一定治療作用，可以為臨床治療及用藥提供科學(xué)依據(jù)。本試驗(yàn)尚有不足及疏漏，丹參結(jié)合激光的治療機(jī)制有待進(jìn)一步研究，并需更深層次的探討。

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StudyonHe-NeLaserCombinedwithSalviamiltiorrhizainTreatmentofRheumatoidArthritisModelRats

HAO Jin-qi， JI Jing-jing，LU Gai-ling，YU Yan-qin，CHEN Xia

(DepartmentofMedicalTechnology,BaotouMedicalCollege,Baotou,InnerMongolia,014060,China)

To study theSalviamiltiorrhizacombined with laser in the treatment of rheumatoid arthritis rat model induced by chicken Ⅱ collagen,to provide the reference for the treatment of rheumatoid arthritis in clinic,forty healthy male Wistar rats were divided into five groups randomiy，A is blank control group，B is model group，C is He-Ne laser acupoint irradiation treatment group，D isSalviamiltiorrhizatreatment group,E is He-Ne laser combined withSalviamiltiorrhizatreatment group.Except the blank control group,the rats in the other groups were injected with the chicken Ⅱ collagen to induce rat rheumatoid arthritis model.The general situation,ankle swelling degree,X slices were measured and the scores of rats were judged.The results showed that:①The score of rat rheumatoid arthritis and measurement of foot sole thickness:comparing with the blank control group,the score and thickness of the feet in model group of rheumatoid arthritis rats were highest, but the theSalviamiltiorrhizacombined with laser were lowest,the anther two groups were declined but no statistically difference;②X slices hows:it was showed severe soft tissue swelling and bone absorption in model group.It was prevented erosion inSalviamiltiorrhizawith laser group,and which was weaker inSalviamiltiorrhizalow and high dose groups.③Compared with the blank group,the RF，VEGF and TNF-α in the rats of each drug group were all increased in medicine group and the difference was statistically significant.Compared with the model group,the increases of RF，VEGF and TNF-α in the rats of each drug group were all decreased and the difference was statistically significant，Among them,the most obvious decline was He-Ne laser combined withSalviamiltiorrhizatreatment group.Salviamiltiorrhizacombined with laser can effectively control the progress of rheumatoid arthritis in rats,and has the therapeutic effect.Keywords:Salviamiltiorrhiza；He-Ne laser acupoint irradiation；rheumatoid arthritis；treatment effect;rat

2017-01-17

包頭市醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目(Wsjj2014014)

郝金奇(1980-)，男，山東菏澤人，講師，碩士，主要從事流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)研究。*

S854.54;S857.165

:A

:1007-5038(2017)09-0043-06