楊　佳　趙百孝　哈　略　黃　暢　和　蕊

(北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，北京，100029)

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艾灸對(duì)動(dòng)脈硬化模型ApoE-/-小鼠纖溶-凝血因子的調(diào)控作用研究

楊佳趙百孝哈略黃暢和蕊

(北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，北京，100029)

目的：觀察艾灸對(duì)動(dòng)脈硬化小鼠凝血-纖溶系統(tǒng)的調(diào)控效應(yīng)；方法：實(shí)驗(yàn)分為正常組(C57BL/6小鼠)、模型組、艾灸膻中組、氯吡格雷干預(yù)組(陽性組)，其中模型組、艾灸組及氯吡格雷組均選用動(dòng)脈硬化模型ApoE-/-小鼠，每組15只小鼠，高脂喂養(yǎng)；正常組選用C57BL/6小鼠作為對(duì)照，普通飲食喂養(yǎng)。正常組和模型組小鼠釆用固定器固定小鼠頭、尾、四肢部位，不予任何處理，每日抓取固定20 min；艾灸膻中組小鼠釆用固定器固定小鼠頭、尾、四肢部位后，固定器底板處設(shè)有小孔,可暴露胸部膻中穴,點(diǎn)燃特制艾條放置小鼠腹部下方,使灸火透過固定器底部小孔傳至小鼠膻中穴。用特制艾條灸膻中20 min；陽性藥組小鼠：口服給予氯吡格雷溶液14 mg/kg(1次/d)。各組干預(yù)6 d/周，16周后犧牲動(dòng)物，心臟取血，用Elisa法檢測(cè)血漿中纖溶系統(tǒng)標(biāo)志因子t-PA、PAI-1；凝血系統(tǒng)的標(biāo)志因子TXB2、6-Keto-PGF1a及參與血小板活化過程的重要黏附因子vWF的表達(dá)；結(jié)果：與模型組相比，艾灸提高血漿中t-PA含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05；與模型組相比，艾灸顯著性降低血漿內(nèi)PAI-1的含量，P<0.05；與模型組相比，艾灸顯著性降低黏附因子VWF的含量，P<0.05；與模型組相比，艾灸顯著性提高血漿中6-Keto-PGF1α的含量，P<0.05；與模型組相比，艾灸增加血漿中TXB2含量，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論：艾灸對(duì)凝血-纖溶系統(tǒng)有良好的調(diào)節(jié)作用，可以通過下調(diào)PAI-1的含量，提高纖溶系統(tǒng)的活性，上調(diào)6-Keto-PGF1α/TXB2的比值，降低黏附因子vWF，進(jìn)一步發(fā)揮其調(diào)控血小板活化，防治動(dòng)脈硬化的效應(yīng)。

艾灸；動(dòng)脈粥樣硬化；凝血-纖溶系統(tǒng)

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為飲食勞倦，七情內(nèi)傷，素體虛弱，寒邪凝滯等因素導(dǎo)致心臟的氣滯血瘀、陰陽失調(diào)而成動(dòng)脈硬化性心腦血管疾病，艾灸以其活血化瘀、溫陽補(bǔ)虛的優(yōu)勢(shì)被廣泛推廣應(yīng)用到心腦血管疾病的防治中。用艾灸可活血化瘀，溫散寒邪，鼓動(dòng)陽氣，推動(dòng)血液的運(yùn)行，使瘀滯消散，從而防止血栓的形成。本實(shí)驗(yàn)釆用ApoE-/-小鼠為觀察對(duì)象，檢測(cè)小鼠血漿中纖溶系統(tǒng)的標(biāo)志因子t-PA、PAI-1；凝血系統(tǒng)的標(biāo)志因子TXB2、6-Keto-PGF1a及參與血小板活化過程的重要介導(dǎo)因子vWF的表達(dá)，觀察艾灸對(duì)ApoE-/-小鼠的凝血-纖溶系統(tǒng)的調(diào)控效應(yīng)。

1　實(shí)驗(yàn)材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本實(shí)驗(yàn)選用8周齡載脂蛋白E基因敲除小鼠ApoE-/-小鼠作為動(dòng)脈粥樣硬化模型，同齡相同遺傳背景非轉(zhuǎn)基因小鼠C57BL/6作為空白對(duì)照。小鼠均購(gòu)自于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部。ApoE-/-小鼠釆用高脂飼料(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供,含15%豬油、2%膽固醇、0.05%膽酸)喂養(yǎng),C57BL/6釆用常規(guī)飼料喂養(yǎng)。所有小鼠均可自由進(jìn)食飲水；飼養(yǎng)環(huán)境溫度為(22±2)℃，濕度為50%～60%左右。釆用人工控制室內(nèi)照明,保持12 h光照(8：00—20：00)和黑暗(20:00—次日8：00)交替循環(huán)。

1.2主要試劑及儀器細(xì)艾條:規(guī)格(0.5 cm×20 cm),購(gòu)自河南南陽漢醫(yī)艾絨有限公司;小鼠固定器:規(guī)格(150 mm×65 mm×50 mm)，可固定小鼠頭、尾、四肢部位,底板處設(shè)有小孔,可暴露腹部,購(gòu)自上海華巖儀器設(shè)備有限公司;P5L2C光散射式微電腦數(shù)字粉塵測(cè)試儀：購(gòu)自北京賓達(dá)綠創(chuàng)科技有限公司；t-PA、PAI-1、vWF的ELISA試劑盒：購(gòu)自鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司；TXB2、6-Keto-PGF1α放射免疫藥盒：購(gòu)自鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司；3kl5型低溫高速離心機(jī)，檸檬酸鹽采血管(1∶9):NEWPROBE生物有限公司。

2　實(shí)驗(yàn)方法

2.1動(dòng)物分組及處理實(shí)驗(yàn)分為空白組(C57BL/6小鼠)、模型組、艾灸膻中組、氯吡格雷干預(yù)組(陽性組)，其中模型組、艾灸組及氯吡格雷組均選用動(dòng)脈硬化模型ApoE-/-小鼠，每組15只小鼠，高脂喂養(yǎng)；空白組選用C57BL/6小鼠作為對(duì)照，普通飲食喂養(yǎng)。

空白組、模型組小鼠：釆用固定器固定小鼠頭、尾、四肢部位，不予任何處理，每日抓取固定20 min。

艾灸膻中組小鼠：釆用固定器固定小鼠頭、尾、四肢部位后，固定器底板處設(shè)有小孔,可暴露胸部膻中穴,點(diǎn)燃特制艾條放置小鼠腹部下方,使灸火透過固定器底部小孔傳至小鼠膻中穴。用特制艾條灸膻中20 mim。

陽性藥組小鼠：口服給予氯吡格雷溶液14 mg/kg(1次/d)。

各組干預(yù)6 d/周，16周后犧牲動(dòng)物，檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)。

2.2取材及檢測(cè)小鼠取血后放入含有3.8%檸檬酸鹽抗凝采血管中,血與抗凝劑比例9∶1，輕輕顛倒混勻,3 000 r/min,離心15 min,取上清,-80 ℃保存,待測(cè)血漿中凝血-纖溶因子。

2.3ELISA酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血漿中t-PA、PAI-1、vWF、TXB2、6-Keto-PGF1α

2.3.1血漿中t-PA、PAI-1的檢測(cè)1)將各種試劑移至室溫(18～25 ℃)平衡，按前述方法配制試劑，備用。

2)加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔。每孔分別加100 μL標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本(使用樣品稀釋液稀釋2倍)，輕輕晃動(dòng)混勻，覆上板貼，37 ℃孵育2 h。

3)棄去液體，甩干，不用洗滌。

4)每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

5)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

6)每孔加HRP-鏈酶親和素工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

7)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

8)每孔加底物溶液90 μL，覆上新的板貼，37 ℃避光孵育15～30 min。

9)依序每孔加終止溶液50 μL，終止反應(yīng)。

10)在反應(yīng)終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本OD值，計(jì)算出相應(yīng)的濃度。

2.3.2血漿中vWF的檢測(cè)1)將各種試劑移至室溫(18～25 ℃)平衡，按前述方法配制試劑，備用。

2)加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔。每孔分別加100 μL標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本(使用樣品稀釋液稀釋4倍)，輕輕晃動(dòng)混勻，覆上板貼，37 ℃孵育2 h。

3)棄去液體，甩干，不用洗滌。

4)每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

5)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

6)每孔加HRP-鏈酶親和素工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

7)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

8)每孔加底物溶液90 μL，覆上新的板貼，37 ℃避光孵育15～30 min。

9)依序每孔加終止溶液50 μL，終止反應(yīng)。

10)在反應(yīng)終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本OD值，計(jì)算出相應(yīng)的濃度。

2.3.3血漿中TXB2、6-Keto-PGF1α的檢測(cè)1)將各種試劑移至室溫(18～25 ℃)平衡，按前述方法配制試劑，備用。

2)加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔。每孔分別加100 μL標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本(使用樣品稀釋液稀釋2倍)，輕輕晃動(dòng)混勻，覆上板貼，37 ℃孵育2 h。

3)棄去液體，甩干，不用洗滌。

4)每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

5)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

6)每孔加HRP-鏈酶親和素工作液100 μL，覆上新的板貼，37 ℃孵育1 h。

7)棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次。每次浸泡2 min，200 μL/孔，甩干。

8)每孔加底物溶液90 μL，覆上新的板貼，37 ℃避光孵育15～30 min。

9)依序每孔加終止溶液50 μL，終止反應(yīng)。

10)在反應(yīng)終止后5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。

以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，OD值為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本OD值，計(jì)算出相應(yīng)的濃度。

3　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

4　結(jié)果

4.1各組小鼠血漿中t-PA的含量各組t-PA的含量有空白組<模型組<氯吡格雷組<艾灸組的趨勢(shì)，但各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，提示艾灸對(duì)血漿中t-PA含量無明顯影響。見表1。

4.2各組小鼠血漿中PAI-1的含量與模型組相比，空白組、艾灸組、氯吡格雷組PAI-1含量均下降，其中空白組和艾灸組PAI-1含量顯著性降低，P<0.01，氯吡格雷組PAI-1含量略微降低，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。提示艾灸通過下調(diào)PAI-1來提高纖溶系統(tǒng)的活性。見表2。

表1　各組小鼠血漿中t-PA的含量

表2　各組小鼠血漿中PAI-1的含量

注：與模型組比，*P<0.05，**P<0.01。

4.3各組小鼠血漿中黏附因子VWF的含量與模型組相比，空白組、艾灸組、氯吡格雷組VWF含量均下降，其中空白組VWF含量顯著性降低，P<0.01，艾灸組和氯吡格雷組VWF亦顯著性下降，P<0.05，艾灸組VWF含量略高于氯吡格雷組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。見表3。

表3　各組小鼠血漿中VWF的含量

注：與模型組比，*P<0.05，**P<0.01。

4.4各組小鼠血漿中6-Keto-PGF1α的含量與模型組相比，空白組、艾灸組、氯吡格雷組6-Keto-PGF1α含量均上升，其中空白組上升無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，艾灸組與氯吡格雷組6-Keto-PGF1α含量顯著性升高，P<0.05，氯吡格雷組6-Keto-PGF1α含量略高于艾灸組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，提示艾灸通過上調(diào)6-Keto-PGF1α含量來影響凝血-纖溶系統(tǒng)，從而影響動(dòng)脈硬化的發(fā)生，其也為抗動(dòng)脈硬化的作用機(jī)制之一。見表4。

表4　各組小鼠血漿中6-Keto-PGF1α的含量

注：與模型組比，*P<0.05，**P<0.01。

4.5各組小鼠血漿中TXB2的含量與模型組相比，艾灸組和氯吡格雷組TXB2含量均有上升趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，空白組TXB2含量略微下降，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，艾灸組TXB2含量略高于氯吡格雷組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05，提示艾灸對(duì)TXB2含量無明顯影響。見表5。

表5　各組小鼠血漿中TXB2的含量

5　討論

纖溶系統(tǒng)是一種抗血管內(nèi)血栓形成的內(nèi)皮防御系統(tǒng)，其中，t-PA和PAI-1是纖溶系統(tǒng)的一對(duì)關(guān)鍵性調(diào)節(jié)因子。[1]組織型纖溶酶原激活物(t-PA)由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成并釋放，可激活纖溶酶原，使血塊溶解;纖溶酶原激活抑制物1型(PAI-1)是血漿中t-PA的重要生物抑制劑，來源于內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肝臟、血小板等;PAI-1經(jīng)合成分泌后，與血漿中游離的t-PA快速結(jié)合，阻礙t-PA激活纖溶酶原，使血塊不易溶解，促進(jìn)血栓形成[2-3]。生理?xiàng)l件下PAI-1和t-PA共同調(diào)節(jié)著纖溶系統(tǒng)的平衡，二者間的失衡可導(dǎo)致血栓和出血的發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，艾灸可以顯著性降低血漿內(nèi)PAI-1的含量，說明艾灸可以提高纖溶系統(tǒng)的活性，從而抑制血小板活化，干預(yù)動(dòng)脈硬化的進(jìn)展。

TXA2和PGI2同屬細(xì)胞膜釋放的花生四煉酸的主要代謝產(chǎn)物，TXA2是較強(qiáng)的血管收縮劑和血小板聚集誘導(dǎo)劑，而PGI2具有很強(qiáng)的擴(kuò)張血管和抑制血小板聚集作用。TXA2與TXA2受體結(jié)合，偶聯(lián)Gq蛋白，激活PLC，增加胞質(zhì)[Ca2+]i，引起血小板聚集。PGI2與膜上的PG受體結(jié)合，偶聯(lián)Gs蛋白，激活腺苷酸環(huán)化酶(AC)，增加cAMP含量，降低胞質(zhì)[Ca2+]i，抑制血小板聚集[4-6]。在正常生理狀態(tài)下二者處于平衡狀態(tài)，對(duì)維持人體血液的正常流動(dòng)狀態(tài)起著重要的作用。研究表明，腦缺血、心肌梗死、動(dòng)脈硬化等心腦血管疾病狀態(tài)下，腦中PGI/TXA2的比值明顯下降[7-8]。TXA2和PGI2不穩(wěn)定，半衰期都非常短，TXB2和6-Keto-PGF1α分別是TXA2和PGI2的穩(wěn)定代謝產(chǎn)物，故測(cè)定TXB2和6-Keto-PGF1α的水平可直接反映TXA2和PGI2的變化。研究結(jié)果顯示艾灸顯著性提高血漿中6-Keto-PGF1α的含量，提高6-Keto-PGF1α/TXA2的比值。說明艾灸通過良性調(diào)節(jié)血漿凝血-纖溶系統(tǒng)，發(fā)揮其調(diào)控血小板活化，干預(yù)動(dòng)脈硬化的病理過程。

血小板與內(nèi)皮下組織的黏附是血栓形成的啟動(dòng)環(huán)節(jié)，血管性血友病因子(von Willebrand Factor，vWF)介導(dǎo)這一過程，vWF可與膠原及血小板膜糖蛋白GP I b和GPlIb-IIIa結(jié)合，在血小板聚集中起到橋梁連接作用[9-10]。本研究結(jié)果顯示艾灸顯著性降低黏附因子VWF的含量，說明艾灸減低黏附因子亦參與到抗動(dòng)脈硬化的作用中。

本研究結(jié)果與以往的臨床及基礎(chǔ)研究均表明艾灸對(duì)血液流變學(xué)及凝血-纖溶系統(tǒng)有良性調(diào)節(jié)作用相符。唐照亮等實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，艾灸可降低寒凝血瘀模型大鼠的血漿、全血黏度、RE以及Ht從而改善寒凝血瘀證大鼠的血瘀癥狀。吳氏等發(fā)現(xiàn)艾灸可對(duì)血漿中的TXB2和6-酮-PGF12有良性調(diào)節(jié)作用，使高凝狀態(tài)的血流得到改善，血小板凝聚性降低，血流速度加快，促使血栓溶解，使原缺血區(qū)的神經(jīng)細(xì)胞得以恢復(fù)，也可使處于水腫或?qū)⒁冃缘募?xì)胞正向轉(zhuǎn)化，從而糾正高脂血癥的發(fā)生，也有效的預(yù)防了動(dòng)脈粥樣硬化等心腦血管疾病的發(fā)生[11]。黃氏[12]等發(fā)現(xiàn)艾灸治療原發(fā)性高血壓病程中，其全血黏度、纖維蛋白原含量、血漿黏度、血細(xì)胞比容、血小板聚集率以及血液膽固醇、三酰甘油等與血黏度有關(guān)的成分均有下降，證明艾灸對(duì)血液化學(xué)成分及血液黏度有良性調(diào)整作用，可以改善高血壓患者血液濃、黏、凝、聚狀態(tài)，降低外周阻力，從而改善微循環(huán)，調(diào)節(jié)局部血氧供應(yīng)和代謝，對(duì)緩解和阻止高血壓病情的惡性循環(huán)有積極意義[13]。

艾灸能夠起到活血通絡(luò)的作用可能與艾葉的藥性作用以及艾燃燒生成物的芳香作用有關(guān)[14-16]。艾作為最佳的施灸材料，性苦微溫，氣味芳香，與其他材料相比，具有一定的藥性作用優(yōu)勢(shì)，艾的芳香辛燥之氣是艾灸對(duì)機(jī)體產(chǎn)生效應(yīng)的機(jī)制之一。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，艾葉的主要成分是揮發(fā)油，所含化學(xué)成分主要有:α-菔稀、藏稀、α-松油稀、Y-松油稀、桉葉素、2-環(huán)己稀-1-醇、棒腦、龍腦、4-松油醇、反式-石竹稀、丁子香酚，其中具有藥效作用的成分有桉葉素、樟腦、龍腦、甘菊環(huán)等[17]，這些成分也存在于羅勒、迷迭香、桉葉油等[18]。

中醫(yī)藥學(xué)認(rèn)為，芳香性藥物以化濕和開竅為兩大主要功效。中藥藥理研究證明，芳香性中藥是一些具特別香氣的藥物，具有鼓舞正氣、除邪辟穢、解肌發(fā)表、疏風(fēng)散邪，芳香健脾、化濕醒脾，通關(guān)開竅、止痛消腫等功效，芳香藥物的作用在于“率領(lǐng)群藥開結(jié)行滯，直達(dá)病所，俾令攻決，無不如志，一歸于氣血流通，而病自已”。這些特點(diǎn)與芳香性中藥所有的特殊藥理性質(zhì)有關(guān)[19-20]。這些芳香物質(zhì)可以對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、皮膚、泌尿系統(tǒng)都存在著治療和輔助治療作用[21-22]，可以促進(jìn)血液運(yùn)行，加快微循環(huán)，調(diào)節(jié)新陳代謝，加快體內(nèi)毒素排除、消炎殺菌，擴(kuò)張外周血管、降低血壓、增加心灌流量等多方面心血管調(diào)節(jié)作用[23-24]。

目前普遍認(rèn)為芳香物質(zhì)可經(jīng)嗅覺系統(tǒng)傳入大腦，抑制或興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)，亦可通過呼吸或皮膚滲透進(jìn)入血液，隨血液循環(huán)運(yùn)行至全身，因此艾葉及艾燃燒生成物可能是通過其中的揮發(fā)油的芳香作用達(dá)到加快血液循環(huán)，通絡(luò)散疾的作用[25]。

從中醫(yī)理論角度來講，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為飲食勞倦，七情內(nèi)傷，素體虛弱，寒邪凝滯等因素導(dǎo)致心臟的氣滯血瘀、陰陽失調(diào)而成動(dòng)脈硬化性心腦血管疾病，艾灸以其活血化瘀、溫陽補(bǔ)虛的優(yōu)勢(shì)被廣泛推廣應(yīng)用到心腦血管疾病的防治中。用艾灸可活血化瘀，溫散寒邪，人體的正常生命活動(dòng)有賴于氣血的作用，氣行則血行，氣止則血止，血?dú)庠诮?jīng)脈中流行，完全是由于“氣”的推動(dòng)。各種原因，如“寒則氣收，熱則氣疾”等，都可影響血?dú)獾牧餍?，變生百病。而氣溫則血滑，氣寒則血濕，也就是說，氣血的運(yùn)行有遇溫則散，遇寒則凝的特點(diǎn)。所以朱丹溪說:“血見熱則行，見寒則凝”。因此，凡是一切氣血凝濕，沒有熱象的疾病，都可用溫氣的方法來進(jìn)行治療?！鹅`樞·刺節(jié)真邪》篇中說:“脈中之血，凝而留止，弗之火調(diào)，弗能取之”。《靈樞·禁服》亦云:“陷下者，脈血結(jié)于中，血寒，故宜灸之”。灸法正是應(yīng)用其溫?zé)岽碳?，起到溫?jīng)通絡(luò)的作用。通過熱灸對(duì)經(jīng)絡(luò)穴位的溫?zé)嵝源碳?，可以溫?jīng)散寒，加強(qiáng)機(jī)體氣血運(yùn)行，達(dá)到臨床治療目的。同時(shí)，血栓的形成主要是由于“氣滯血凝”“凝血瘀者”或者“痰瘀血凝”，由于人體功能下降，或者情志不遂、過食肉食肥甘厚膩、使肝郁氣滯、脾虛痰濕內(nèi)生或者寒凝阻礙氣血運(yùn)行，形成瘀血，日久可瘀阻脈絡(luò)形成心腦血管疾病。艾灸可以活血化疾，溫陽補(bǔ)虛，消瘀散結(jié)，鼓動(dòng)陽氣，推動(dòng)血液的運(yùn)行，因此血液流速加快，使瘀滯消散，從而防止血栓的形成。

6　結(jié)論

艾灸對(duì)凝血-纖溶系統(tǒng)有良好的調(diào)節(jié)作用，可以通過下調(diào)PAI-1的含量，提高纖溶系統(tǒng)的活性，上調(diào)6-Keto-PGF1α/TXB2的比值，降低黏附因子VWF，進(jìn)一步發(fā)揮其調(diào)控血小板活化，防治動(dòng)脈硬化的效應(yīng)。

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(2016-06-28收稿責(zé)任編輯：洪志強(qiáng))

Observation on the Effect of Moxibustion on Fibrinolytic Clotting Factors of Apolipoprotein E-deficient Arteriosclerosis Mice

Yang Jia, Zhao Baixiao, Ha Lue, Huang Chang, He Rui

(SchoolofAcupuncture-moxibustionandTuinaofBeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China)

Objective:To observe the regulating effect of moxibustion on fibrinolytic clotting factors in apolipoprotein E-deficient (ApoE-/-) arteriosclerosis (AS) mice. Methods: ApoE-/-AS mice were randomly divided in to model group, moxibustion group and clopidogrel group, with 15 mice in each, and fed with high fat. In addtion, 15 C57BL/6 mice were chosen as the normal control group, fed with normal diet. The normal control group and model group were both only given fixation to mice without any treatment, 20 min/day. Moxibustion group was given moxibustion on Dan Zhong (CV17) acu-point 20 min/day. Besides, the clopidogrel group was given clopidogrel 14 mg/kg. After 16 weeks of intervention (6 days/week), mice were killed to take the heart blood as to test the level of t-PA and PIA-1 using ELISA method. Also, the expression of TXB2，6-Keto-PGF1a and vWF were tested. Results: Comparing with the model group, t-PA and TXB2 in the moxibusiton group was enhanced with no statistical significance (P>0.05), while the PAI-1 and vWF were decreased significantly (P<0.05). Conclusion: Moxibustion can regulate fibrinolytic clotting factors positively by down-regulating PAI-1 and activate fibrinolytic system, up-regulating 6-Keto-PGF1α/ TXB2, decreasing vWF thus activating thrombocyte and preventing AS.

Moxibustion; Arteriosclerosis; Fibrinolytic clotting system

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：81373730)；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：81574068)；國(guó)家青年自然基金項(xiàng)目(編號(hào)：81403449)；國(guó)家國(guó)際科技合作專項(xiàng)項(xiàng)目(編號(hào)：2011DFA31370)

楊佳，女，北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院2013級(jí)博士，E-mail：yangjia902@126.com

趙百孝(1963.03—)，博士，教授，博士研究生導(dǎo)師，北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院院長(zhǎng)，研究方向：艾灸作用與原理，Tel：(010)64286737，E-mail:baixiao100@vip.sina.com

R245.81

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2016.08.006