魏長征 呂曉云宋連猛 裴海霞 張倩倩 楊 杰

（蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，甘肅 蘭州 730000）

·研究報(bào)告·

丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液對鎘致腎損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究*

魏長征 呂曉云△宋連猛 裴海霞 張倩倩 楊 杰

（蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院中西醫(yī)結(jié)合研究所，甘肅 蘭州 730000）

目的觀察丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液對鎘致腎損傷的保護(hù)作用并探討其可能的作用機(jī)制。方法40只Wistar大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、亞硒酸鈉組（0.05 mg/kg）、丹參酮低（4 mg/kg）、高（8 mg/kg）劑量組。鎘染毒4周后，觀察大鼠基本狀況，檢測大鼠血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及其尿β2-微球蛋白（β2-MG）。于造模成功后，空白組、模型組給予腹腔注射0.9%氯化鈉注射液，亞硒酸鈉組給予腹腔注射亞硒酸鈉溶液，丹參酮低、高劑量組分別給予4 mg/kg和8 mg/kg劑量丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液治療。檢測血液中的Scr、BUN、SOD、MDA、尿β2-MG含量，腎皮質(zhì)、血、尿含鎘量，腎臟皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率及Bax蛋白表達(dá)水平。結(jié)果染毒后模型組、亞硒酸鈉組、丹參酮低劑量組、丹參酮高劑量組大鼠體質(zhì)量、Scr、BUN、尿β2-MG、SOD及MDA與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。采用丹參酮ⅡA-磺酸鈉治療后，丹參酮低劑量組、丹參酮高劑量組與模型組相比，血Scr、BUN、尿β2-MG、腎、血含鎘量、MDA、SOD含量、腎臟皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率及Bax蛋白表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論丹參酮低、高劑量組對鎘致腎臟損傷具有保護(hù)作用，其保護(hù)機(jī)制可能與抗氧化應(yīng)激有關(guān)。

丹參酮 Ⅱ A磺酸鈉 鎘 腎損傷 凋亡 抗氧化應(yīng)激

鎘（Cd）是原子序列為48的一種重金屬，可通過污染土壤、水源、空氣的方式，經(jīng)口、鼻、皮膚等途徑在人體內(nèi)蓄積，對肝、腎、肺等器官產(chǎn)生損傷。鎘在人體內(nèi)排泄緩慢，其半衰期約10~30年，為已知在體內(nèi)最易蓄積的毒物［1-2］。鎘進(jìn)入人體后，約1/3~1/2的鎘蓄積于肝和腎［3］，其中腎臟是低劑量慢性鎘中毒最重要的受損器官，研究證實(shí)鎘誘導(dǎo)的腎損傷的主要作用部位是腎近曲小管，會影響腎小管的重吸收功能［4］。一般認(rèn)為鎘所致的腎損傷是不可逆的，目前無有效的治療方法［5］，但有業(yè)者認(rèn)為隨著鎘的接觸量和時間的減少或停止，腎損傷可以逐漸恢復(fù)［6］。究其腎毒性的機(jī)制，可能與氧化損傷、鎘-鈣的相互作用、引發(fā)腎臟細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)基因異常表達(dá)等方面有關(guān)。鑒于鎘中毒的研究中，硒可有效拮抗鎘致腎損傷，但由于其治療量與中毒量很接近，尚不能滿足臨床應(yīng)用。近年研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液（STS）具有改善腎臟微循環(huán)、保護(hù)腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞、清除氧自由基、抗脂質(zhì)氧化、防治腎臟小球硬化等作用［7］。但有關(guān)STS防治鎘致腎損傷研究未見報(bào)道，基于以上背景，筆者就STS對鎘致腎損傷的作用及其機(jī)制進(jìn)行研究。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 試劑與藥物 STS（上海第一生物藥業(yè)有限公司），氯化鎘（分析純，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司），亞硒酸鈉（分析純，上海中秦化學(xué)試劑有限公司）。血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二酫（MDA）試劑盒（南京建成生物工程研究所）。血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）試劑盒（南京建成生物工程研究所）。β2-微球蛋白（蘭大一院送檢），Bax蛋白一抗兔抗大鼠（bioworld公司）。清潔級wistar大鼠40只，雌雄各半，體質(zhì)量（160±20）g，由蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號：SCXK（甘）2009-0004。原子吸收法分光光度計(jì)石（德國耶拿分析儀器股份公司）；721分光光度計(jì) （上海菁華科技儀器有限公司）；全自動生化分析儀（型號Cobas c31）；流式細(xì)胞儀（美國Beekman coulter公司）；顯微鏡（德國Olympus公司）；超凈工作臺（蘇凈集團(tuán)安泰公司）。

1.2 分組與給藥 40只清潔級Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后，按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組、模型組、亞硒酸鈉組、丹參酮低劑量組、丹參酮高劑量組，每組8只，空白組腹腔注射0.9%氯化鈉注射液，其余組腹腔注射氯化鎘溶液1.4 mg/kg，每周7次，共4周。造模4周后，觀察大鼠基本狀況，檢測大鼠Scr、BUN、SOD、MDA及尿β2-MG含量。造模成功后，空白組、模型組給予腹腔注射0.9%氯化鈉注射液，亞硒酸鈉組給予腹腔注射亞硒酸鈉溶液0.05 mg/kg，丹參酮低、高劑量組分別給予STS 4 mg/kg、8 mg/kg治療。實(shí)驗(yàn)?zāi)┦杖⊙?、尿，并留取腎組織，檢測Scr、BUN，SOD、MDA、尿β2-MG、腎皮質(zhì)、血、尿鎘含量、腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率及皮質(zhì)Bax蛋白表達(dá)水平。

1.3 標(biāo)本采集與檢測 實(shí)驗(yàn)過程中，觀察大鼠一般狀況，每隔2周稱量大鼠體質(zhì)量，大鼠處死后取腎臟并稱重，計(jì)算腎臟質(zhì)量系數(shù)（mg/g）=（左側(cè)腎臟質(zhì)量+右側(cè)腎臟質(zhì)量）/2（mg）/大鼠體質(zhì)量（g）。分別于大鼠造模后、處死前用代謝籠收集24 h尿液，大鼠禁食禁水，測量尿量；隔天禁食不禁水，收集尿液-80℃冰箱保存待測β2-MG及鎘含量。分別于大鼠造模后、處死前，在乙醚麻醉下進(jìn)行眼底靜脈叢采集血樣，靜置1 h后，離心機(jī)轉(zhuǎn)速3000 rpm離心10 min，按試劑盒說明使用全自動生化分析儀測定Scr、BUN含量，使用分光光度計(jì)測定SOD、MDA含量，使用原子吸收法分光光度計(jì)石墨爐法檢測血鎘含量。于治療后，取血后行心臟0.9%氯化鈉注射液灌流，迅速摘取右側(cè)腎臟置于超凈工作臺，使用剪碎法收集細(xì)胞懸液，行流式細(xì)胞儀凋亡率檢測。迅速摘取左側(cè)腎臟，剝?nèi)グ?，行腎門縱切，一部分腎臟組織經(jīng)4%多聚甲醛溶液固定，石蠟包埋，3 μm切片，免疫組化S-P法檢測腎組織Bax蛋白表達(dá)。結(jié)果判斷方法：每組8張切片，每片切片在400倍視野下隨機(jī)選擇4個視野，陽性細(xì)胞分為弱陽性和強(qiáng)陽性，弱陽性指淺染的棕黃色或黃色，強(qiáng)陽性指較深的棕黃色或黃色，分別計(jì)算Bax弱陽性表達(dá)率和強(qiáng)陽性表達(dá)率，然后將4個視野的結(jié)果求平均值。另一部分腎臟組織剪取皮質(zhì)置于40 mL三角燒瓶中，加4 mL混合酸，燒瓶口覆以牛皮紙，浸泡過夜，至消化完全，置于電熱板上加熱，直至混合酸完全蒸發(fā)，加入5 mL蒸餾水，再次置于電熱板上進(jìn)行驅(qū)酸，最后稀釋至10 mL，設(shè)定石墨爐法的工作條件，檢測腎皮質(zhì)鎘含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以（±s）表示，各組采用單因素方差（one-way ANOVA）分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠治療后體質(zhì)量比較 見表1。經(jīng)治療后，模型組與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但與亞硒酸鈉、低、高劑量組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 各組大鼠不同階段體質(zhì)量、增加的體質(zhì)量比較（g，±s）

表1 各組大鼠不同階段體質(zhì)量、增加的體質(zhì)量比較（g，±s）

與空白對照組比較，*P＜0.05。

組別 n空白組 8模型組 8亞硒酸鈉組 8初始體質(zhì)量 造模后體質(zhì)量 治療后體質(zhì)量 體質(zhì)量增加1 5 5 . 1 0 ± 1 2 . 3 0 2 0 8 . 1 0 ± 5 3 . 0 0 2 4 4 . 2 0 ± 5 8 . 9 0 8 3 . 8 0 ± 4 4 . 4 0 1 5 0 . 5 0 ± 8 . 5 0 1 6 4 . 0 0 ± 1 6 . 0 0 1 9 2 . 2 0 ± 3 4 . 1 0*4 0 . 2 0 ± 3 7 . 1 0*1 6 0 . 7 0 ± 1 6 . 8 0 1 6 5 . 3 0 ± 2 1 . 6 0 2 0 4 . 9 0 ± 2 5 . 8 0 4 8 . 6 0 ± 3 4 . 8 0丹參酮低劑量組 8 1 6 5 . 0 0 ± 1 9 . 1 0 1 7 4 . 9 0 ± 2 7 . 5 0 2 2 4 . 8 0 ± 3 1 . 3 0 6 1 . 3 0 ± 3 4 . 5 0丹參酮高劑量組 8 1 4 9 . 1 0 ± 8 . 5 0 1 6 7 . 9 0 ± 1 8 . 9 0 2 1 8 . 1 0 ± 3 2 . 1 0 6 9 . 0 0 ± 4 9 . 3 0

2.2 各組大鼠腎臟質(zhì)量系數(shù)、尿量比較 見表2。大鼠腎臟質(zhì)量系數(shù)模型組、亞硒酸鈉組與空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05），丹參酮低、高劑量組與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），丹參酮高劑量組與模型組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。24 h尿量結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示：治療后模型組與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），丹參酮低、高劑量組與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.3 各組大鼠SOD、MDA含量比較 見表3。造模后模型組、亞硒酸鈉組、丹參酮低、高劑量組血清SOD、MDA含量與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01），治療后丹參酮低、高劑量組血清SOD、MAD含量與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05）。

表2 各組大鼠腎臟質(zhì)量系數(shù)、24 h尿量比較（±s）

表2 各組大鼠腎臟質(zhì)量系數(shù)、24 h尿量比較（±s）

與空白組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.01，△△P＜0.05。下同。

腎臟質(zhì)量系數(shù)（m g / g）組別n 治療后2 4 h尿量（m L）造模后3 . 4 1 5 ± 0 . 1 6 2 4 . 7 3 ± 1 . 1 2 4 . 2 8 9 ± 0 . 6 5 9**6 . 4 3 ± 0 . 4 2**亞硒酸鈉組 8 5 . 7 7 ± 1 . 1 7空白組 8 4 . 8 9 ± 1 . 3 7模型組 8 6 . 7 1 ± 0 . 5 6**3 . 9 7 2 ± 0 . 2 8 1*6 . 2 3 ± 0 . 3 5**丹參酮低劑量組 8 3 . 8 4 4 ± 0 . 2 9 3 6 . 2 6 ± 0 . 4 2**5 . 1 8 ± 0 . 6 8△丹參酮高劑量組 8 3 . 6 8 9 ± 0 . 3 9 7△△6 . 3 9 ± 0 . 4 9**5 . 1 6 ± 0 . 5 6△

表3 各組大鼠造模后與治療后SOD、MDA比較（±s）

表3 各組大鼠造模后與治療后SOD、MDA比較（±s）

M D A（μ m o l / L）造模后 治療后5 . 3 8 ± 0 . 9 4 5 . 9 8 ± 1 . 1 3 1 3 . 4 3 ± 1 . 0 5*1 1 . 1 0 ± 1 . 9 2亞硒酸鈉組 8 2 1 3 . 8 8 ± 1 5 . 7 0*2 3 7 . 6 0 ± 1 2 . 7 0△1 2 . 7 5 ± 1 . 2 7*7 . 1 4 ± 1 . 2 0△△丹參酮低劑量組 8 2 1 1 . 1 3 ± 1 2 . 9 3*2 3 7 . 1 4 ± 1 5 . 9 3△1 3 . 2 1 ± 1 . 4 1*7 . 9 3 ± 1 . 6 3△△丹參酮高劑量組 8 2 1 0 . 6 3 ± 9 . 8 7*2 5 0 . 5 0 ± 1 7 . 0 6△△1 3 . 2 6 ± 0 . 8 2*7 . 0 5 ± 1 . 6 6△△組別 n空白組 8模型組 8 S O D（U / m L）造模后 治療后2 7 2 . 6 3 ± 1 4 . 0 2 2 6 1 . 8 6 ± 2 3 . 4 9 2 0 9 . 8 8 ± 1 7 . 9 6*2 1 5 . 5 7 ± 1 6 . 2 9

2.4 各組大鼠Scr、BUN、β2-MG比較 見表4。治療后Scr、BUN、β2-MG丹參酮高劑量組與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01或P＜0.05），亞硒酸鈉組、丹參酮低、高劑量組BUN含量與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表4 各組大鼠造模后與治療后Scr、BUN、β2-MG比較（±s）

表4 各組大鼠造模后與治療后Scr、BUN、β2-MG比較（±s）

S c r（μ m o l / L） B U N（m m o l / L） β 2 -M G（μ g / L）造模后 治療后 造模后 治療后 造模后 治療后空白組 8 3 2 . 5 ± 1 . 8 3 3 . 9 ± 2 . 4 4 . 4 3 ± 0 . 2 9 4 . 5 9 ± 0 . 2 1 1 8 . 4 ± 0 . 6 1 8 . 8 ± 0 . 4模型組 8 5 7 . 4 ± 3 . 1 5 2 . 0 ± 4 . 4 6 . 9 9 ± 0 . 4 8 6 . 9 2 ± 0 . 5 6 2 9 . 0 ± 1 . 0 2 6 . 4 ± 1 . 1亞硒酸鈉組 8 5 6 . 9 ± 2 . 9 4 6 . 5 ± 2 . 9 6 . 9 6 ± 0 . 4 0 5 . 7 9 ± 0 . 3 9△△2 8 . 9 ± 1 . 0 2 3 . 7 ± 0 . 7丹參酮低劑量組 8 5 7 . 0 ± 2 . 7 4 9 . 3 ± 3 . 0 6 . 8 7 ± 0 . 2 2 5 . 5 9 ± 0 . 3 1△△2 7 . 5 ± 0 . 7 2 3 . 8 ± 1 . 2丹參酮高劑量組 8 5 5 . 4 ± 2 . 7 4 4 . 4 ± 4 . 1△7 . 0 2 ± 0 . 3 7 5 . 0 7 ± 0 . 4 3△△3 0 . 3 ± 1 . 0 2 1 . 8 ± 0 . 7△組別 n

2.5 各組大鼠細(xì)胞凋亡率比較 見表5。模型組與空白組相比早、晚、總凋亡率明顯升高（P＜0.01），亞硒酸鈉組晚、總凋亡率與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），但丹參酮低、高劑量組與空白組早、晚、總凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。其余各組早期凋亡率和總凋亡率與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），丹參酮高劑量組與模型組晚期凋亡率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表5 各組腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率比較（%，±s）

表5 各組腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率比較（%，±s）

與空白組比較，*P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

組別 n 總凋亡率空白組 8 1 . 5 3 ± 0 . 2 9模型組 8 2 2 . 3 2 ± 2 . 9 7**亞硒酸鈉組 8 9 . 8 7 ± 6 . 1 3△△早期凋亡率 晚期凋亡率0 . 0 4 ± 0 . 0 4 1 . 5 0 ± 0 . 2 6 9 . 0 5 ± 2 . 3 0**1 3 . 2 6 ± 0 . 8 6**1 . 2 5 ± 0 . 8 8△△8 . 6 2 ± 2 . 2 9丹參酮低劑量組 8 8 . 2 6 ± 6 . 1 3 0 . 8 5 ± 0 . 8 5 7 . 4 1 ± 5 . 3 0丹參酮高劑量組 8 0 . 5 2 ± 0 . 4 9 5 . 5 5 ± 3 . 9 7 6 . 0 7 ± 4 . 4 4△

2.6 各組血、尿、腎皮質(zhì)鎘含量比較 見表6。血、腎皮質(zhì)含鎘量的模型組、亞硒酸鈉組、丹參酮低、高劑量組及尿含鎘量的模型組、亞硒酸鈉組含鎘量與空白組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。腎皮質(zhì)含鎘量高劑量組與空白組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。血含鎘量丹參酮高劑量組及腎皮質(zhì)含鎘量亞硒酸鈉組、丹參酮低、高劑量組與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。尿含鎘量亞硒酸鈉組、丹參酮低、高劑量組與模型組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表6 各組大鼠血、尿、腎皮質(zhì)鎘含量比較（±s）

表6 各組大鼠血、尿、腎皮質(zhì)鎘含量比較（±s）

組別 n 腎皮質(zhì)含鎘量（μ g / g）空白組 8 1 . 3 8 5 5 ± 1 . 3 3 1 1模型組 8 5 2 . 6 8 1 ± 5 . 0 3 4 7*亞硒酸鈉組 8 2 5 . 8 2 6 ± 1 2 . 3 0 5 4△△血含鎘量（μ g / L）尿含鎘量（μ g / L）0 . 0 4 9 9 ± 0 . 0 0 4 8 0 . 0 0 1 6 ± 0 . 0 0 0 2 1 . 3 3 9 3 ± 0 . 7 2 6 1*0 . 0 2 2 5 ± 0 . 0 1 1 7*0 . 9 6 7 2 ± 0 . 6 9 1 4 0 . 0 2 0 4 ± 0 . 0 1 7 9丹參酮低劑量組 8 3 1 . 5 4 2 ± 4 . 3 2 9 1△△0 . 7 4 2 9 ± 0 . 7 4 2 9△0 . 0 1 3 3 ± 0 . 0 1 0丹參酮高劑量組 8 0 . 6 9 7 0 ± 0 . 2 2 2 7△△0 . 0 1 6 6 ± 0 . 0 1 4 2 2 3 . 2 9 8 ± 1 2 . 5 8 9 9△△

2.7 兩組腎組織免疫組化比較 腎皮質(zhì)Bax蛋白弱陽性表達(dá)結(jié)果顯示，空白組、丹參酮ⅡA高劑量組與鎘染毒模型組相比較，鎘染毒模型組Bax蛋白弱陽性表達(dá)率為（22.80±1.90）%，分別強(qiáng)于空白組與丹參酮高組的（7.90±1.30）%、（18.50±6.20）%（P＜0.01）。而亞硒酸鈉組、丹參酮ⅡA低劑量組與鎘染毒模型組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。腎皮質(zhì)Bax蛋白強(qiáng)陽性表達(dá)結(jié)果顯示，鎘染毒模型組Bax蛋白強(qiáng)陽性表達(dá)率為（18.30±1.70）%，并且明顯高于其他組（P＜0.01）。

3 討 論

上述鎘致腎損傷機(jī)制中，氧化損傷的機(jī)制研究最為明確。大量研究顯示，大鼠鎘染毒后，其功能損傷明顯，超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)病理損傷，線粒體、溶酶體等細(xì)胞器嚴(yán)重受損，血清及腎臟中SOD、GSH-Px活性明顯下降，氧自由基生成顯著升高［8］，這是由于鎘可以通過增強(qiáng)脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)生及改變細(xì)胞內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)的方式，從而誘導(dǎo)不同組織的氧化損傷［9］，提示在鎘致腎臟損傷的過程中，氧自由基的生成及由此引起的脂質(zhì)氧化反應(yīng)可能起著重要作用。

丹參具有活血化瘀等功效。近年對丹參藥理作用的研究取得了較大突破，研究報(bào)道丹參具有清除自由基和抗脂質(zhì)氧化、減輕缺血組織再灌注損傷、抗肝腎損傷及肝腎間質(zhì)纖維化等作用［10］。丹參酮ⅡA磺酸鈉作為從丹參中提取出的主要有效的藥理成分，已被證實(shí)具有較強(qiáng)的清除自由基和抗脂質(zhì)氧化作用。丹參酮ⅡA是一種有效的細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物與DNA互相作用的抑制藥，其保護(hù)機(jī)制可能與清除脂類自由基，阻斷脂質(zhì)過氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，從而抑制DNA加成物的生成以減少細(xì)胞毒性有關(guān)［11］。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，染毒后大鼠體質(zhì)量明顯低于空白組。血清SOD顯著降低，血清MDA明顯升高，SOD是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，可以清除氧自由基，進(jìn)而阻斷氧自由基對細(xì)胞的損傷，并可恢復(fù)氧自由基對細(xì)胞造成的損傷。MDA是自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧作用的最終分解產(chǎn)物，其含量可間接反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的水平，血清SOD、MDA含量的異常，提示了氧化損傷可能是鎘致腎臟損傷的重要機(jī)制之一。Scr、BUN都是主要經(jīng)由腎小球?yàn)V過排出體外，Scr、BUN升高提示腎臟實(shí)質(zhì)受到損傷，其機(jī)制可能與鎘致腎小管上皮細(xì)胞損傷有關(guān)，腎小管上皮損傷后可導(dǎo)致其管腔狹窄，相應(yīng)的阻力又會使腎小球?yàn)V過率下降。β2-MG可以從腎小球自由濾過，大部分在近端小管被重吸收，β2-MG明顯升高提示鎘誘導(dǎo)的慢性中毒損傷的主要部位是腎臟的近端小管。總之，以腹腔注射氯化鎘溶液（1.4 mg/kg），每周7次，共4周的大鼠鎘染毒方法，可致大鼠腎臟損傷。

治療后模型組腎臟質(zhì)量系數(shù)明顯高于丹參酮低、高劑量組，提示STS對腎臟有保護(hù)作用。大鼠禁食禁水24 h，檢測大鼠嚴(yán)重缺水的情況下腎小管的重吸收能力，丹參酮低、高劑量組尿量有所升高，但與空白組相比，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示STS對鎘致腎小管損傷有一定的保護(hù)作用。STS治療后丹參酮低、高劑量組Scr、BUN含量，腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率，提示STS可以有效改善鎘致腎損傷大鼠的腎功能。作為人體中重要的抗氧化酶SOD及其自由基引發(fā)的脂質(zhì)過氧作用的最終分解產(chǎn)物MDA，受STS干預(yù)治療后，低、高劑量組SOD含量明顯上升、MDA明顯下降，提示STS可以有效清除氧自由基。檢測各組大鼠血、腎皮質(zhì)含鎘量，給藥組鎘含量明顯低于模型組，而尿鎘含量未見明顯降低，可能與鎘從腎臟排出進(jìn)入尿液有關(guān)，提示STS可以加速大鼠體內(nèi)鎘代謝。STS、亞硒酸鈉干預(yù)鎘致腎損傷大鼠后，結(jié)果顯示，腎臟組織細(xì)胞中Bax蛋白顯著降低，證明STS、亞硒酸鈉干預(yù)鎘致腎毒性有效，但以丹參酮高劑量組效果顯著。

綜上所述，STS具有較強(qiáng)的清除氧自由基和抗脂質(zhì)氧化作用，并可加速大鼠體內(nèi)鎘代謝、改善腎功能、保護(hù)腎小管，并且丹參酮高劑量組療效優(yōu)于低劑量組和亞硒酸鈉組。STS改善鎘致腎損傷機(jī)制可能與其有效清除氧自由基、抗脂質(zhì)氧化作用有關(guān)。相關(guān)研究提出藥物調(diào)節(jié)Bax、Bcl-2基因表達(dá)，也是干預(yù)重金屬致腎損傷的機(jī)制之一［12］，尚待進(jìn)一步深入研究。

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The Protective Effect of Tanshinone Ⅱ A Sulfonic Acid Sodium Injection on Cadmium Induced Renal Damage

WEI Changzheng，LV Xiaoyun，SONG Lianmeng，et al. Institute of Integrated Chinese and Western Medicine，Lanzhou University，Lanzhou，Gansu 730000，China

Objective：To investigate the protective effect of Tanshinone Ⅱ A sulfonic acid sodium injection（STS）on Cadmium induced renal damage and its possible mechanism.Methods：40 wistar rats were randomly divided into the sham group，model group，sodium selenite group（0.05 mg/kg），STS group（4 mg/kg），STS group（8 mg/kg）.After exposed cadmium for 4 weeks，the basic condition of rats，Scr，BUN，SOD，MDA and β2-MG were observed.After the success of the modeling，the sham group and model group were intraperitoneally injected with 0.9%sodium chloride，while the sodium selenite group was intraperitoneally injected with Sodium selenite solution，and the STS group（4 mg/kg and 8 mg/kg）was intraperitoneally injected with different doses of STS.At the end of the test，the Scr，BUN，SOD，MDA in the blood and β2-MG in the urine were detected.The cadmium content in the Renal cortex，blood，urine and Bax were measured.Flow cytometry was used to measure Cell apoptosis in Renal cortex.Results：The basic condition，Scr，BUN，SOD，MDA，β2-MG in different groups had statistical differences.After compared with model group，in the STS group （4 mg/kg and 8 mg/kg）Scr，BUN，β2-MG，cadmium content，MDA，kidney Cell apoptosis and the expression of Bax protein were significantly reduced，and SOD increased significantly.Conclusions：Cadmium induced renal damage can be reduced by the STS group（4 mg/kg and 8 mg/kg）.Its protection mechanism may be associated with the antioxidant abitity.

Tanshinone Ⅱ A sulfonic acid sodium；Cadmium；Kidney damage；Apoptosis；Antioxidant abitity

R285.5

A

1004-745X（2015）06-0984-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.06.016

2015-03-20）

蘭州市科技發(fā)展項(xiàng)目（No.2012-1-24）

△通信作者（電子郵箱：776802750@qq.com）