計(jì)敏 王建蔚 藍(lán)顯明 于林芳 蘭春燕

不同亞型腸易激綜合征患者腸道機(jī)械屏障的改變

計(jì)敏 王建蔚 藍(lán)顯明 于林芳 蘭春燕

目的：觀察不同亞型腸易激綜合征（IBS）患者腸黏膜機(jī)械屏障的變化，探討這些改變在IBS發(fā)病中的可能作用和臨床意義。方法：按照羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)選取腹瀉型（IBS-D組）、便秘型（IBS-C組）及混合型（IBS-M組）IBS患者及正常對照組各20例，檢測其結(jié)腸黏膜標(biāo)本及血清D-乳酸、DAO水平，并對比分析。結(jié)果：對照組微絨毛高度、腸腺深度、黏膜厚度均顯著大于各亞型IBS患者（P＜0.01），且不同亞型IBS患者中以IBS-D組上述指標(biāo)減低最為明顯。血清D-乳酸、DAO水平IBS-D組均較其他三組顯著升高（P＜0.01），而IBS-M組DAO水平也較IBS-C組和對照組有著明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論：腸黏膜機(jī)械屏障受損在腹瀉型IBS的發(fā)病中起著更為重要的作用，腸黏膜通透性增高與腹瀉癥狀密切相關(guān)。

腸易激綜合征；亞型；腸黏膜機(jī)械屏障；腹瀉

腸易激綜合征（Irritable Bowel Syndrome，IBS）是一種十分常見的腸道功能紊亂性疾病，在不同亞型、不同群體主要的發(fā)病機(jī)制可能有所不同。已有研究發(fā)現(xiàn)IBS患者腸黏膜屏障功能受損，腸道通透性增加，但對不同亞型IBS患者腸道機(jī)械屏障功能改變的研究未見大量報(bào)道。本研究通過觀察各亞型IBS患者腸道機(jī)械屏障的改變，探討這些改變在IBS發(fā)病中的可能作用和臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料 隨機(jī)抽取2013年1月至2014年12月在我院消化內(nèi)科門診、病房及腸道門診的不同亞型IBS患者共60例，IBS診斷標(biāo)準(zhǔn)按照羅馬Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)［1］，其中腹瀉型（IBS-D組）、便秘型（IBS-C組）及混合型（IBS-M組）各20例，病程1～10年，均經(jīng)生化、內(nèi)鏡、B超、X線、CT等影像學(xué)檢查，排除腸道器質(zhì)性病變、感染性疾病、免疫疾病、其他重大內(nèi)科系統(tǒng)疾病及胃腸道外科手術(shù)史。另隨機(jī)選取我院體檢證實(shí)為健康者20例為對照組。各組的年齡及性別組成經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析無明顯差異（P＞0.05）。

1.2 研究指標(biāo)和方法 所有實(shí)驗(yàn)對象均在結(jié)腸鏡下于結(jié)腸直乙交界處取活檢標(biāo)本2～3塊，立即放入10%中性福爾馬林固定液中固定，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)石蠟包埋，切片（厚6μm），HE染色，常規(guī)光鏡下觀察，用目鏡測微尺隨機(jī)全盲測值。每個(gè)患者取5張不連續(xù)的切片，每張切片順次取奇數(shù)視野測20個(gè)結(jié)腸微絨毛的高度、腸腺深度及結(jié)腸黏膜厚度。所有研究對象分別定量檢測血清D-乳酸和DAO水平。抽取靜脈全血4ml，1000g離心15分鐘后取血清分裝保存，-20℃保存、送檢，避免反復(fù)凍融。D-乳酸和DAO檢測均采用ELISA法，D-乳酸試劑采購自Abnova公司，DAO試劑采購自武漢華美。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0版軟件行方差分析和q檢驗(yàn)，P＜0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 各組結(jié)腸黏膜形態(tài)學(xué)測定值比較 各組結(jié)腸腸壁層次清楚，黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整。IBS患者的結(jié)腸黏膜微絨毛分度不均、長短不一，有微絨毛斷裂現(xiàn)象。相關(guān)形態(tài)學(xué)參數(shù)測值顯示，IBS-C組、IBS-M組和對照組結(jié)腸的微絨毛高度、腸腺深度、黏膜厚度均顯著大于IBS-D組（P＜0.05），而對照組以上形態(tài)學(xué)指標(biāo)測值又顯著大于IBS-C組和IBS-D組（P＜0.05）。見表1。

2.2 各組血清D-乳酸、DAO測定結(jié)果 血清指標(biāo)測定結(jié)果顯示無論是D-乳酸還是DAO，IBS-D組均較其他三組顯著升高（P＜0.05），而IBS-M組DAO水平也較IBS-C組和對照組有著明顯升高（P＜0.05）。見表2。

表2 各組血清D-乳酸、DAO測定結(jié)果

3 討論

腸黏膜屏障包括完整的腸上皮細(xì)胞及其細(xì)胞間連接構(gòu)成的機(jī)械屏障、胃腸相關(guān)淋巴樣組織及分泌的抗體所構(gòu)成的免疫屏障和腸道正常菌群構(gòu)成的生物屏障，在維持腸道菌群穩(wěn)定、防止腸道內(nèi)細(xì)菌及內(nèi)毒素移位過程中起重要作用［2］。在構(gòu)成腸道屏障的各種因素中，最重要的還是腸道上皮機(jī)械屏障。研究腸黏膜機(jī)械屏障的功能與結(jié)構(gòu)，可以提高我們對疾病的病因及病理生理認(rèn)識(shí)，并且對于早期檢測疾病以及對疾病進(jìn)行二級(jí)預(yù)防有重要意義。

IBS是最常見的消化系統(tǒng)疾病之一，其發(fā)病機(jī)制尚不明確，一般認(rèn)為與精神、飲食、遺傳、胃腸道動(dòng)力障礙、腸道菌群失調(diào)等因素有關(guān)。目前，越來越多研究認(rèn)為IBS患者腸黏膜屏障功能障礙、腸道通透性增高與IBS的發(fā)病密切相關(guān)［3］。Spiller等［4］研究發(fā)現(xiàn)，在感染后IBS和腹瀉型的非感染后IBS患者中均可看到明確的腸黏膜通透性增加，提示除炎癥機(jī)制外還有其他機(jī)制導(dǎo)致腸道黏膜通透性增加。Dunlop等［5］運(yùn)用51Cr-EDTA方法發(fā)現(xiàn)感染后IBS患者小腸黏膜通透性較便秘型IBS及對照組明顯增加。腸黏膜形態(tài)學(xué)研究能夠直觀地表現(xiàn)腸道黏膜的損害程度，反映腸道黏膜的機(jī)械屏障功能。我們的研究發(fā)現(xiàn)，IBS患者結(jié)腸黏膜普遍存在微絨毛分布不均、長短不一，有斷裂現(xiàn)象，對照組微絨毛高度、腸腺深度、黏膜厚度均顯著大于各亞型IBS患者（P＜0.05），且不同亞型IBS患者中以IBS-D組上述指標(biāo)減低最為明顯。正常情況下人血清中D-乳酸水平很低，因?yàn)镈-乳酸是細(xì)菌代謝和裂解的產(chǎn)物，人類身體組織即不產(chǎn)生D-乳酸，也不能或僅能緩慢代D-乳酸。當(dāng)腸屏障功能受損，腸黏膜通透性異常升高時(shí)，腸道細(xì)菌產(chǎn)生的大量D-乳酸透過腸黏膜進(jìn)入血液循環(huán)，因此檢測其外周血水平即可反映腸黏膜損害程度和通透性變化。DAO是一種含有脫氨的腐胺和組胺的細(xì)胞內(nèi)酶，是組胺等多胺物質(zhì)的分解代謝酶，95%以上存在于哺乳動(dòng)物小腸的黏膜或纖毛上皮細(xì)胞中。它是具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶，其活性與絨毛高度及腸黏膜細(xì)胞的核酸和蛋白合成密切相關(guān)。小腸黏膜屏障功能受損時(shí)，腸黏膜細(xì)胞脫落入腸腔，DAO進(jìn)入腸細(xì)胞間隙淋巴管和血流，使血DAO升高。因此，血DAO活性可反映腸黏膜屏障損傷和修復(fù)情況。本研究顯示，血清D-乳酸、DAO的變化主要發(fā)生于IBS-D組患者，表現(xiàn)為無論是D-乳酸還是DAO，IBS-D組均較其他三組顯著升高（P＜0.05）。而IBS-M組DAO水平也較IBS-C組和對照組有著明顯升高（P＜0.05），提示存在腹瀉癥狀的IBS患者腸黏膜通透性增加更為明顯。有學(xué)者應(yīng)用乳果糖/甘露醇的檢測方法同樣發(fā)現(xiàn)，腹瀉型IBS患者腸黏膜通透性較正常人增加［6］。因此，我們推測，腸黏膜機(jī)械屏障受損在腹瀉型IBS的發(fā)病中起著更為重要的作用，腸黏膜通透性增高與腹瀉癥狀密切相關(guān)。腸道黏膜通透性的增加使得黏膜下組織更容易暴露于病原體和毒素，進(jìn)一步激活局部免疫、炎性反應(yīng)，釋放各種刺激因子，直接激活腸道的感受器，導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)、感覺及分泌異常，出現(xiàn)腹瀉癥狀。

［1］中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì)胃腸動(dòng)力學(xué)組.腸易激綜合征診斷和治療的共識(shí)意見［J］.中華全科醫(yī)師雜志，2008，5（7）:298-300.

［2］張小琴，白愛峰，李慧賢，等.富縣農(nóng)民健康體檢結(jié)果分析［J］.延安大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2010，8（1）:69-70.

［3］左戎，王巧民，張旭，等.感染后腸易激綜合征患者結(jié)腸黏膜超微結(jié)構(gòu)的變化與腸黏膜屏障功能障礙的關(guān)系［J］.蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，37（2）:171-175.

［4］Spiller RC，Jenkins D，Thornley JP，et al.Increased rectal mucosal enteroendocrine cells，T lymphocytes and increased gut permeability following acute campylobacter enteritis and in post-dysenteric irritable bowel syndrome［J］.Gut，2000，47（6）:804-811.

［5］Dunlop SP，Hebden J，Campbell E，et al.Abnormal intestinal permeability in subgroups of diarrhea predominant irritable bowel syndromes［J］. Am J Gastroenterol，2006，101（6）:1288-1294.

［6］Zhou Q，Zhang B，Verne GN.Intestinal membrane permeability and hypersensitivity in the irritable bowel syndrome［J］.Pain，2009，146（1）: 41-46.

Changes of intestinal mucosal mechanical barrier in patients with irritable bowel syndrome

Ji Min1，Wang Jianwei2，Lan Xianming1，Yu Linfang1，Lan Chunyan3.1.Department of Gastroenterology，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China；2. Department of Pathology，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China；3.Department of Traditional Chinese Medicine，the Second People's Hospital of Longgang District，Shenzhen 518112，China

Objective:To investigate the changes of intestinal mucosal mechanical barrier in patients with different subtype irritable bowel syndrome（IBS），and explore the role of these changes in the pathogenesis of IBS.Methods:IBS and its three subtypes were diagnosed according to the Rome Ⅲ.In 20 healthy controls，20 patients with diarrhea-predominant IBS（IBS-D），20 patients with constipation-predominant IBS（IBS-C）and 20 patients with mixed bowelhabits IBS（IBS-M），colonic mucosa and D-lactate，DAO in the serum were analyzed.Results:The height of microvilli，the density of enteraden and the mucosal thickness of colon in control group was significantly greater than those in the IBS groups（P＜0.01）.These indicators in IBS-D group reduced remarkably than that in the other two groups.The serum levels of D-lac-tate and DAO in IBS-D group were significantly higher than those in the other three groups（P＜0.01）.The serum level of DAO in IBS-M group was significantly increased than it in IBS-C group and control group.Conclusion:Impaired intestinal mucosal mechanical barrier plays a more important role in the pathogenesis of IBS-D.The increase of intestinal mucosal permeability is closely related to the symptoms of diarrhea.

IBS；subtype；intesti；nal mucosal mechanical barrier；diarrhea

A

1004-2725（2016）05-0324-03

深圳市科技創(chuàng)新項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：JCYJ20140415112419066）

518112 廣東 深圳，深圳市龍崗區(qū)第二人民醫(yī)院消化內(nèi)科（計(jì)敏、藍(lán)顯明、于林芳），病理科（王建蔚），中醫(yī)科（蘭春燕）

計(jì)敏，E-mail:bjjimin@163.com