秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，李 生，王興麗，梁小鳳

鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛對污染乙型肝炎病毒胃鏡的消毒效果比較

秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，李 生，王興麗，梁小鳳

[目的]觀察鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛對乙型肝炎病毒污染的胃鏡消毒效果及消毒時(shí)間比較，為臨床選用合適的內(nèi)鏡消毒液、消毒時(shí)間提供理論依據(jù)。[方法]收集乙型病毒性肝炎病人使用后的胃鏡240套，根據(jù)2004年4月國家衛(wèi)生部頒布的《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》進(jìn)行清洗后，隨機(jī)分為兩組，分別采用鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛浸泡消毒，于清洗前后及消毒后3 min、5 min、10 min進(jìn)行內(nèi)鏡腔內(nèi)采樣，觀察兩種消毒液及其不同消毒時(shí)間的消毒效果。[結(jié)果]應(yīng)用強(qiáng)化戊二醛和應(yīng)用鄰苯二甲醛清洗后、消毒3 min和10 min時(shí)胃鏡內(nèi)腔定性和定量PCR檢測HBV-DNA平均含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);消毒5 min時(shí)兩組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。[結(jié)論]應(yīng)用鄰苯二甲醛消毒乙型肝炎病毒病人使用后的胃鏡，消毒效果優(yōu)于應(yīng)用強(qiáng)化戊二醛消毒。

胃鏡；鄰苯二甲醛；強(qiáng)化戊二醛；乙型病毒性肝炎；乙型肝炎病毒；消毒

近年來，在臨床上消化內(nèi)鏡檢查對于消化道疾病的診斷和治療已在大中小醫(yī)院普遍開展。但其在診斷和治療過程中，不可避免地接觸到病人的體液、血液而受到污染。我國經(jīng)濟(jì)較落后的醫(yī)院內(nèi)鏡數(shù)量嚴(yán)重不足，而需檢查的病人較多，內(nèi)鏡使用過度頻繁，這些因素導(dǎo)致臨床內(nèi)鏡消毒不到位，從而易引發(fā)較為嚴(yán)重的醫(yī)源性感染[1]。而病毒性肝炎是世界上最常見的傳染病之一。據(jù)報(bào)道，全世界感染乙型肝炎病毒(HBV)者約占全球人口的5%，而廣西地區(qū)乙型病毒性肝炎病人數(shù)量據(jù)我國前列[2]。然而國內(nèi)外對胃鏡消毒液的選擇尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。因而探討一種消毒效果好且需時(shí)較短的內(nèi)鏡消毒液非常重要。本研究通過觀察鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛對污染乙型肝炎病毒的胃鏡消毒效果和消毒時(shí)間比較，為臨床選用合適的內(nèi)鏡消毒液、消毒時(shí)間，為有效預(yù)防因內(nèi)鏡消毒不合格而引發(fā)的醫(yī)院感染提供理論依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 資料 2014年4月—2015年5月我院門診及住院已確診的乙型肝炎病毒感染[血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)陽性]病人240例，其中男166例，女74例，年齡61.68歲±3.23歲。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：1周內(nèi)已服用相關(guān)治療本病的藥物；合并其他流行性感染或細(xì)菌、病毒感染，如丙型病毒性肝炎、艾滋病、重度肺炎等；不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，因資料不全影響療效判斷或根本無法判斷療者。以符合納入標(biāo)準(zhǔn)的病人胃鏡檢查后的胃鏡為觀察對象，所有胃鏡按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為觀察組和對照組，每組120套。

1.2 材料及設(shè)備

1.2.1 消毒液 鄰苯二甲醛(原產(chǎn)國英國，上海強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司經(jīng)銷，正-鄰苯二甲醛含量0.55%，其他含量范圍為0.5%～0.6%)。強(qiáng)化戊二醛(2%強(qiáng)化戊二醛，主要成分戊二醛含量為2.0%～2.2%，由茂名市消毒用品有限公司生產(chǎn))。

1.2.2 儀器設(shè)備 邁爾消化內(nèi)鏡清洗工作站，日本Olympus260主機(jī)及胃鏡，Lighteyeler熒光定量PeR儀，HeraeusBgerrese超速離心機(jī)，DNA擴(kuò)增儀，F(xiàn)D201穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀。乙型肝炎病毒核酸陽性血清由本院胃鏡室聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室提供，含量達(dá)到106IU/mL～107IU/mL。

1.2.3 試劑 ACON HBsAg膠體金法檢測試劑，艾博生物醫(yī)藥(杭州)有限公司生產(chǎn)；PCR反應(yīng)試劑(Taq酶、dNTPs、MgC12、10×Buffer)、TaqDNA聚合酶(測序級，美國Promega公司產(chǎn)品)、DEPC為美國Sigma公司產(chǎn)品。

1.3 清洗與消毒 為確保試驗(yàn)前的胃鏡為無病毒污染，在每次檢查前均按2004年4月國家衛(wèi)生部頒布的《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》要求，先用2%強(qiáng)化戊二醛消毒胃鏡20 min，然后采集標(biāo)本并檢測，結(jié)果為陰性。兩組消化內(nèi)鏡使用后均按《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》(2004版)要求，嚴(yán)格按以下流程處理:床側(cè)清洗→初洗→酶洗→次洗→消毒→終洗→干燥，兩組酶洗均使用內(nèi)鏡專用RUHOF全效型多酶。觀察組采用鄰苯二甲醛溶液消毒，對照組采用強(qiáng)化戊二醛溶液浸泡消毒。對乙型肝炎病毒感染病人行胃鏡檢查后，對胃鏡清洗后進(jìn)行分組消毒，時(shí)間設(shè)置為3 min、5 min、10 min。

1.4 標(biāo)本采集 分別于清洗前、清洗后及消毒后3 min、5 min、10 min進(jìn)行內(nèi)鏡腔內(nèi)采樣。用5 mL生理鹽水(清洗前、清洗后)或相應(yīng)中和劑(消毒后)注入胃鏡活檢孔道，用無菌試管在胃鏡前端收集內(nèi)腔沖洗液，2 h內(nèi)送檢。

1.5 標(biāo)本檢測 PCR定性、定量檢測由臨床檢驗(yàn)技師完成。

1.5.1 HBsAg檢測 用于胃鏡檢查前檢測。用膠體金免疫層析分析技術(shù)進(jìn)行，按說明書操作。

1.5.2 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)PCR定性檢測 按HBV-DNA基因組P區(qū)基因序列，選2599bp-2877bp區(qū)域設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR。引物1:5’-GTGGGCCCTCTCACTG-TAAA-3’，引物2:5’-GTTTTGATGACCAACCTC-3’，擴(kuò)增長度：278 bp。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，紫外線燈下觀察結(jié)果，與陽性對照處同一水平有擴(kuò)增帶者為陽性，每次PCR檢測時(shí)均設(shè)有陰性對照。

1.5.3 HBV-DNA熒光定量PCR

1.5.3.1 HBV PCR反應(yīng)液 PCR Buffer 18 μL、Taq酶1U、Ung酶0.05 μL混勻。

1.5.3.2 加樣 將上述配制好的反應(yīng)液18 μL和已提取好的模板2 μL加入毛細(xì)反應(yīng)管3 000 r/min離心5s混勻，再排入Lightcycler熒光定量 PCR儀內(nèi)擴(kuò)增。

1.5.3.3 檢測 擴(kuò)增程序?yàn)?7 ℃ 3 min，使Ung充分反應(yīng)，92 ℃ 1 min變性，然后60 ℃、20 s，40個(gè)循環(huán)。在60 ℃時(shí)熒光收集方式為“single”，儀器檢測通道選擇Fl/F2。結(jié)果由PCR儀自帶分析軟件確定標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本的HBV-DNA含量。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布者采用t檢驗(yàn)分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有數(shù)據(jù)均通過SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

2.1 定性PCR檢測HBV-DNA平均含量(見表1)

表1 定性PCR檢測胃鏡內(nèi)腔HBV-DNA平均含量比較 IU/mL

2.2 熒光定量PCR檢測HBV-DNA平均含量(見表2)

表2 熒光定量PCR檢測胃鏡內(nèi)腔HBV-DNA平均含量比較 IU/mL

3 討論

近年來，消化內(nèi)鏡微創(chuàng)技術(shù)迅速發(fā)展，普通的內(nèi)鏡檢查和診斷在臨床廣泛應(yīng)用。由于內(nèi)鏡結(jié)構(gòu)復(fù)雜，精密度高，材質(zhì)特殊，不耐高溫，使用后徹底的清洗消毒一直是臨床上的一大難題，是醫(yī)院感染控制部門關(guān)注的重點(diǎn)。同時(shí)由于內(nèi)鏡費(fèi)用較貴，國內(nèi)大部分醫(yī)院不可能配置更多的內(nèi)鏡，故在二三線城市的醫(yī)院普遍存在內(nèi)鏡少、需求量大，致使內(nèi)鏡使用頻繁，導(dǎo)致由于消毒時(shí)間倉促導(dǎo)致消毒不徹底、干燥時(shí)間短等情況。2006年調(diào)查表明，我國一般人群HBsAg陽性者為7.18%，其中廣西高達(dá)12%[3],嚴(yán)重危害病人健康。而胃鏡檢查的人中常出現(xiàn)HBsAg陽性的病人，如消毒不夠徹底極可能造成交叉感染而引發(fā)肝炎傳播。故加強(qiáng)對內(nèi)鏡的消毒與管理在預(yù)防控制醫(yī)院感染工作中顯得尤為重要[4]。

目前,國內(nèi)外對胃鏡消毒液的選擇和消毒時(shí)間尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。按2004年版《內(nèi)鏡清洗消毒技術(shù)操作規(guī)范》，如采用2%堿性戊二醛浸泡，消毒時(shí)間不少于20 min，沖洗和干燥后才可用于病人診療。如按上述要求醫(yī)院應(yīng)配備足夠周轉(zhuǎn)的內(nèi)鏡數(shù)量，方能滿足良好的消毒效果。為此，尋求一種消毒效果好、需時(shí)較短的內(nèi)鏡消毒液以提高內(nèi)鏡清洗消毒效率，滿足臨床所需尤為關(guān)鍵。本研究結(jié)果顯示：通過定性和定量PCR檢測HBV-DNA平均含量，采用鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛消毒比較，清洗前和清洗后、消毒3 min和10 min時(shí)HBV-DNA平均含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);而消毒5 min時(shí)兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。此結(jié)果與國內(nèi)外類似研究報(bào)道相一致[5]，說明采用此兩種消毒液消毒效果均安全可靠，但采用鄰苯二甲醛消毒時(shí)間上具有優(yōu)勢。若能將二者消毒液共同合理的使用將滿足廣大病人的需求，還能很大程度上提高消毒內(nèi)鏡的工作效能。

[1] 榮秋華,張瑩.消化內(nèi)鏡清洗消毒過程中存在的問題與對策[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(16):3597 -3599.

[2] 宋向陽,李武平,馬春麗,等.三種消毒劑對胃鏡污染乙肝病毒去除效果的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國消毒學(xué)雜志,2015,32 (3):232-234.

[3] 莊輝.病毒性肝炎流行病學(xué)研究進(jìn)展[J].中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2010,2(3):1-5.

[4] 周麗華,鄧瓊,陽云超,等.應(yīng)用2%堿性戊二醛與鄰苯二甲醛在消化內(nèi)鏡消毒中的綜合研究[J].四川醫(yī)學(xué),2013,34(8)：1137-1138.

[5] 史瑜媛,鄭美英,張美玲.戊二醛和鄰苯二甲醛胃鏡消毒效果的比較[J].當(dāng)代護(hù)士,2011(12)：91-92.

(本文編輯李亞琴)

Comparison of disinfection effect of phthalaldehyde and fortified glutaraldehyde on hepatitis B virus contaminated contaminated endoscopy

Qin Juanwen,Lu Jiefu,Zheng Chaowei,etal(the First Affiliated Hospital of Guangxi University

of Traditional Chinese Medicine,Guangxi 530023 China)

廣西壯族自治區(qū)教育廳高?？蒲许?xiàng)目，編號：LX2014172。

秦娟文，副主任護(hù)師，本科，單位:530023，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院；盧杰夫、鄭超偉、李生、王興麗、梁小鳳單位：530023，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院。引用信息 秦娟文，盧杰夫，鄭超偉，等.鄰苯二甲醛和強(qiáng)化戊二醛對污染乙型肝炎病毒胃鏡的消毒效果比較[J].護(hù)理研究，2017，31(1)：97-99.

R472.1

B

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.01.026

1009-6493(2017)01-0097-03

2016-03-24；

2016-12-13)