馬春梅，王 娟

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 徐州 221006)

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紫外-可見分光光度法測(cè)定肝速康片中齊墩果酸含量

馬春梅，王 娟

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 徐州 221006)

目的：建立肝速康片中齊墩果酸含量的測(cè)定方法。方法：以齊墩果酸為標(biāo)準(zhǔn)品，采用紫外-可見分光光度法，檢測(cè)波長(zhǎng)為548nm，測(cè)定肝速康片中齊墩果酸的含量。結(jié)果：齊墩果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.045 1x+0.013 6，線性相關(guān)系數(shù)r=0.999 7，結(jié)果表明齊墩果酸在3.36～16.8μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與其吸收值呈良好的線性關(guān)系；該測(cè)定方法的平均回收率和RSD分別為98.04%和1.37%。結(jié)論：該方法精密度、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性均良好，可滿足肝速康片質(zhì)量控制的要求，可用于齊墩果酸含量的測(cè)定。

紫外-可見分光光度法；齊墩果酸；肝速康片

肝速康片由齊墩果酸和云芝多糖組成，其味澀、微苦，齊墩果酸為其主要有效成分，臨床主要用于急慢性、遷延性肝炎的治療[1]。齊墩果酸為五環(huán)三萜類化合物，主要從青葉膽、女貞子等天然藥物中提取而來。藥理學(xué)研究表明，其具有護(hù)肝、抗炎、強(qiáng)心、利尿、抗腫瘤、促進(jìn)肝細(xì)胞再生、抑制肝纖維增生、降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性等作用[2]。由于齊墩果酸是肝速康片的主要有效成分，其含量多少?zèng)Q定著肝速康片是否符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本研究采用紫外-分光光度法測(cè)定肝速康片中齊墩果酸的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析UV-T6)。

1.2 試藥

齊墩果酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：201206)；肝速康片(本校實(shí)驗(yàn)室自制)； 香草醛(分析級(jí))、冰醋酸(分析級(jí))、氯仿(分析級(jí))，水為重蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

于105℃下對(duì)齊墩果酸對(duì)照品進(jìn)行充分干燥，精密稱定10.1mg，用少量甲醇溶液溶解后轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，再用甲醇稀釋至刻度，搖勻使其完全溶解，配制成濃度為1.01mg/mL的對(duì)照品溶液備用。

分別精密量取濃度為1.01mg/mL的齊墩果酸對(duì)照品溶液0、80、160、240、320、400μL，置于干燥潔凈的試管中，放置室溫下完全揮盡溶劑后，于每支試管中加入高氯酸溶液3.2mL、 5%香草醛-冰醋酸溶液，置于70℃水浴上加熱15min，自然放冷后，加入冰醋酸20mL，搖勻。參照《中國(guó)藥典》(2010)附錄中的分光光度法試驗(yàn)要求，于548nm波長(zhǎng)處測(cè)定不同濃度對(duì)照品溶液的吸光度，并進(jìn)行空白試驗(yàn)。以齊墩果酸的不同濃度為橫坐標(biāo)，吸收度A為縱坐標(biāo)，繪制其標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=0.045 1x+0.013 6，相關(guān)系數(shù)為r=0.999 7，表明齊墩果酸在3.36～16.8μg·mL-1濃度范圍內(nèi)與吸收值呈良好的線性關(guān)系。

2.2 含量測(cè)定方法[3]

取3批肝速康片，每批20片，研成細(xì)粉后，精密稱取相當(dāng)于10mg齊墩果酸的細(xì)粉約0.13g，加入20mL氯仿充分溶解后超聲15min，室溫放置冷卻后，用濾紙濾過，收集殘?jiān)?，再?0mL氯仿洗滌3次。將濾液與洗滌液混合均勻后置于水浴上蒸干，加入5mL甲醇溶液，于水浴上加熱并充分溶解，室溫放冷后轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，再加入甲醇溶液至刻度，混勻。精密吸取上述溶液60μL，按照對(duì)照品溶液配制方法，自“置于干燥潔凈的試管”起同法測(cè)定其吸收度，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算齊墩果酸含量。結(jié)果見表1。

表1 樣品齊墩果酸含量測(cè)定結(jié)果

2.3 精密度試驗(yàn)

取肝速康片粉末約0.13g，精密稱定，按照“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在相同條件下連續(xù)測(cè)定5次，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。計(jì)算得到RSD為0.36%，表明該方法精密度良好。結(jié)果見表2。

表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取肝速康片細(xì)粉6份，精密稱定，按照“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在相同條件下采用紫外-分光光度法測(cè)定吸收度，并計(jì)算齊墩果酸含量，結(jié)果表明肝速康片中齊墩果酸平均含量為18.214mg/片，RSD為0.48%，表明該方法重復(fù)性良好。結(jié)果見表3。

表3 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

2.5 回收率試驗(yàn)

根據(jù)加樣回收率測(cè)定法的要求，精密稱定同批樣品6份，測(cè)定其中齊墩果酸含量，依次精密加入齊墩果酸對(duì)照品適量，采用紫外-分光光度法測(cè)定齊墩果酸含量，計(jì)算加樣回收率[4]。經(jīng)測(cè)定，齊墩果酸的平均回收率為98.04%，RSD為1.37%，結(jié)果表明該方法回收率符合含量測(cè)定方法要求。結(jié)果見表4。

表4 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液適量，分別于放置0、1、3、6、12、24h后各測(cè)定1次，吸光度依次為0.495、0.492、0.492、0.494、0.491、0.493，RSD為0.29%。結(jié)果表明該供試品溶液的吸光性能在24h內(nèi)保持穩(wěn)定。

3 討論

《中國(guó)藥典》中肝速康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下采用的是回流提取法，本研究在預(yù)實(shí)驗(yàn)處理供試品時(shí)，比較了超聲提取法和回流提取法的提取效率，結(jié)果表明，二者提取效果相當(dāng)。由于超聲提取法簡(jiǎn)便易行，且有機(jī)試劑用量少，故以其為提取方法。

本研究采用紫外-可見分光光度法測(cè)定肝速康片中齊墩果酸的含量，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、回收率均符合藥典中含量測(cè)定的相關(guān)要求，為肝速康片的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].第1部.北京:北京化學(xué)工業(yè)出版社,2010.

[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中藥成方制劑[S].第13冊(cè).WS3-B-2527-97.

[3] 邢波,楊林,杜英俊.肝速康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].黑龍江醫(yī)學(xué),2003,16(4):253-254.

[4] 張橋,沈娟,柳于介,等.HPLC法測(cè)定凌霄花中麥角甾醇、齊墩果酸和熊果酸的含量[J].中國(guó)中藥雜志,2011,36(8):1043-1045.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2015-04-02

馬春梅(1976-)，女，江蘇省徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院講師，研究方向?yàn)獒t(yī)藥教學(xué)。

R284.1

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1673-2197(2015)16-0040-02

10.11954/ytctyy.201516018