古智兵

（眉山市人民醫(yī)院兒科，四川620010）

AT-Ⅲ、CD5L 及C3對(duì)小兒哮喘病情及預(yù)后的評(píng)估

古智兵

（眉山市人民醫(yī)院兒科，四川620010）

目的觀察抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）、CD5抗原樣蛋白（CD5L）、補(bǔ)體C3（C3）蛋白表達(dá)水平對(duì)小兒哮喘病情及預(yù)后的影響。方法選擇2011年1月至2012年6月80例隨訪2年的穩(wěn)定期哮喘患兒（間歇發(fā)作20例、輕度持續(xù)發(fā)作20例、中度持續(xù)發(fā)作20例、重度持續(xù)發(fā)作20例）和20例健康兒童進(jìn)行研究。采集各組研究對(duì)象入組時(shí)及隨訪結(jié)束時(shí)的血漿樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行血漿AT-Ⅲ、CD5L及C3表達(dá)水平檢測(cè)，觀察并比較檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果AT-Ⅲ隨病情加重表達(dá)水平逐漸升高，CD5L、C3隨病情加重表達(dá)水平逐漸降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；AT-Ⅲ差值隨轉(zhuǎn)歸加重呈升高趨勢(shì)，CD5L差值隨轉(zhuǎn)歸加重呈下降趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C3差值無(wú)明顯變化。結(jié)論AT-Ⅲ、CD5L及C3表達(dá)水平與小兒哮喘病情有關(guān)，AT-Ⅲ、CD5L同時(shí)還可作為判斷預(yù)后的指標(biāo)，對(duì)臨床小兒哮喘預(yù)后的判斷具有一定作用。

兒童； 哮喘； 預(yù)后； 抗凝血酶Ⅲ； 補(bǔ)體C3

支氣管哮喘是一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病，是影響兒童健康的一種最常見(jiàn)疾病。哮喘對(duì)世界各國(guó)來(lái)說(shuō)均是一種沉重的社會(huì)負(fù)擔(dān)，全世界約有3億人罹患哮喘，每年因哮喘死亡人數(shù)達(dá)25萬(wàn)人[1-2]。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)每年因哮喘致傷殘者達(dá)1 500萬(wàn)人，占全球疾病負(fù)擔(dān)的1%。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)兒童哮喘發(fā)病率呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)，尤其是近10年增長(zhǎng)尤為迅速，增長(zhǎng)了約50%。小兒哮喘已成為影響我國(guó)兒童健康的疾病之一，小兒哮喘的診治已成為家庭及社會(huì)的沉重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，我國(guó)哮喘兒童年均診療費(fèi)為30 000元人民幣[3]。哮喘不但給患兒家庭帶來(lái)沉重經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)；同時(shí)，哮喘對(duì)患兒及家庭更是一種殘酷的精神折磨。哮喘的反復(fù)發(fā)作不但嚴(yán)重影響兒童生理及心理健康，而且對(duì)其生活質(zhì)量均將產(chǎn)生遠(yuǎn)期的負(fù)面影響。由于哮喘的病因十分復(fù)雜，遺傳傾向及眾多環(huán)境因素對(duì)哮喘的發(fā)作均可能具有重要的誘發(fā)作用；同時(shí)，哮喘的誘因則因民族、性別而異，甚至因人而異，因此，盡管對(duì)哮喘的研究已有上百年的歷史，但哮喘的致病機(jī)制至今仍尚未闡明[4]。雖然，對(duì)哮喘的防控取得了一定的成效，但最近40年全球哮喘發(fā)病率卻呈顯著上升趨勢(shì)。目前，兒童哮喘的診斷和評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)主要依賴臨床癥狀和肺功能檢查等指標(biāo)，尚缺乏診斷和評(píng)估疾病的客觀標(biāo)準(zhǔn)。目前，抗凝血酶Ⅲ（antithrombin-Ⅲ，AT-Ⅲ）、CD5抗原樣蛋白（CD5 antigen-like，CD5L）、補(bǔ)體 C3（complement，C3）3個(gè)指標(biāo)是研究較多的指標(biāo)，因此，本研究擬通過(guò)觀察AT-Ⅲ、CD5L、C3蛋白表達(dá)水平對(duì)小兒哮喘病情及預(yù)后的影響，從而為小兒哮喘診療及預(yù)后的判定指標(biāo)提供臨床幫助，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選擇2011年1月至2012年6月在本院治療、隨訪的哮喘患兒80例[間歇發(fā)作20例（間歇組）、輕度持續(xù)發(fā)作20例（輕度持續(xù)組）、中度持續(xù)發(fā)作20例（中度持續(xù)組）、重度持續(xù)發(fā)作20例（重度持續(xù)組）]和健康兒童20例（對(duì)照組）為研究對(duì)象，其中男52例，女48例。所有患兒的家屬均簽署了知情同意書(shū)?；純浩渌闆r無(wú)特殊。

1.1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡3～8歲，處于哮喘穩(wěn)定期，無(wú)其他系統(tǒng)疾病，根據(jù)2010年全球哮喘防治創(chuàng)議方案進(jìn)行病情嚴(yán)重程度分組（間歇發(fā)作、輕度持續(xù)發(fā)作、中度持續(xù)發(fā)作、重度持續(xù)發(fā)作）。排除標(biāo)準(zhǔn)：有其他除呼吸系統(tǒng)疾病外的疾病，懷疑或已診斷為活動(dòng)性肺結(jié)核，近2周內(nèi)有呼吸道感染者。

1.2 方法

1.2.1 試劑 AT-Ⅲ、CD5L、補(bǔ)體C3酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒均為上海研域化學(xué)試劑有限公司產(chǎn)品。

1.2.2 檢測(cè)方法 ELISA是一項(xiàng)成熟的免疫分析技術(shù)。其根據(jù)待測(cè)蛋白與固定相載體表面的抗原或抗體發(fā)生相互反應(yīng)，結(jié)合酶標(biāo)記的抗原或抗體進(jìn)一步檢測(cè)其蛋白水平的一種方法。由于該法具有良好的靈敏性和特異性，可對(duì)待測(cè)蛋白進(jìn)行定性、定量檢測(cè)，因此，廣泛應(yīng)用于臨床相關(guān)疾病的檢驗(yàn)。具體操作方法嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。

1.2.3 觀察指標(biāo)及機(jī)制 AT-Ⅲ是由肝臟、血管內(nèi)皮細(xì)胞及巨核細(xì)胞合成的一種糖蛋白，是體內(nèi)最重要的血栓抑制因子及抗凝血因子之一，參與體內(nèi)凝血及抗凝過(guò)程；C3是補(bǔ)體激活途徑的中心環(huán)節(jié)，在促進(jìn)哮喘的炎癥及氣道高反應(yīng)性方面具有一定作用；CD5L/凋亡抑制因子6是富含半胱氨酸清道夫受體超家族成員，其在淋巴組織的巨噬細(xì)胞上表達(dá)，與血清中的免疫球蛋白IgM結(jié)合。因其與免疫系統(tǒng)粒-單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞結(jié)合，提示其可能在人體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。

1.2.4 轉(zhuǎn)歸及隨訪 治療2年以上患兒無(wú)哮喘發(fā)作視為完全緩解。未完全緩解者按照哮喘控制標(biāo)準(zhǔn)歸類(lèi)為好轉(zhuǎn)、持續(xù)和加重。采用電話及門(mén)診復(fù)診的方法進(jìn)行隨訪，電話隨訪時(shí)間為3個(gè)月1次，1年隨訪4次。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對(duì)各變量分別定義及賦值。計(jì)量資料以±s表示，正態(tài)分布者兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。非正態(tài)分布者組間比較采用Wilcoxon非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-Wallis非參數(shù)檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組研究對(duì)象AT-Ⅲ、CD5L、C3檢測(cè)結(jié)果比較AT-Ⅲ隨病情加重表達(dá)水平逐漸升高，CD5L、C3隨病情加重表達(dá)水平逐漸降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 各組研究對(duì)象AT-Ⅲ、CD5L、C3檢測(cè)結(jié)果比較（±s）

表1 各組研究對(duì)象AT-Ⅲ、CD5L、C3檢測(cè)結(jié)果比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與間歇組比較，bP＜0.05；與輕度持續(xù)組比較，cP＜0.05；與中度持續(xù)組比較，dP＜0.05。

組別n AT-Ⅲ（μg/mL）CD5L（pg/mL）C3（g/L）對(duì)照組間歇組輕度持續(xù)組中度持續(xù)組重度持續(xù)組20 20 20 20 20 418.7±15.3 421.9±22.8a428.8±32.3ab443.5±41.1abc455.5±49.6abcd191.3±21.1 198.4±20.1a187.7±32.2ab173.1±33.5abc161.2±25.8abcd0.91±0.16 0.98±0.18a0.87±0.11ab0.79±0.12abc0.68±0.21abcd

2.2 不同轉(zhuǎn)歸哮喘患兒AT-Ⅲ、CD5L、C3差值比較 2年隨訪期間80例哮喘患兒中完全緩解10例，好轉(zhuǎn)42例，持續(xù)15例，加重13例。AT-Ⅲ差值隨轉(zhuǎn)歸加重呈升高趨勢(shì)，CD5L差值隨轉(zhuǎn)歸加重呈下降趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），C3差值無(wú)明顯變化，見(jiàn)表2。

表2 不同轉(zhuǎn)歸哮喘患兒AT-Ⅲ、CD5L、C3差值比較（±s）

表2 不同轉(zhuǎn)歸哮喘患兒AT-Ⅲ、CD5L、C3差值比較（±s）

注：與完全緩解組比較，aP＜0.05；與好轉(zhuǎn)組比較，bP＜0.05；與持續(xù)組比較，cP＜0.05。

組別n AT-Ⅲ差值（μg/mL）CD5L差值（pg/mL）C3差值（g/L）完全緩解組好轉(zhuǎn)組持續(xù)組加重組10 42 15 13 -5.7±13.3 -3.9±13.5a1.8±20.1ab5.9±22.3abc5.6±12.8 5.6±12.8a-7.1±13.1ab-8.6±14.8abc0.02±0.09 0.87±0.10 0.03±0.11 -0.02±0.13

3 討 論

目前，全世界哮喘人數(shù)達(dá)3億人，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，預(yù)計(jì)至2025年，哮喘人數(shù)將升至4億[5]。我國(guó)小兒哮喘防控形勢(shì)一直比較嚴(yán)峻，小兒哮喘人數(shù)也呈逐年上升趨勢(shì)，2006年我國(guó)哮喘兒童已達(dá)1 000萬(wàn)，數(shù)量還在逐年攀升[6]。小兒哮喘對(duì)家長(zhǎng)及社會(huì)均造成了很大影響，哮喘反復(fù)發(fā)作的兒童會(huì)影響其生長(zhǎng)、發(fā)育；同時(shí)，因哮喘急性發(fā)作、住院治療而導(dǎo)致哮喘兒童的誤學(xué)率明顯增加，其成年后的健康狀況和就業(yè)等均會(huì)受到不同程度影響。還有報(bào)道稱，哮喘患兒容易出現(xiàn)自卑、自閉等心理疾病，給家庭、社會(huì)均帶來(lái)巨大心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此，兒童哮喘的防控不容忽視[7]。目前，小兒哮喘的診斷和評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)大部分依賴臨床表現(xiàn)和肺功能檢查等指標(biāo)，沒(méi)有評(píng)估和診斷疾病的客觀指標(biāo)。臨床上通常以臨床癥狀、肺功能及療效衡量疾病輕重及治療情況，但對(duì)哮喘兒童，絕大多數(shù)穩(wěn)定期哮喘患兒肺功能正常，相關(guān)檢查提示即使部分患兒肺功能正常，仍持續(xù)存在小氣道慢性炎癥，而該種慢性炎癥的持續(xù)存在是導(dǎo)致小兒哮喘反復(fù)發(fā)作和病情進(jìn)展導(dǎo)致控制不良的基礎(chǔ)，當(dāng)肺功能發(fā)生改變時(shí)其氣道炎癥基本上已達(dá)到不可逆程度[8]。因此，對(duì)哮喘兒童，單純依賴臨床表現(xiàn)及肺功能檢查評(píng)估病情和對(duì)疾病進(jìn)行預(yù)后控制尚不夠確切，目前，亟須能早期提示病情輕重和疾病控制情況更為精準(zhǔn)和敏感的客觀指標(biāo)，以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展。因此，研究發(fā)現(xiàn)對(duì)小兒哮喘病情及預(yù)后的客觀指標(biāo)具有重大意義。

生物靶標(biāo)是一種可供客觀測(cè)定和評(píng)價(jià)的一種普通生理、病理或治療過(guò)程中的某種特征性的指標(biāo)，通過(guò)對(duì)其檢測(cè)可了解機(jī)體所處的生物學(xué)過(guò)程中的進(jìn)程。檢測(cè)針對(duì)某種疾病相關(guān)的標(biāo)志物，可提示疾病相關(guān)信息[9]。生物靶標(biāo)可用于疾病的輔助診斷、病情進(jìn)展的監(jiān)測(cè)和預(yù)后及治療反應(yīng)的評(píng)估、疾病的預(yù)防等，某些生物靶標(biāo)還可用于篩查高風(fēng)險(xiǎn)疾病，從而進(jìn)行早期預(yù)防及治療；還可用于疾病的生物治療，根據(jù)疾病相關(guān)的特異性生物靶標(biāo)，開(kāi)展針對(duì)性的生物學(xué)治療。目前，針對(duì)小兒哮喘的生物學(xué)標(biāo)志物還很局限，而AT-Ⅲ、CD5L及C3是目前研究較多的生物學(xué)標(biāo)志物[10]。因此，作者主要選擇這3種生物學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AT-Ⅲ隨病情加重表達(dá)水平逐漸升高，CD5L、C3隨病情加重表達(dá)水平逐漸降低；AT-Ⅲ差值隨轉(zhuǎn)歸加重有升高趨勢(shì)，CD5L差值隨轉(zhuǎn)歸加重有下降趨勢(shì)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），不同轉(zhuǎn)歸哮喘患兒C3差值無(wú)明顯變化。說(shuō)明AT-Ⅲ、CD5L及C3對(duì)小兒哮喘的病情評(píng)估及預(yù)后具有一定意義。但本研究小兒哮喘病例數(shù)相對(duì)較少，具有一定的局限性，還有必要擴(kuò)大樣本量進(jìn)行研究證實(shí)。

總之，AT-Ⅲ、CD5L及C3表達(dá)水平與小兒哮喘病情有關(guān)，AT-Ⅲ、CD5L同時(shí)還可作為判斷預(yù)后的指標(biāo)，對(duì)小兒哮喘預(yù)后的判斷具有一定作用。但尚具有繼續(xù)進(jìn)行臨床試驗(yàn)驗(yàn)證的必要性，以進(jìn)一步指導(dǎo)臨床診治。

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：1009-5519（2015）11-1697-03

2015-01-16）

古智兵（1966-），男，四川眉山人，副主任醫(yī)師，主要從事兒內(nèi)科學(xué)的研究；E-mail：1518070439@qq.com。