童秋廷

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局 山東 濱州 256500）

禽鼻氣管炎是由于禽類（包括家禽和野禽等）感染禽鼻氣管鳥桿菌（Omithobacterium rhinotracheale，ORT）而引起的一種新型接觸性呼吸道傳染病。該病的主要臨床癥狀主要表現(xiàn)為流鼻液、呼吸紊亂等呼吸道癥狀，采食量減少，生長遲緩，肉禽增重減少，蛋雞產(chǎn)蛋量降低，蛋質(zhì)量下降如蛋小及孵化率低等，死淘率高，臨床上剖檢多見氣囊炎、單側(cè)或雙側(cè)纖維素性化膿性肺炎和胸膜炎等，感染發(fā)病的成年禽常有嚴(yán)重病變出現(xiàn)。鼻氣管鳥桿菌可感染不同年齡的火雞、肉雞等家禽，尤以3～4周齡雛雞最為易感，此外該菌還可感染野雞、山雞和鵪鶉等野生禽類。禽鼻氣管鳥桿菌主要通過水平方式傳播，目前禽鼻氣管鳥桿菌感染病例在全世界范圍內(nèi)均有發(fā)生。本病死亡率不高，一般為2%～15%左右，但該病常與其他疾病混合感染，使得發(fā)病雞群死亡率升高，導(dǎo)致養(yǎng)禽業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失巨大。近年來我國多地出現(xiàn)了禽鼻氣管鳥桿菌感染，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，為此加強(qiáng)對禽鼻氣管鳥桿菌感染的預(yù)防和控制工作具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。2016年3月本縣某規(guī)模蛋雞場21日齡雞突然出現(xiàn)流鼻液、咳嗽氣喘、并伴有鼻腔及氣管出血、部分成年蛋雞產(chǎn)蛋量降低、所產(chǎn)蛋皮薄且個頭偏小等臨床癥狀，根據(jù)此次發(fā)病情況、臨床癥狀和剖檢變化，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷，最終確診為禽鼻氣管鳥桿菌感染，現(xiàn)將診治過程及筆者體會介紹如下。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

據(jù)了解發(fā)病雞群已經(jīng)在相應(yīng)的日齡分別接種了新城疫、馬立克氏病、傳染性支氣管炎及傳染性法氏囊等常發(fā)疫病的疫苗。21日齡時個別雞表現(xiàn)精神沉郁、流鼻涕、咳嗽、喘氣及生長減慢甚至停滯等癥狀，嚴(yán)重者則面部水腫、鼻腔堵塞及呼吸困難，發(fā)病死亡，以后逐日增多。發(fā)病后該雞場積極采用常用的抗生素類藥物開展治療，疫情略有控制，但部分病雞仍表現(xiàn)喘氣咳嗽、流涕等臨床癥狀，每天仍有發(fā)病死亡出現(xiàn)，前后共死亡雞134只，死亡率約為15.1%，經(jīng)濟(jì)損失較為嚴(yán)重。

2 病理變化

剖檢了10只瀕死病雞，可見鼻腔和氣管中有帶血的黏液，胸腹腔內(nèi)氣囊混濁，肺臟和脾臟腫大，心包膜斑點(diǎn)狀出血，且心包腔積液混濁。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 細(xì)菌分離及鏡檢

無菌條件下將病雞鼻竇黏液接種于含0.05%輔酶A及5%血清的副雞嗜血桿菌培養(yǎng)平板上，37℃厭氧培養(yǎng)36～48h，同時接種到麥康凱培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)24～36h。結(jié)果含0.05%輔酶A及5%血清的副雞嗜血桿菌培養(yǎng)平板上出現(xiàn)針尖大小、不溶血的灰白色圓形小菌落，并帶有特殊的酸性氣味，而麥康凱培養(yǎng)基上沒有菌落出現(xiàn)。將分離菌株進(jìn)行革蘭氏染色后鏡檢，結(jié)果為革蘭氏陰性多形性短桿菌（見圖1）。

圖1 鏡檢圖片

3.2 PCR鑒定

將純化的分離菌株提取基因組DNA后，應(yīng)用已經(jīng)合成的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增鑒定。PCR擴(kuò)增體系：PCRMix 12.5μL，DNA 0.5μL，上下游引物各 0.5μL，補(bǔ)雙蒸水至總體積25μL。PCR反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性 5min，95℃變性 30s，58℃退火 30s，72℃延伸 30s，進(jìn)行35個循環(huán)，最后72℃延伸10min。擴(kuò)增結(jié)束后將PCR產(chǎn)物進(jìn)行1%的瓊脂糖凝膠電泳鑒定。結(jié)果顯示PCR擴(kuò)增的目的條帶大小與預(yù)期的大小一致（見圖 2）。

3.3 生化反應(yīng)試驗(yàn)

將純化好的分離菌接種禽鼻氣管鳥桿菌細(xì)菌生化反應(yīng)管進(jìn)行鑒定，結(jié)果該菌株能分解葡萄糖、乳糖、果糖、麥芽糖和蔗糖等；過氧化氫酶、脲酶、氧化酶、明膠酶、透明質(zhì)酸酶及甲基紅試驗(yàn)、硝酸鹽還原反應(yīng)結(jié)果均呈陰性；VP、ONPG均為陽性，均符合禽鼻氣管鳥桿菌的生化特性。

3.4 動物回歸試驗(yàn)

取沒有接種過雞鼻氣管炎疫苗的健康雞10只，分成兩組，每組5只，其中一組為對照組，另一組為實(shí)驗(yàn)組，將無菌處理的病料接種于實(shí)驗(yàn)組的每只雞鼻腔內(nèi)，觀察5d。結(jié)果接種病料的實(shí)驗(yàn)組第二天開始出現(xiàn)鼻孔流稀薄黏液、精神沉郁、呼吸困難和面部水腫等臨床癥狀，對照雞沒有任何變化。采集實(shí)驗(yàn)組病雞鼻竇分泌物進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，可見革蘭氏陰性短桿菌。

4 診治

根據(jù)發(fā)病臨床表現(xiàn)、病理剖檢及實(shí)驗(yàn)室檢測，最終確診此次疫情為由禽鼻氣管鳥桿菌引起的雞鼻氣管炎。

確診后及時將雞場內(nèi)病雞進(jìn)行了隔離飼養(yǎng)，并對雞場內(nèi)雞群及環(huán)境用具等進(jìn)行了徹底消毒，1次/d，連續(xù)5d，及時清理舍內(nèi)糞便污水等。同時對雞群開展藥物治療，將頭孢噻肟鈉按照10g：100kg的比例添加到飲水中自由飲用，2次/d，連用5d，此外聯(lián)合強(qiáng)力霉素拌料喂飼；同時在日糧飼料中添加多種維生素，以此消除應(yīng)激及提高機(jī)體免疫力。采取上述措施后第2天雞只呼吸道癥狀明顯減輕，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，第4天除個別雞只有輕微呼吸道癥狀外，其余雞只基本恢復(fù)正常，7天后雞群采食量正常。

5 小結(jié)

由禽鼻氣管鳥桿菌引起的鼻氣管炎是禽類一種新的呼吸道傳染病，目前該病呈全球范圍內(nèi)流行，易感動物種類繁多，尤以禽類最為易感，且在家禽中廣泛存在，造成的經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重。該病的臨床癥狀和禽其他呼吸道細(xì)菌病如禽霍亂、禽大腸、鴨疫和鼻炎等極為相似，因此在臨床診斷時應(yīng)注意鑒別。目前對病原禽鼻氣管鳥桿菌的致病機(jī)理認(rèn)識尚不完善，且禽鼻氣管鳥桿菌對抗生素的敏感性和活疫苗的防治效果也有待進(jìn)一步研究。已研制出禽鼻氣管鳥桿菌滅活疫苗和弱毒疫苗，研究發(fā)現(xiàn)1日齡肉雞接種滅活苗能夠避免同源菌株的氣囊感染，進(jìn)而降低氣囊炎和肺炎的發(fā)病率，同時應(yīng)用自家滅活油乳劑苗也能有效的減少該病的發(fā)生。但當(dāng)前避免禽鼻氣管鳥桿菌感染的根本措施還是應(yīng)該從加強(qiáng)雞場日常飼養(yǎng)管理，改善飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生，執(zhí)行嚴(yán)格的消毒制度等途徑來減少疾病的發(fā)生，同時應(yīng)預(yù)防其他禽呼吸道傳染病的發(fā)生?！?/p>