盛仲楠，袁博，司保達(dá)聊城市中醫(yī)醫(yī)院病理科，山東聊城　252003

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VEGF、c-erbB-2與NSCLC血管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究

盛仲楠，袁博，司保達(dá)
聊城市中醫(yī)醫(yī)院病理科，山東聊城252003

［摘要］目的探討VEGF、c-erbB-2與NSCLC血管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。方法方便選取聊城市中醫(yī)院2004—2012年非小細(xì)胞肺癌存檔蠟塊54例作為觀察組，對(duì)照組選擇20例肺良性病變手術(shù)切除標(biāo)本，觀察兩組的VEGF、cerbB-2水平。結(jié)果54例非小細(xì)胞肺癌組織病理切片中，C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)40例，陰性表達(dá)14例，陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)74.07%，兩者比較有顯著差異（P＜0.05）。54例非小細(xì)胞肺癌肺癌組織病理切片中，VEGF陽(yáng)性表達(dá)36例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%，肺良性病變中，VEGF陽(yáng)性2例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為10%，兩者比較有顯著生物學(xué)差異。結(jié)論VEGF、c-erbB-2與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展中密切相關(guān)，并在此過(guò)程中起到一定的調(diào)控作用，VEGF、c-erbB-2表達(dá)增強(qiáng)預(yù)示著患者較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，提示患者預(yù)后不佳，有助于早期判斷預(yù)后。

［關(guān)鍵詞］VEGF；c-erbB-2；NSCLC；血管生成；淋巴道轉(zhuǎn)移

肺癌是臨床常見(jiàn)腫瘤，非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌的絕大部分［1］。肺癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，吸煙是非小細(xì)胞肺癌最主要的致病因素。85%以上的肺癌發(fā)生都可歸因于主動(dòng)吸煙或被動(dòng)吸煙［2］。在北美、北歐、澳大利亞及新西蘭，吸煙是女性肺癌的主要致病因素，其他地區(qū)的女性肺癌與廚房油煙吸入關(guān)系更為密切。吸煙者肺癌的發(fā)生與吸煙的年數(shù)、每日吸煙的數(shù)量、初始吸煙的年齡、香煙的類(lèi)型、肺癌家族史等均有關(guān)［3］。吸煙指數(shù)（每天吸煙支數(shù)×吸煙年數(shù)）＞400者為高危人群。為探討VEGF、c-erbB-2與NSCLC血管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，該研究選取聊城市中醫(yī)院2010—2015年非小細(xì)胞肺癌存檔蠟塊54例作為觀察組，對(duì)照組選擇20例肺良性病變手術(shù)切除標(biāo)本，取得的滿意的結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

表1　C-erbB-2在非小細(xì)胞肺癌及肺良性病變中的表達(dá)

表2　C-erbB-2在非小細(xì)胞肺癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)

表3　VEGF在非小細(xì)胞肺癌及肺良性病變中的表達(dá)

表4　VEGF的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

1　資料與方法

1.1一般資料

所有標(biāo)本來(lái)自聊城市中醫(yī)院行胸外科手術(shù)切除肺葉的非小細(xì)胞肺癌存檔蠟塊54例，所有患者均知情同意，并通過(guò)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。觀察組：其中男性36例，女性18例，年齡≥60歲的31例，＜60歲的23例；高中分化36例，低分化18例；≤3 cm的20例，＞3 cm 的34例；鱗癌24例，腺癌30例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的31例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的23例。所有病例術(shù)前均未經(jīng)治療。所有病例切片均經(jīng)HE染色，由2名有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生光鏡下復(fù)診，有爭(zhēng)議者第三者復(fù)核后確定。對(duì)照組：選擇20例肺良性病變手術(shù)切除標(biāo)本，其中肺大泡15例，肺結(jié)核3例，炎性假瘤2例。

1.2方法

slug兔抗人單克隆抗體，為邁新公司及奧博森公司采購(gòu)。切片機(jī)：美康HM325，脫水機(jī)：常州中威TSJ-3，光學(xué)顯微鏡：日本產(chǎn)OLYMPUS，照相機(jī)：日本產(chǎn)CANON A640，恒溫孵育箱：常州冠軍ZD-85，烤箱、冰箱、燒杯、染缸等。多聚賴氨酸處理的切片用于免疫組化染色，切片常規(guī)脫蠟至水，充分水化。抗原修復(fù)：檸檬酸鹽緩沖液高壓高溫抗原修復(fù)，PBS洗3 min×3。除去PBS，切片上滴加試劑B（多聚酶結(jié)合物）室溫孵育20 min。PBS洗3 min×3。滴加新鮮配制的DAB液顯色，約5～15 min。自來(lái)水沖洗，終止顯色。蘇木素染核l～2 min。脫水透明，中性樹(shù)膠封片。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用率進(jìn)行比較，組間比較采用Χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1C-erbB-2的免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果

2.1.1C-erbB-2在非小細(xì)胞肺癌及肺良性病變中的表達(dá)4例非小細(xì)胞肺癌組織病理切片中，C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)74.07%，20例肺部良性病變的組織切片中，C-erbB-2陽(yáng)性率為15%，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.1.2C-erbB-2在非小細(xì)胞肺癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)非小細(xì)胞肺癌病理組織中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為80.65%，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為65.22%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

2.2VEGF的免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果

2.2.1VEGF在非小細(xì)胞肺癌及肺良性病變中的表達(dá)

54例非小細(xì)胞肺癌肺癌組織病理切片中，VEGF陽(yáng)性表達(dá)36例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%，肺良性病變中，VEGF陽(yáng)性2例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為10%，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

2.2.2VEGF在非小細(xì)胞肺癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的表達(dá)在54例非小細(xì)胞肺癌的病理組織中，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率為51.62%，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率為39.13%，轉(zhuǎn)移組明顯高于未轉(zhuǎn)移組，二者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3　討論

非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌的75%～80%。非小細(xì)胞肺癌早期可無(wú)癥狀，周?chē)湍[瘤患者可無(wú)局部癥狀。非小細(xì)胞肺癌的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，可以由原發(fā)腫瘤、胸內(nèi)蔓延、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和副腫瘤綜合征引起［4］。胸部增強(qiáng)CT是常用的非小細(xì)胞肺癌影像學(xué)診斷方法。不同分型的非小細(xì)胞肺癌CT表現(xiàn)各有特點(diǎn)。中央型肺癌表現(xiàn)為支氣管腔內(nèi)腫塊、支氣管腔狹窄、支氣管壁增厚、肺門(mén)腫塊等直接征象，阻塞性肺炎、肺不張等繼發(fā)征象及肺門(mén)淋巴結(jié)腫大等［5］。

免疫系統(tǒng)可能有刺激腫瘤生長(zhǎng)的作用，這種刺激效應(yīng)可能是由于淋巴細(xì)胞激活其他產(chǎn)物對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的直接作用所致［6］。人們目前尚不清楚在腫瘤中刺激性或抑制性反應(yīng)何者占優(yōu)勢(shì)，這些可能與腫瘤抗原的特征、抗原遞呈方式以及宿主免疫細(xì)胞相互作用的初始部位有關(guān)。

腫瘤的免疫治療分為主動(dòng)免疫治療和被動(dòng)免疫治療兩種類(lèi)型［7］。主動(dòng)免疫治療是指用制備抗原刺激荷瘤宿主，使宿主發(fā)生免疫反應(yīng)，從而消除腫瘤或抑制腫瘤的生長(zhǎng)。主動(dòng)免疫治療又可以分為非特異性主動(dòng)免疫治療和特異性主動(dòng)免疫治療兩種。早期的腫瘤免疫治療多應(yīng)用非特異性主動(dòng)免疫，該方法要用免疫佐劑進(jìn)行免疫刺激，如卡介苗、短小棒狀桿菌、左旋咪唑等［8］。用腫瘤細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞提取物進(jìn)行治療也需和免疫佐劑聯(lián)合使用。這些免疫治療大多數(shù)不成功，現(xiàn)在很少使用。早期開(kāi)發(fā)腫瘤疫苗進(jìn)行腫瘤主動(dòng)免疫現(xiàn)仍是研究的熱點(diǎn)，目前尚無(wú)實(shí)質(zhì)性的突破。在腫瘤被動(dòng)免疫中使用獨(dú)特的單克隆抗體治療B細(xì)胞淋巴瘤和T細(xì)胞白血病已取得了令人滿意的效果，是腫瘤治療今后研究的方向之一［9］。

通過(guò)該研究發(fā)現(xiàn)，54例非小細(xì)胞肺癌組織病理切片中，C-erbB-2陽(yáng)性表達(dá)40例，陰性表達(dá)14例，陽(yáng)性表達(dá)率達(dá)74.07%，兩者比較有顯著差異（P＜0.05）。54例非小細(xì)胞肺癌肺癌組織病理切片中，VEGF陽(yáng)性表達(dá)36例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為66.67%，肺良性病變中，VEGF陽(yáng)性2例，陰性18例，陽(yáng)性表達(dá)率為10%，兩者比較有顯著生物學(xué)差異，通過(guò)以上數(shù)據(jù)我們不難看出，，C-erbB-2與，VEGF在肺癌中的陽(yáng)性率顯著大于良性病變者。學(xué)者張勁男等［10］探討了慢病毒介導(dǎo)的siRNA干擾乳腺癌MCF-7細(xì)胞MIF對(duì)VEGF-C表達(dá)的影響，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌患者中，VEGF-C表達(dá)陽(yáng)性率89.75%，與該研究結(jié)果一致。

通過(guò)該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，VEGF、c-erbB-2與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展中密切相關(guān)，并在此過(guò)程中起到一定的調(diào)控作用，VEGF、c-erbB-2表達(dá)增強(qiáng)預(yù)示著患者較易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，提示患者預(yù)后不佳，有助于早期判斷預(yù)后。

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Research on Correlation between VEGF，c-erbB-2 and NSCLC Angiogenesis and Lymphatic Metastasis

SHENG Zhong-nan，YUAN Bo，SI Bao-da
Department of Pathology，Liaocheng Hospital of Traditional Chinese Medicine，Liaocheng，Shandong Province，252003 China

［Abstract］Objective To discuss the correlation between VEGF，c-erbB-2 and NSCLC angiogenesis and lymphatic metastasis. Methods 54 cases of stored paraffin blocks of non-small cell lung cancer from 2004 to 2012 were regarded as the observation group，20 cases of surgical excision specimens of benign pulmonary lesions were selected as the control group，and the VEGF and c-erbB-2 levels of the two groups were observed. Results In the 54 cases of pathologic tissue slices of nonsmall cell lung cancer，the positive expression of C-erbB-2 was in 40 cases and the negative expression of C-erbB-2 was in 14 cases，and the positive expression rate was 74.07%，and there was an obvious difference between the two by comparison（P＜0.05），the positive expression of VEGF was in 36 cases and negative expression of VEGF was in 18 cases，and the positive expression rate was 66.67%，in the benign pulmonary lesions，positive VEGF was in 2 cases，negative VEGF was in 18 cases，and the positive expression rate was 10%，and there was an obvious biological difference between the two by comparison. Conclusion VEGF and c-erbB-2 are closely related to the occurrence and development of non-small cell lung cancer and play a certain regulation role in this process，and the expression intensity of VEGF and c-erbB-2 indicates that lymphatic metastasis easily occurs to patients and reminds poor prognoses of patients，which is conducive to the early judgment of prognosis.

［Key words］VEGF；c-erbB-2；NSCLC；Angiogenesis；Lymphatic metastasis

［中圖分類(lèi)號(hào)］R737.9

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1674-0742（2016）05（a）-0053-03

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.13.053

［作者簡(jiǎn)介］盛仲楠（1976-），女，山東聊城人，本科，主治醫(yī)師，主要從事病理診斷工作。

收稿日期：（2016-01-04）