任高社
(河北省邯鄲縣農(nóng)牧局,河北邯鄲 056001)
兔瘟自家滅活疫苗的制作
任高社
(河北省邯鄲縣農(nóng)牧局,河北邯鄲 056001)
兔瘟是由兔出血性病毒引起的一種急性、熱性、敗血性和毀滅性的傳染病,又稱兔病毒性出血癥、出血性肺炎。本病在1984年首次在我國發(fā)現(xiàn),兔場一旦發(fā)生該病,可能會(huì)使兔群全群覆滅。目前我國尚未研制出成功的弱毒疫苗,現(xiàn)在主要采用組織滅活苗進(jìn)行免疫預(yù)防。兔瘟疫苗主要根據(jù)出血性病毒經(jīng)甲醛處理后可喪失毒力而保有良好的免疫原性,接種后兔能很快地引起免疫應(yīng)答產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力的這一特性研制而成,現(xiàn)將兔瘟自家滅活疫苗的制作介紹如下:
1.1 病料的準(zhǔn)備
無菌采集發(fā)病典型兔瘟的病兔的肝臟、腎臟和脾臟。
1.2 甲醛、生理鹽水
將采集的兔瘟病兔的肝臟、腎臟和脾臟,-20℃冰凍保存,制作前反復(fù)凍融3次,按1:5(g/mL)加入生理鹽水,并用搗碎機(jī)制成勻漿,然后用4層紗布過濾,去渣后加入0.4%甲醛,搖勻后,放入37℃恒溫箱中滅活48~72h,每間隔4h搖動(dòng)一次,然后分裝,置4~8℃保存。
3.1 細(xì)菌檢驗(yàn)
疫苗制成后,分別接種在普通瓊脂、血液瓊脂和肉肝湯培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)48h,檢查有無細(xì)菌生長;如無菌生長,說明制苗過程無污染。
3.2 安全性檢驗(yàn)
取未免疫過兔瘟疫苗的兔10只,其中5只每只注射滅活苗1mL,另5只不注射苗為對(duì)照,連續(xù)觀察一周,有無異常反應(yīng)。
3.3 免疫效果檢驗(yàn)
用自制疫苗免疫兔15d后,用兔瘟強(qiáng)毒攻擊,檢驗(yàn)疫苗的保護(hù)率。
以上各項(xiàng)檢驗(yàn)合格,則制苗成功,可以用來作兔瘟免疫接種用。
10.3969/J.ISSN.1671-6027.2015.05.010