周定耕，詹向陽，張永虎，張大利

（1. 南華大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 急診科，湖南 衡陽 421001；2. 南華大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 急診科，湖南 衡陽 421001）

藍(lán)藻素通過誘導(dǎo)血紅素氧化酶-1表達(dá)發(fā)揮對急性膿毒性肺損傷的保護(hù)作用

周定耕1，詹向陽1，張永虎1，張大利2

（1. 南華大學(xué) 附屬第二醫(yī)院 急診科，湖南 衡陽 421001；2. 南華大學(xué) 附屬第一醫(yī)院 急診科，湖南 衡陽 421001）

目的觀察藻藍(lán)素（C-phycocyanin，CPC）對膿毒癥急性肺損傷（acute lung injury，ALI）大鼠的保護(hù)作用及分子機制。方法75只SD大鼠隨機分為對照組、模型組和3個CPC干預(yù)組。其中模型組采用盲腸結(jié)扎穿刺建立膿毒癥急性肺損傷大鼠模型。CPC干預(yù)組在模型組基礎(chǔ)上腹腔注射濃度為20、40、60 mg/kg 的CPC。術(shù)后72 h獲取血液及肺組織標(biāo)本，檢測肺濕干重比（wet-to-dry weight ratio，W/D）、支氣管肺泡灌洗液中TNF-α，IL-1 β和IL-6水平，以及肺組織中髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性；Western blot檢測血紅素氧合酶（heme oxygenase，HO）-1的表達(dá)以及Nrf2和NF-κB的激活。化學(xué)發(fā)光法檢測超氧化物的產(chǎn)生，還原法檢測肺組織中亞硝酸鹽/硝酸鹽的含量。結(jié)果CPC處理可顯著抑制膿毒癥急性肺損傷大鼠肺組織的炎癥反應(yīng)（P＜0.05），如過氧化物形成、MPO活性、白細(xì)胞滲出以及蛋白含量，以及支氣管肺泡灌洗液中促炎癥細(xì)胞因子和亞硝酸鹽/硝酸鹽的水平。同時，CPC能顯著促進(jìn)ALI肺組織中核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的活化和HO-1表達(dá)(P＜0.05)，同時也能抑制NF-κB的激活。HO-1抑制劑錫原卟啉Ⅸ（tin protoporphyrin IX，SnPP）能減輕CPC在肺損傷大鼠中的保護(hù)效應(yīng)。結(jié)論CPC對ALI大鼠的保護(hù)作用可能與誘導(dǎo)HO-1表達(dá)、NF-κB的激活，進(jìn)而抑制炎癥反應(yīng)有關(guān)。

藻藍(lán)素；膿毒癥；急性肺損傷；血紅素氧合酶1

1 材料與方法

1.1 主要實驗試劑與儀器 CPC、錫原卟啉（tin protoporphyrin IX，SnPP）為Sigma-Aldrich產(chǎn)品（純度均為98%）。兔抗鼠HO-1多克隆抗體、兔抗NF-κB p 65和抗Nrf2單克隆購自CellSignaling。兔抗鼠β-actin、兔抗TATA盒結(jié)合蛋白（TATA-boxbinding protein，TBP）多克隆抗體以及FITC標(biāo)記羊抗兔 IgG抗體購自Santa Cruz，HRP標(biāo)記羊抗兔IgG抗體購自Abcam。TNF-α，IL-1 β和IL-6 ELISA檢測試劑盒購自深圳新博盛生物科技有限公司，采用其檢測下限為5 pg/ml。Bradford蛋白濃度測定試劑盒購自Bio-Rad。主要實驗儀器：發(fā)光測定儀(Microlumat LB 96 V，Berthold)，一氧化氮分析儀（Nitric Oxide Analyzer，NOA），酶標(biāo)儀（iMark，BIORAD）。

1.2 膿毒癥急性肺損傷大鼠模型的構(gòu)建及分組 雄性SPF級Sprague-Dawley雄性大鼠[動物許可證號：SCXK(湘) 2010-0004，體重200～250 g]購自南華大學(xué)實驗動物中心，給予正常飼料喂養(yǎng)。本研究符合我校實驗動物倫理委員會批準(zhǔn)。動物隨機分為5組（每組15只）：（1）對照組（或假手術(shù)組）：SD大鼠用10%水合氯醛生理鹽水麻醉（400 mg/kg），去除毛發(fā)并進(jìn)行皮膚消毒后，沿前腹正中線作3 cm長的切口，取出盲腸，然后逐層關(guān)腹。（2）模型組：取出盲腸后，用4.0絲線在距盲端1.5 cm處結(jié)扎，用18號針頭在盲腸結(jié)扎處遠(yuǎn)端隊穿刺2次，擠出少量糞便，隨后將盲腸回納入腹腔中，逐層關(guān)腹。（3）～（5）CPC干預(yù)組：術(shù)后2 h分別予20、40、60 mg/kg CPC，腹腔注射，12 h后給予第二次注射。72 h后獲取大鼠組織標(biāo)本用于下一步研究。

1.3 支氣管肺泡灌洗液（BALF）的采集以及細(xì)胞因子、細(xì)胞計數(shù)以及蛋白濃度的測定 實驗結(jié)束后，在右主支氣管部位結(jié)扎右肺，隨后通過氣管插管注入5 mL無菌PBS，收集BALF。4℃，300 g離心10 min，上清液保存于－70℃?zhèn)溆?。PBS重懸細(xì)胞沉淀，利用血細(xì)胞計數(shù)器對總細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行計數(shù)。同時利用ELISA方法測定BALF中TNF-α，IL-1 β和IL-6水平。Bradford方法測定BALF上清液中的蛋白濃度。以上操作步驟按照試劑盒提供的方法進(jìn)行。

1.4 肺組織濕干比（wet-to-dry weight ratio，W/D）及髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性的測定 CO2麻醉處死大鼠，取各組右肺下部，獲得濕重，然后在烤箱內(nèi)60℃放置48 h，獲取干重。計算肺濕/干比值。測定MPO活性時，肺組織加入50 mM KH2PO4（含5 mM Tris，pH 6.0）后超聲破碎，并經(jīng)3個凍融循環(huán)后，4℃、14000 g離心10 min。取20μl組織上清液與40μL分析緩沖液（含0.167 mg/ml二鹽酸鄰聯(lián)茴香胺和0.0005% H2O2）混合，3 min內(nèi)于460 nm處動態(tài)測定MPO活性。MPO的活性計算為460 nm處1 min內(nèi)吸光度的改變值（ΔA），用ΔA/min·g·protein表示。

1.5 肺部O2-測定 新鮮的右肺組織切成5 mm×5 mm小塊，用Krebs-HEPES緩沖液孵育5～10 min。隨后加至含200μl Krebs-HEPES緩沖液（含1.25 mmol/L光澤精）的96孔培養(yǎng)板中，用發(fā)光測定儀于1 min內(nèi)讀取化學(xué)發(fā)光強度。隨后將所有肺組織在60℃干燥48 h，計算其總蛋白干重?；瘜W(xué)發(fā)光強度以1 min每毫克干重蛋白的相對發(fā)光單位（relative light unit，RLU）表示。

1.6 BALF中亞硝酸鹽/硝酸鹽的測定 BALF中加入兩倍體積乙醇，20℃混合2 h以沉淀蛋白。隨后加入1N HCl（含0.8%VCl3），使其將樣本中的亞硝酸鹽/硝酸鹽還原為NO，并測量NO的濃度，與標(biāo)準(zhǔn)硝酸鈉溶液進(jìn)行比較，從而間接反應(yīng)亞硝酸鹽/硝酸鹽的含量。

1.7 Western blot以及 NF-кB和Nrf2的核轉(zhuǎn)位分析 根據(jù)試劑盒（Pierce）提供的步驟提取肺組織中的總蛋白和核蛋白，并測定其濃度。獲取100μg蛋白用于SDS-PAGE。分離的總蛋白或核蛋白隨后轉(zhuǎn)印至PVDF膜上（Millipore），用含5%脫脂牛奶的TBST封閉1 h，隨后分別加入抗抗HO-1（1：500）、β-actin（1∶5000）、抗p 65（1∶1000）或抗Nrf 2（1∶1000），抗TBP（1∶1000）的抗體4℃孵育過夜。多次洗滌之后，加入HRP標(biāo)記的二抗（1∶10000稀釋）孵育膜1 h。ECL法發(fā)光、顯影。

1.8 統(tǒng)計學(xué)方法 所有實驗重復(fù)3次，用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，正態(tài)計量數(shù)據(jù)用“x±s”表示，并采用單因素方差分析數(shù)據(jù)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CPC對BALF中的白細(xì)胞含量、MPO活性、蛋白水平、肺水腫以及硝酸鹽含量的影響

ALI大鼠BALF中的總白細(xì)胞數(shù)量，肺MPO活性，蛋白水平，肺濕/干重比率以及硝酸鹽顯著增高（P＜0.05）。不同濃度CPC干預(yù)后，與模型組相比，以上指標(biāo)隨之降低。此外，大鼠腹腔注射SnPP（50 mg/kg）抑制HO-1活性后，可明顯逆轉(zhuǎn)CPC預(yù)處理對ALI大鼠上訴指標(biāo)的抑制作用（見表1）。

表1 各組BALF中MPO活性、白細(xì)胞、蛋白、硝酸鹽含量以及肺組織濕干比（n=8）Tab.1 MPO activity, leucocytes, protein, nitrates content in BALF and wet/dry ratio(n=8)

2.2 CPC對肺組織中超氧化產(chǎn)物含量的影響 與對照組相比，ALI大鼠肺組織中明顯增高。不同濃度CPC干預(yù)后，與模型組相比，超氧化產(chǎn)物含量隨之降低。其中60 mg/kg CPC處理后，其含量降低至30.7%，而SnPP可明顯消除CPC的抑制作用（見圖1）。

圖1. CPC對膿毒性ALI大鼠肺組織中超氧化物含量的影響1.對照組；2.模型組；3.20mg/kg CPC干預(yù)組；4.40mg/kg CPC干預(yù)組；5.60mg/kg CPC干預(yù)組；6.60mg/kg CPC+50 mg/kg SnPP*P＜0.01，與對照組相比；△P＜0.05 ，與模型組相比；＃P＜0.05，與 60mg/kg CPC組相比Fig.1 Effect of CPC on production of superoxide in septic rats1. Control group； 2. Model group； 3. 20mg/kg CPC group； 4. 40 mg/kg CPC group； 5： 60 mg/kg CPC group； 6： 60mg/kg CPC+50 mg/kg SnPP group*P＜0.01， compared with control group；△P＜0.05， compared with model group；＃P＜0.05 ， compared with 60 mg/kg CPC group

2.3 各組BALF細(xì)胞因子含量測定 實驗各組各時間點BALF中TNF-α、IL-1 β和IL-6水平見表2所示。與對照組相比，模型組大鼠BALF中TNF-α、IL-1 β和IL-6含量明顯增高。不同濃度CPC干預(yù)后，TNF-α、IL-1 β和IL-6含量進(jìn)一步降低，其中60 mg/kg CPC處理后，細(xì)胞因子含量顯著低于20 mg/kg和40 mg/kg組（P＜0.05），而SnPP處理后，能降低CPC對細(xì)胞因子的抑制作用（見表2）。

表2 各組BALF中TNF-α、IL-1 β和IL-6含量（pg/mL，n=8）Tab. 2 Content of TNF-α, IL-1 β and IL-6 in each groups (pg/mL, n=8)

2.4 CPC對肺組織中HO-1表達(dá)以及Nrf2核轉(zhuǎn)位的影響 與對照組相比，膿毒性ALI大鼠肺組織中HO-1蛋白表達(dá)水平有輕微增高，而經(jīng)CPC處理后，HO-1表達(dá)進(jìn)一步增強（見圖2 A）。類似的，對照組細(xì)胞核中幾乎無Nrf2表達(dá)，ALI大鼠肺組織細(xì)胞核中Nrf2有所增高，而CPC處理后，Nrf2含量明顯增多，而內(nèi)參TBP含量保持一致（見圖2 B）。

圖2.CPC對肺組織中HO-1表達(dá)（A）以及Nrf2核轉(zhuǎn)位（B）的影響1.對照組；2.模型組；3.20 mg/kg CPC干預(yù)組；4.40 mg/kg CPC干預(yù)組；5.60 mg/kg CPC干預(yù)組Fig.2 Expression of HO-1 (A) and nuclear translocation of Nrf 2 (B) induced by CPC1.Control group；2.Model group；3.20 mg/kg CPC group；4.40 mg/kg CPC group；5.60 mg/kg CPC group

2.5 CPC對轉(zhuǎn)錄因子NF-кB活化的影響 Westernblot結(jié)果顯示，ALI大鼠肺組織內(nèi)細(xì)胞核中NF-кB p 65含量明顯高于對照組，而CPC處理后，p 65轉(zhuǎn)位水平有所降低，表明CPC能抑制p 65從細(xì)胞漿轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核中（見圖3）。

圖3.CPC對肺組織中NF-κB p 65亞基核轉(zhuǎn)位的影響1.對照組；2.模型組；3.20 mg/kg CPC干預(yù)組；4.40 mg/kg CPC干預(yù)組；5.60 mg/kg CPC干預(yù)組Fig.3 Nuclear translocation of NF-κB induced by CPC1.Control group；2.Model group；3.20 mg/kg CPC group；4. 0 mg/kg CPC group；5.60 mg/kg CPC group

3 討論

HO-1是催化血紅素降解為CO、亞鐵離子和膽紅素的限速酶，并在機體的抗炎癥、抗氧化損傷中發(fā)揮重要作用[4]，研究顯示，HO-1基因的啟動子區(qū)域含有轉(zhuǎn)錄因子Nrf2的結(jié)合位點，因此Nrf2誘導(dǎo)的HO-1表達(dá)，是機體一種重要的適應(yīng)性保護(hù)反應(yīng)。在非激活情況下，Nrf2可與抑制物keap1結(jié)合于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞受到外源性刺激時，Nrf2從keap1中分離出來，轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)，從而與應(yīng)激誘導(dǎo)性基因如HO-1的啟動子區(qū)域的抗氧化劑應(yīng)答元件結(jié)合[5]。本研究發(fā)現(xiàn)CPC處理后，Nrf2轉(zhuǎn)位增加，這與肺組織中HO-1蛋白表達(dá)的趨勢一致，表明CPC誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)可能是由于Nrf2的活化所致。HO-1的代謝產(chǎn)物如CO和膽綠素在多種肺部疾病包括ALI中發(fā)揮抗氧化和抗炎癥作用，包括抑制促炎癥細(xì)胞因子、趨化因子、ROS的形成[6-7]。為了進(jìn)一步評價HO-1在CPC的保護(hù)效應(yīng)中的作用，在干預(yù)過程中加入SnPP，對CPC的這些抗炎癥活性進(jìn)行了分析。結(jié)果表明，膿毒性ALI的肺部病理特征包括肺泡炎、白細(xì)胞浸潤、蛋白滲出以及水腫，CPC處理可明顯減弱這些病理學(xué)改變。然而利用HO-1抑制劑SnPP可削弱CPC的保護(hù)效應(yīng)，表明CPC的保護(hù)效應(yīng)與HO-1有關(guān)。

肺組織中的中性粒細(xì)胞滲出與膿毒性ALI的預(yù)后不良密切相關(guān)，抑制中性粒細(xì)胞的滲出反應(yīng)可減緩肺損傷乃至ARDS的發(fā)生[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，CPC可明顯減弱ALI大鼠肺組織中性粒細(xì)胞積聚以及MPO的活性（中性粒細(xì)胞滲出標(biāo)志物）。BALF中由活化的肺泡炎癥細(xì)胞（包括中性粒細(xì)胞）釋放的促炎癥細(xì)胞因子（包括TNF-α、IL-1 β、IL-6等）水平的增加在引起ALI的過程中發(fā)揮重要作用，并與ALI的不良結(jié)局密切相關(guān)[9]。CPC也可明顯抑制ALI大鼠BLAF中促炎癥細(xì)胞因子水平的增加。SnPP也能減弱CPC對中性粒細(xì)胞和促炎癥細(xì)胞因子的抑制效應(yīng)，表明CPC的抗炎癥活性也與HO-1有關(guān)。

ALI發(fā)生時，呼吸道和血液中的免疫細(xì)胞釋放大量ROS從而誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而引起肺損傷[10]。本研究也證明：CPC對ROS的抑制作用與HO-1的表達(dá)有關(guān)，因為SnPP預(yù)處理可明顯減弱CPC對肺組織中O2-的抑制作用。其他的重要介質(zhì)，如NO的過量產(chǎn)生也與ALI的發(fā)病機制密切相關(guān)。NO的過量產(chǎn)生可快速與O2-相互作用，產(chǎn)生過氧亞硝酸鹽，導(dǎo)致細(xì)胞和組織的大量損傷[11]。因此，抑制NO相關(guān)的細(xì)胞毒性是治療ALI的一個潛在靶點。與預(yù)期結(jié)果一樣，服用CPC能明顯抑制由LPS誘導(dǎo)的亞硝酸鹽/硝酸鹽形成，最終抑制NO的產(chǎn)生。其過程也可能與HO-1的表達(dá)有關(guān)，這也說明由HO-1介導(dǎo)的NO途徑和ROS產(chǎn)生的減少可能是CPC對ALI的保護(hù)性效應(yīng)中的一個重要機制。

細(xì)胞在靜息狀態(tài)下，NF-кB以p 50和p 60亞單位的同聚或異聚復(fù)合物的形式存在于細(xì)胞質(zhì)，并與抑制分子IкB-α結(jié)合。細(xì)胞受到外源性因素刺激后，導(dǎo)致IкB-α/NF-кB復(fù)合物分離。然后，NF-кB轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核內(nèi)，并誘導(dǎo)一些炎癥基因表達(dá)（包括促炎癥細(xì)胞因子以及ROS、NO的形成）[12]。因此，NF-кB被認(rèn)為是一種用于肺損傷的早期檢測、防治的重要靶分子。本研究也證實CPC明顯抑制ALI大鼠中p 65轉(zhuǎn)移至肺細(xì)胞核內(nèi)，說明CPC對炎癥的抑制作用可能是通過NF-κB而實現(xiàn)的。已有研究表明，抑制NF-кB的活化可明顯抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)由LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞因子分泌、iNOS表達(dá)以及NO產(chǎn)生[13-14]。雖然如此，HO-1和NF-κB發(fā)揮抗炎癥活性的真正機制目前仍不完全清楚。HO-1分解游離血紅素，以及產(chǎn)生抗炎癥的復(fù)合物比如膽綠素/膽紅素和CO等可能與HO-1的抗炎癥活性有關(guān)[15]，在下一步研究中，我們將對HO-1的上游調(diào)控機制以及HO-1的作用靶點開展進(jìn)一步研究。

[1] Du B,An Y,Kang Y,et al.Characteristics of critically ill patients in ICUs in Mainland China[J].Crit Care Med,2013,41(1):84-92.

[2] Shih CM,Cheng SN,Wong CS,et al.Antiinflammatory and antihyperalgesic activity of C-phycocyanin[J].Anesth Analg,2009,108(4):1303-1310.

[3] Cherng SC,Cheng SN,Tarn A,et al.Anti-inflammatory activity of c-phycocyanin in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages[J].Life Sci,2007,81(19):1431-1435.

[4] Deshane J,Chen S,Caballero S,et al.Stromal cell-derived factor 1 promotes angiogenesis via a heme oxygenase 1-dependent mechanism[J].J Exp Med,2007,204(3):605-618.

[5] Zhang Z,Cui W,Li G,et al.Baicalein protects against 6-OHDA-induced neurotoxicity through activation of Keap 1/Nrf 2/HO-1 and involving PKCalpha and PI3 K/AKT signaling pathways[J].J Agric Food Chem,2012,60(33):8171-8182.

[6] Sarady-Andrews JK,Liu F,Gallo D,et al.Biliverdin administration protects against endotoxin-induced acute lung injury in rats[J].Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol,2005,289(6):1131-1137.

[7] Yin H,Li X,Yuan B,et al.Heme oxygenase-1 ameliorates LPS-induced acute lung injury correlated with downregulation of interleukin-33[J].Int Immunopharma col,2011,11(12):2112-2117.

[8] Perl M,Hohmann C,Denk S,et al.Role of activated neutrophils in chest traumainduced septic acute lung injury[J].Shock,2012,38(1):98-106.

[9] Lomas-Neira J,Perl M,Venet F,et al.The role and source of tumor necrosis factor-alpha in hemorrhage-induced priming for septic lung injury[J]. Shock,2012,37(6):611-620.

[10] Carnesecchi S,Pache JC,Barazzone-Argiroffo C.NOX enzymes:potential target for the treatment of acute lung injury[J].Cell Mol Life Sci,2012,69(14):2373-2385.

[11] Wang L,Taneja R,Razavi HM,et al.Specific role of neutrophil inducible nitric oxide synthase in murine sepsis-induced lung injury in vivo[J]. Shock,2012,37(5):539-547.

[12] Kwon DJ,Ju SM,Youn GS,et al.Suppression of iNOS and COX-2 expression by flavokawain A via blockade of NF-kappaB and AP-1 activation in RAW 264.7 macrophages[J].Food Chem Toxicol,2013,58(7):479-486.

[13] Jin M,Sun CY,Pei CQ,et al.Effect of safflor yellow injection on inhibiting lipopolysaccharide-induced pulmonary inflammatory injury in mice[J].Chin J Integr Med,2013,19(11):836-843.

[14] Liu F,Sun GQ,Gao HY,et al.Angelicin regulates LPS-induced inflammation via inhibiting MAPK/NF-kappaB pathways[J].J Surg Res,2013,185(1):300-309.

[15] Chung SW,Liu X,Macias AA,et al.Heme oxygenase-1-derived carbon monoxide enhances the host defense response to microbial sepsis in mice[J].J Clin Invest,2008,118(1):239-247.

C-phycocyanin induces Heme oxygenase-1 expression to protect acute lung injury in septic rats

ZHOU Ding-geng1, ZHAN Xiang-yang1, ZHANG Yong-hu1, ZHANG Da-li2
（1.Department of Emergency，The Second Affiliated Hospital of Nanhua University， Hengyang 421001,China；2. Department of Emergency，The First Affiliated Hospital of Nanhua University， Hengyang 421001,China）

ObjectiveTo observe the protective effect and molecular mechanism of C-phycocyanin (CPC) on acute lung injury (ALI) in septic rats。Method75 SD rats were randomly divided into control group, model group and CPC group. Cecal ligation and puncture was used to establish a septic acute lung injury rats (model group). For the CPC groups, septic acute lung injury rats were administrated by 20, 40 and 60 mg/kg CPC by intraperitoneal injection. 72 h after the operation, serum and lung tissue were obtained, the wet to dry weight ratio, the content of TNF-α、IL-6 and IL-10 in bronchoalveolar lavage fl uid, the activity of myeloperoxidase (MPO) was analyzed. Expression of heme oxygenase (HO)-1，activation of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf 2) and nuclear factor-kappa B (NF-B) were detected by Western blot. Superoxide and Nitrite/Nitrate Level production in Lungs and bronchoalveolar lavage fl uid were measured by chemiluminescence and reduction method, respectively。ResultsTreatment with CPC significantly inhibited septic-induced inflammatory responses including elevation of superoxide formation, myeloperoxidase activity, leucocytes and protein in fi ltration in lung tissues, and production of proin fl ammatory cytokine, and nitrite/nitrate in bronchoalveolar lavage fl uid (P＜0.05). In addition, CPC could activate Nrf 2 and induce HO-1 expression, and inhibit NF-B activation in ALI rats. However, blocking HO-1 activity by tin protoporphyrin IX (SnPP), an HO-1 inhibitor, markedly abolished these bene fi cial effects of CPC in septic-induced ALI。ConclusionThe protection mechanism of CPC may be through HO-1 induction and suppressing of NF- B-mediated in fl ammatory responses.

C-phycocyanin；sepsis；acute lung injury；heme oxygenase-1

R 453.9

A

1005-1678(2014)01-0005-04

膿毒癥性肺損傷是一種由敗血癥或嚴(yán)重感染引起的一種危急并發(fā)癥，雖然目前的治療方法和手段已經(jīng)取得了較大的進(jìn)步，但其死亡率依然可達(dá)30%～50%[1]。因此尋求有效的輔助治療，有望改善其預(yù)后。和其他因素引起的急性肺損傷 (acute lung injury，ALI)/急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)一樣，病理生理學(xué)上是肺泡毛細(xì)血管廣泛損傷，通透性增加，從而導(dǎo)致肺水腫、缺氧，以及多形核中性粒細(xì)胞（polymorphonuclear neutrophils，PMN）滲入肺泡腔內(nèi)，最終導(dǎo)致呼吸功能受損。目前的觀點認(rèn)為：這種失控性炎癥反應(yīng)是ALI的發(fā)病基礎(chǔ)，因此，抑制由固有免疫系統(tǒng)介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能是減弱ALI進(jìn)展的一個潛在治療靶點。藻藍(lán)素（C-phycocyanin，CPC）一種從螺旋藻提取、加工而成的天然食用色素，是一種營養(yǎng)價值極高的營養(yǎng)物質(zhì)[2-3]。研究顯示：CPC不但可以幫助調(diào)節(jié)合成人體所需要的多種重要酶，而且對人體的免疫系統(tǒng)有一定的調(diào)控作用，這表明CPC可能對于各種炎癥性疾病有一定的作用[2-3]。但目前未見有關(guān)藍(lán)藻素在急性肺損傷中的相關(guān)研究。本研究旨在探討CPC在膿毒癥誘導(dǎo)的ALI中發(fā)揮的保護(hù)效應(yīng)及可能的分子機制。

湖南省自然科學(xué)基金衡陽聯(lián)合基金（13 JJ 9009）

周定耕，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：急性肺損傷發(fā)病機制與防治，Email：zhoudinggeng@163.com。