鄭海娟，王維亭，郝春華，趙專友，湯立達(dá)△

地奧心血康對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的治療作用

鄭海娟1，2，王維亭2，郝春華2，趙專友2，湯立達(dá)2△

目的 觀察地奧心血康（DAXXK）對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的治療作用及機(jī)制。方法 40只SD大鼠經(jīng)結(jié)扎冠脈左前降支制備大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，造模成功后隨機(jī)分為模型組、DAXXK-d（31.5 mg/kg）組、DAXXK-g（63.0 mg/kg）組、合心爽（24.8 mg/kg）組及假手術(shù)組，各組采用相應(yīng)治療給藥，每天1次，連續(xù)7 d。彩色多普勒超聲儀測(cè)定心臟功能與心臟構(gòu)型，Millar導(dǎo)管法測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)，i-STAT 300型血?dú)夥治鰞x測(cè)動(dòng)脈血氧飽和度、血氧分壓，ELISA法測(cè)定炎性因子白細(xì)胞介素（IL）-1β、IL-6、腫瘤壞死因子（TNF）-α、細(xì)胞間黏附分子（ICAM）-1、血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子（VCAM）-1，以及凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax，TUNEL法測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 與模型組相比，DAXXK可以增加左室縮短分?jǐn)?shù)（FS），改善心臟收縮功能和舒張功能，增加左室內(nèi)壓最大上升/下降速率（±LVdp/dtmax）。DAXXK可減輕肺淤血導(dǎo)致的肺泡氣體交換障礙，增加動(dòng)脈血氧分壓與血氧含量，改善肺功能，降低IL-1β、IL-6、TNF-α炎癥因子水平以及ICAM-1、VCAM-1水平。DAXXK可使心肌細(xì)胞腫脹和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減輕、心肌細(xì)胞調(diào)亡減少、Bcl-2蛋白表達(dá)升高、Bax蛋白表達(dá)降低。結(jié)論 用DAXXK治療對(duì)心肌缺血再灌注損傷有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制與抑制細(xì)胞凋亡，減輕炎性因子損傷有關(guān)。

心肌再灌注損傷；心臟功能試驗(yàn)；細(xì)胞黏附分子；細(xì)胞凋亡；炎癥因子；地奧心血康

地奧心血康（Di'ao Xinxuekang，DAXXK）是從藥用植物黃山藥或穿龍薯蕷根莖中提取的甾體總皂苷有效成分，用于治療心血管疾病的純中藥制劑，具有活血化瘀、行氣止痛、宜痹通陽(yáng)、補(bǔ)益氣血等功能。臨床上地奧心血康主要用于預(yù)防和治療冠心病、心絞痛等心肌缺血疾?。?-3］。研究發(fā)現(xiàn)，地奧心血康預(yù)防給藥對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，其機(jī)制與抗氧化損傷有關(guān)［1］。地奧心血康治療給藥對(duì)實(shí)驗(yàn)性缺血再灌注損傷的作用鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究制作大鼠心肌缺血再灌注模型，連續(xù)7 d給予地奧心血康治療，觀察其對(duì)心肌缺血再灌注損傷的治療作用，并從炎性因子、抗凋亡等角度探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 SD大鼠，SPF級(jí)，雄性，220～260 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK（京）2012-0001。

1.2 藥品與試劑 地奧心血康軟膠囊：成都地奧制藥集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，每粒膠囊含甾體總皂苷100 mg，批號(hào)130112。鹽酸地爾硫卓片（商品名合心爽）：天津田邊制藥有限公司生產(chǎn)，規(guī)格30 mg，批號(hào)1304032。大鼠白介素（IL）-1β、IL-6、腫瘤壞死因子（TNF）-α、細(xì)胞間黏附分子（ICAM）-1、血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子（VCAM）-1、大鼠Bcl-2、Bax酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒均購(gòu)自Bio-Swamp公司。In Situ Cell Death Detection Kit購(gòu)自Roche Diagnostics GmbH。

1.3 儀器 MP150多導(dǎo)生理信號(hào)采集系統(tǒng)（美國(guó)Biopac system Inc），VIVD3 Pro彩色多普勒超聲儀（美國(guó)GE公司），Varioskan Flash全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Themro Scientific公司），PK121R低溫冷凍離心機(jī)（意大利ALC公司），TS100顯微鏡成像系統(tǒng)（日本Nikon公司），病理圖像采集與分析系統(tǒng)（北京航空航天大學(xué)圖像中心），Millar大鼠心導(dǎo)管（美國(guó)Millar公司），i-STAT 300型血?dú)夥治鰞x（美國(guó)Abbott Laboratories）。

1.4 方法

1.4.1 模型制備 大鼠腹腔注射12%水合氯醛360 mg/kg全麻的條件下，仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。胸部左前外側(cè)去毛，常規(guī)消毒。切開(kāi)皮膚、肌層，肌層行荷包縫合，左側(cè)第四肋間隙開(kāi)胸，以環(huán)形鉤拉出心臟。在左心耳下方3～4 mm處的冠脈前降支位置，以6/0無(wú)損傷絲線穿線，并置直徑1.6 mm尼龍絲線，連同冠狀動(dòng)脈前降支一起結(jié)扎，尼龍絲線另一端留于體外備用。將心臟放回胸腔，排空胸腔內(nèi)空氣，關(guān)閉胸腔。假手術(shù)組僅在相應(yīng)冠脈位置穿線，不進(jìn)行結(jié)扎，其他手術(shù)過(guò)程與結(jié)扎動(dòng)物相同。結(jié)扎30 min后小心移除尼龍線進(jìn)行缺血再灌注?？p合肌層及皮膚，肌內(nèi)注射青霉素，每天1次，連續(xù)3 d。

術(shù)前（正常）、冠脈結(jié)扎后10 min、再灌注后10 min測(cè)定Ⅱ?qū)?lián)心電圖（ECG-Ⅱ）。與術(shù)前（ECG-Ⅱ）比較，冠脈結(jié)扎后10 min，ST段抬高0.2 mV以上為缺血成功；再灌注后10 min，抬高的ST段下降30%以上為再灌注成功。不滿足上述缺血或缺血再灌注標(biāo)準(zhǔn)的動(dòng)物表明造模不成功，從實(shí)驗(yàn)中剔除。

造模成功的40只大鼠按隨機(jī)數(shù)字表分為模型組、DAXXK-d組、DAXXK-g組、合心爽組及假手術(shù)組，每組8只。DAXXK-d組、DAXXK-g組分別給予31.5、63 mg/kg（相當(dāng)于臨床等效量），合心爽組給予24.8 mg/kg，假手術(shù)組和模型組均給予0.5%羧甲基纖維素鈉，心肌缺血再灌注成功后2 h開(kāi)始灌胃給藥，給藥體積均為10 mL/kg，每天1次，連續(xù)7 d。

1.4.2 多普勒心臟功能及心臟構(gòu)型測(cè)定 分別于動(dòng)物造模前（基礎(chǔ)值）、給藥結(jié)束后，以VIVID 3 Pro彩色多普勒超聲儀測(cè)量超聲心電圖。選用線性矩陣探頭（10 MHz，2D掃描灰度為60，幀速為130幀/s；M型掃描速度為50 mm/s，在左室長(zhǎng)軸解剖位2D模式引導(dǎo)下選取M模式圖像，測(cè)定左室縮短分?jǐn)?shù)（FS）、左室舒張末期容量（LVVd）、左室收縮末期容量（LVVs）。

1.4.3 血流動(dòng)力學(xué)測(cè)定 末次給藥后1 h，將Millar導(dǎo)管沿頸動(dòng)脈逆向插至左心室，經(jīng)MP150多導(dǎo)生理信號(hào)采集系統(tǒng)記錄并存儲(chǔ)于計(jì)算機(jī)，以AcqKnowledge v.3.8.2軟件測(cè)量各血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，包括左室內(nèi)壓（LVSP）、左室舒張末期壓（LVEDP）、左室壓最大上升速率（+LVdp/dtmax）、左室壓最大下降速率（-LVdp/dtmax）。測(cè)定系統(tǒng)血壓包括收縮壓（SAP）、舒張壓（DAP）、平均動(dòng)脈壓（MAP）和心率（HR）。

1.4.4 血?dú)鉁y(cè)定 大鼠經(jīng)腹主動(dòng)脈取血進(jìn)行動(dòng)脈血氧分壓［p（O2）］測(cè)定，并計(jì)算動(dòng)脈血氧含量。

1.4.5 炎性因子及黏附分子檢測(cè) 大鼠經(jīng)腹主動(dòng)脈取血，4℃，3 000 r/min，離心10 min，取血清，ELISA法測(cè)定IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1。

1.4.6 心肌細(xì)胞凋亡與凋亡相關(guān)蛋白率測(cè)定 取心臟，用生理鹽水沖洗后，取心臟冠脈結(jié)扎部位以下，以冠狀位切取組織，OCT包埋制作冰凍切片，切片厚度5 μm。按TUNEL試劑盒提供的步驟流程進(jìn)行，每個(gè)組織隨機(jī)讀取梗死周邊區(qū)域3個(gè)視野，顯微鏡下觀察拍照，經(jīng)病理圖像分析系統(tǒng)測(cè)定計(jì)算心肌細(xì)胞凋亡率。心肌細(xì)胞凋亡率=凋亡細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。取大鼠危險(xiǎn)區(qū)心肌約50 mg，組織進(jìn)行勻漿，4℃，3 000 r/min，離心10 min，取上層勻漿液，ELISA法測(cè)定Bcl-2、Bax的蛋白表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS 9.1軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，非正態(tài)分布資料取對(duì)數(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)換，多組間比較采用單因素方差分析，組間多重比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組FS、LVVd、LVVs比較 假手術(shù)組實(shí)驗(yàn)期間FS較為穩(wěn)定，模型組心肌缺血再灌注損傷后7 d，F(xiàn)S明顯降低，較基礎(chǔ)值下降32.0%。與模型組比較，DAXXK-d組、DAXXK-g組、合心爽組分別使下降的FS增加了37.5%、45.3%、33.3%（均P＜0.05）。大鼠心肌缺血再灌注損傷后7 d，LVVs明顯擴(kuò)大。與模型組相比，DAXXK-g組使擴(kuò)張的LVVs縮小41.9%，合心爽組亦使擴(kuò)張的LVVs縮小41.9%（均P＜0.05）。與模型組相比，DAXXK、合心爽對(duì)LVVd改善不明顯（P＞0.05），見(jiàn)表1。

2.2 各組血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 大鼠心肌缺血再灌注損傷7 d，與假手術(shù)組比較，DAP、MAP、LVSP均明顯下降，DAXXK-g組使下降的DAP、MAP、LVSP有所恢復(fù)。模型組±LVdp/dtmax較假手術(shù)組明顯降低，左室收縮功能及舒張功能均明顯下降。DAXXK-g組使下降的+LVdp/dtmax增加了84.1%［（給藥組-模型組）/（假手術(shù)組-模型組）］，使模型組下降的-LVdp/dtmax增加了68.3%（均P＜0.05）。合心爽組亦使下降的+LVdp/dtmax增加了 81.4%，使下降的-LVdp/dtmax增加了57.2%（均P＜0.05）。DAXXK對(duì)HR、SAP、LVEDP無(wú)明顯影響（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 各組血氧分壓、血氧含量比較 大鼠心肌缺血再灌注損傷7 d后，血氧分壓、血氧含量明顯降低。與模型組相比，DAXXK-d組、DAXXK-g組、合心爽組分別使下降的血氧分壓增加64.7%、89.5%、25.7%；DAXXK-d組、DAXXK-g組、合心爽組分別使下降的血氧含量增加68.2、84.1%、93.2%（均P＜0.05），見(jiàn)表3。

Tab.1 Comparison of left ventricular shortening score（FS）and left ventricular volume（LVV）between five groups表1 各組FS及左室體積比較 （n=8，±s）

Tab.1 Comparison of left ventricular shortening score（FS）and left ventricular volume（LVV）between five groups表1 各組FS及左室體積比較 （n=8，±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；a與假手術(shù)組比較，b與模型組比較，c與合心爽組比較，P＜0.05；表2～5同

組別假手術(shù)組模型組DAXXK-d組DAXXK-g組合心爽組F FS（%）基礎(chǔ)值59.3±4.6 63.4±3.5 63.9±5.0 61.6±3.7 61.8±4.9 1.609治療后62.3±4.5 43.1±3.4a50.3±4.5b51.8±3.6b49.5±4.0b23.412＊＊LVVd（cm3）基礎(chǔ)值0.795±0.126 0.814±0.229 0.833±0.058 0.783±0.200 0.844±0.153 0.193治療后0.675±0.160 0.836±0.139 0.930±0.263 0.916±0.215 0.789±0.170 2.281 LVVs（cm3）基礎(chǔ)值0.066±0.023 0.049±0.026 0.050±0.023 0.053±0.016 0.056±0.018 0.830治療后0.044±0.021 0.173±0.049a0.136±0.061 0.119±0.035b0.119±0.042b9.204＊＊

Tab.2 Comparison of hemodynamic parameters after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表2 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 （n=8，±s）

Tab.2 Comparison of hemodynamic parameters after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表2 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較 （n=8，±s）

1 mmHg=0.133 kPa

組別假手術(shù)組模型組DAXXK-d組DAXXK-g組合心爽組F HR（次/min）358.2±25.8 390.4±44.6 404.6±60.1 408.8±63.2 394.4±41.9 1.321 SAP （mmHg）88.8±9.0 75.9±7.6 86.9±9.6 87.6±10.3 87.8±10.5 2.580 DAP （mmHg）68.4±10.3 54.4±13.7a62.6±13.2 60.9±11.2b70.5±4.8b2.652＊MAP （mmHg）78.6±6.1 64.6±8.8a75.8±9.7b73.4±7.1b79.1±10.2b3.834＊LVSP （mmHg）93.4±3.3 77.6±7.2a87.5±9.3b87.6±10.6b88.1±7.4b4.122＊＊LVEDP （mmHg）1.5±4.2 5.6±2.2a5.7±1.8 4.5±1.2 3.4±1.0 4.401＊＊+LVdp/dtmax（mmHg/s）4 514.9±995.8 3 308.0±964.6a3 857.8±813.7 4 322.8±452.6b4 290.4±645.5b2.924＊-LVdp/dtmax（mmHg/s）-4 490.9±507.2-2 946.7±878.9a-3 519.0±696.7-4 001.8±799.9b-3 830.0±457.5b5.570＊

2.4 各組炎癥因子、黏附因子比較 模型組缺血再灌注7 d后IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1水平均明顯升高。DAXXK-g組治療7 d后，與模型組比較IL-1β降低26.2%，IL-6降低24.8%，TNF-α降低30.2%，ICAM-1降低25.3%，VCAM-1降低25.2%（均P＜0.05），見(jiàn)表4。

Tab.3 Comparison of blood oxygen pressure and arterial oxygen saturation after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表3 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后p（O2）、血氧含量比較 （n=8，±s）

Tab.3 Comparison of blood oxygen pressure and arterial oxygen saturation after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表3 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后p（O2）、血氧含量比較 （n=8，±s）

?

2.5 各組對(duì)心肌組織凋亡率、Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)比較 光鏡顯微鏡下，正常細(xì)胞核顯藍(lán)色，凋亡細(xì)胞核呈深淺不一的棕褐色。假手術(shù)組少見(jiàn)陽(yáng)性凋亡細(xì)胞，模型組凋亡細(xì)胞較多，給藥組與模型組相比，凋亡細(xì)胞明顯減少，見(jiàn)圖1。模型組缺血再灌注后梗死周邊區(qū)心肌細(xì)胞凋亡率較假手術(shù)組明顯升高（P＜0.05）。與模型組相比，DAXXK-d組、DAXXK-g組凋亡率降低32.0%、44.5%，合心爽組亦使凋亡率降低40.0%（均P＜0.05）。心肌缺血再灌注后，模型組Bcl-2蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組明顯降低（P＜0.05）。與模型組相比DAXXK-g組給藥7 d后使降低的Bcl-2蛋白表達(dá)水平升高42.7%（P＜0.05）。模型組Bax蛋白表達(dá)水平較假手術(shù)組明顯增加（P＜0.05）。與模型組相比，DAXXK-g組使Bax蛋白表達(dá)水平降低77.6%（P＜0.05），合心爽組與模型組相比亦降低42.0%（P＜0.05），見(jiàn)表5。

Tab.4 Comparison of inflammatory cytokines after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表4 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后炎癥因子比較（n=8，ng/L，±s）

Tab.4 Comparison of inflammatory cytokines after myocardial ischemia-reperfusion injury between five groups表4 各組大鼠心肌缺血再灌注損傷后炎癥因子比較（n=8，ng/L，±s）

組別假手術(shù)組模型組DAXXK-d組DAXXK-g組合心爽組F IL-1β 9.36±1.28 14.07±2.90a10.81±3.22b10.39±3.30b11.02±3.70b2.760＊IL-6 36.73±14.25 55.67±11.62a41.45±8.71b41.85±6.51b44.26±8.92b3.742＊組別假手術(shù)組模型組DAXXK-d組DAXXK-g組合心爽組F TNF-α 66.74±13.63 97.09±23.89a80.89±27.28 67.74±17.43b80.32±18.77 2.821＊ICAM-1 32.12±7.51 44.63±11.61a41.44±7.93 33.32±4.49b38.06±11.25 2.803＊VCAM-1 381.6±94.2 520.1±153.3a450.2±82.9 389.0±52.0b479.7±99.8 2.701＊

Tab.5 Comparison of Bcl-2/bax protein expression and myocardial apoptosis between five groups表5 各組Bcl-2/bax蛋白表達(dá)及心肌組織細(xì)胞調(diào)亡水平的變化 （n=8，±s）

Tab.5 Comparison of Bcl-2/bax protein expression and myocardial apoptosis between five groups表5 各組Bcl-2/bax蛋白表達(dá)及心肌組織細(xì)胞調(diào)亡水平的變化 （n=8，±s）

組別假手術(shù)組模型組DAXXK-d組DAXXK-g組合心爽組F Bcl-2 （ng/g）7.96±1.54 1.31±0.62a2.92±2.12 4.15±1.67bc2.32±1.98 19.111＊＊Bax （ng/g）0.007±0.120 0.143±0.109a0.075±0.046 0.032±0.011b0.083±0.035b7.042＊＊凋亡率（%）0.38±0.29 35.88±5.15a24.41±2.25b19.91±4.49b21.54±5.40b278.160＊＊

3 討論

心肌缺血再灌注損傷是由多種因素造成，確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。多項(xiàng)基礎(chǔ)研究結(jié)果顯示，心肌代謝障礙、氧自由基產(chǎn)生過(guò)多、鈣超載、中性粒細(xì)胞聚積、內(nèi)皮功能受損、細(xì)胞凋亡等均可直接參與心肌缺血再灌注［4-5］。DAXXK是由從藥用植物中提取的甾體總皂苷精制而成，對(duì)于治療心肌缺血再灌注損傷有較好療效。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，DAXXK治療給藥，證實(shí)其可以有效地改善模型大鼠心臟收縮功能和舒張功能，治療7 d后與模型組相比，使受損的收縮、舒張功能明顯增加，表現(xiàn)為FS、±LVdp/dtmax增加，同時(shí)糾正擴(kuò)張的心臟構(gòu)型，改善心臟重塑，擴(kuò)張的收縮期左室腔體積明顯縮小。DAXXK治療給藥，亦可增加動(dòng)脈血p（O2）、血氧含量，提示其可能通過(guò)改善心肌缺血再灌注損傷時(shí)的心肺功能，改善呼吸癥狀。

Fig.1 Typical illustrations of myocardial apoptosis after myocardial ischemia-reperfusion injury in five groups（TUNEL staining，×200）圖1 各組心肌缺血再灌注損傷后心肌組織細(xì)胞凋亡的典型圖例（TUNEL染色，×200）

在缺血缺氧的刺激下，心肌細(xì)胞合成、分泌IL-1β、TNF-α，IL-1β能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)其表達(dá)ICAM-1、VCAM-1。TNF-α通過(guò)多種途徑促進(jìn)炎性心肌的損傷，增加心肌凋亡的程度，擴(kuò)大心肌細(xì)胞的丟失量，參與心室重構(gòu)，使心功能惡化，加重心肌缺血再灌注損傷［6］。ICAM-1、VCAM-1的升高被認(rèn)為是內(nèi)皮細(xì)胞活化和炎癥的標(biāo)志［7］。本研究顯示，DAXXK-g組較模型組可抑制IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1，減輕了炎癥損傷，提示其作用途徑與IL-1β、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1有關(guān)。

心肌缺血再灌注損傷后將激活細(xì)胞凋亡機(jī)制，大量的細(xì)胞凋亡將導(dǎo)致心肌進(jìn)一步壞死。本實(shí)驗(yàn)從Bcl-2、Bax兩方面進(jìn)行研究，探討DAXXK抗心肌細(xì)胞凋亡作用。Bcl-2通過(guò)阻止細(xì)胞色素的釋放而發(fā)揮抗凋亡作用，此外，還可通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)的氧化還原平衡，降低活性達(dá)到抗凋亡作用［8］。Bax可以形成線粒體外膜的孔，導(dǎo)致膜電位降低和凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）及細(xì)胞色素C（Cyt C）的外流，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［9］。當(dāng)Bax表達(dá)占優(yōu)勢(shì)時(shí)促進(jìn)細(xì)胞凋亡，而B(niǎo)cl-2表達(dá)占優(yōu)勢(shì)時(shí)阻止細(xì)胞死亡［4］。本研究結(jié)果證實(shí)DAXXK-g組可增加Bcl-2，降低Bax的含量，從而減少細(xì)胞凋亡，提示DAXXK抑制細(xì)胞凋亡的機(jī)制與Bcl-2、Bax有關(guān)。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大鼠心肌缺血再灌注損傷模型預(yù)防給予DAXXK能明顯抗氧化、抑制心肌細(xì)胞凋亡并改善血管內(nèi)皮功能［10］。本實(shí)驗(yàn)采用治療給藥的方式，與文獻(xiàn)報(bào)道的預(yù)防給藥實(shí)驗(yàn)方案相比，其優(yōu)點(diǎn)在于對(duì)心肌缺血再灌注損傷模型構(gòu)建成功，以及心肌缺血損傷的程度均有良好的預(yù)后判斷性，因此藥物作用的模式與臨床更為一致。對(duì)于地奧心血康降低過(guò)氧化脂質(zhì)、改善心肌能量代謝等機(jī)制在本模型以及給藥方案上還需進(jìn)一步研究。

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（2014-09-09收稿 2015-01-09修回）

（本文編輯 李國(guó)琪）

Therapeutic effects of Di'ao Xinxuekang on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats

ZHENG Haijuan1，2，WANG Weiting2，HAO Chunhua，ZHAO Zhuanyou2，TANG Lida2△
1 Tianjin Medical University，Basic Medical College，Tianjin 300070，China；2 Tianjin Institution for New Drug Assessment Ltd
△Corresponding Author E-mail:tangld@tjipr.com

Objective To observe the therapeutic effect of Di'ao Xinxuekang（DAXXK）on myocardial ischemia-reperfusion injury in rats，and to explore its mechanisms.Methods The myocardial ischemia-reperfusion injury model was established by the ligation of descending coronary artery in rats.Then animals after the modeling were randomized into model group，DAXXK-d（31.5 mg/kg）group，DAXXK-g（63.0 mg/kg）group and Diltiazem（24.8 mg/kg）group.A separate sham group was used as control.The treatment group was given DAXXK once a day for 7 days.Cardiac function and cardiac configuration were measured by color Doppler ultrasound diagnostic method.Hemodynamics was measured by Millar catheter method.The arterial oxygen saturation and blood oxygen pressure were measured by i-STAT 300 blood gas analyzer.Inflammatory cytokines interleukin（IL）-1β，IL-6，tumor necrosis factor（TNF）-α，adhesion molecules VCAM-1，ICAM-1，and apoptosis-related protein Bcl-2，Bax were detected by ELISA.Myocardial apoptosis was measured using TUNEL method.Results Compared with model group，the left ventricular fractional shortening（FS），the systolic and diastolic function were improved，and the left ventricular pressure maximum rise/fall rates（±LVdp/dtmax）were increased，in DAXXK group.DAXXK improved lung function，increased arterial oxygen pressure and oxygen content.The inflammatory cytokines IL-1β，IL-6，TNF-α and adhesion molecules ICAM-1 and VCAM-1 were decreased in DAXXK group.The myocardial swelling and inflammatory infiltration were relieved，myocardial apoptosis was reduced，the expression of Bcl-2 protein was increased and the expression of Bax protein was decreased in DAXXK group.Conclusion DAXXK can protect myocardial ischemiareperfusion injury，which involved in the inhibition of apoptosis and reduction of inflammatory cytokines.

myocardial reperfusion injury；heart function tests；cell adhesion molecules；apoptosis；inflammatory cytokines；Di'ao Xinxuekang（DAXXK）

R541，R285.5

A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.05.012

1天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（郵編300070）；2天津藥物研究院新藥評(píng)價(jià)有限公司

鄭海娟（1988），女，碩士研究生，主要從事心血管藥理學(xué)研究

△E-mail：tangld@tjipr.com