岳玉紅

(莘縣食品藥品監(jiān)督管理局， 山東 莘縣 252400)

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有毒中藥雄黃質(zhì)量檢測(cè)思路探索

岳玉紅

(莘縣食品藥品監(jiān)督管理局， 山東 莘縣 252400)

目的：探究中藥雄黃的毒性藥理，通過高效液色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜結(jié)合技術(shù)對(duì)6種不同價(jià)態(tài)砷進(jìn)行分析，研究雄黃和5種不同含雄黃處方中的可溶性砷。方法：可溶性砷通過不同提取溶劑與不同的提取方法為鹽酸溶液超聲0.16%、人工胃液恒溫振蕩37℃、甲醇-水(1∶1)ASE與甲醇-水(1∶1)進(jìn)行樣品可溶性砷的提取。通過ICP-MS進(jìn)行可溶性砷總量的分析，再通過高效液色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜進(jìn)行可溶性砷形態(tài)的分析。結(jié)果：含雄黃復(fù)方制劑和雄黃酸可溶性砷總量占據(jù)樣品含砷總量的0.12%～2.70%。結(jié)論：雄黃和復(fù)方制劑酸可溶性砷要比含砷量小，復(fù)方制劑中具有能夠抑制可溶性砷有毒形態(tài)的成分。

中藥；雄黃；毒性研究；砷

雄黃又叫石黃，味苦、辛溫，在臨床上應(yīng)用廣泛，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為雄黃具有燥濕、解毒、截瘧、殺蟲的功效，近年來(lái)雄黃被應(yīng)用到白血病的臨床治療上，取到了顯著療效。雖然雄黃醫(yī)學(xué)作用很大，但是礦物藥雄黃成分主要是硫化砷和四硫化四砷，而外雄黃還具有微量的As2O5與As2O3[1]。砷元素含有劇毒，國(guó)際上對(duì)砷元素具有嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，所以砷的安全性受到了很多質(zhì)疑。

1 儀器與試藥

1.1 檢測(cè)儀器

通過X-射線衍射儀、Bruker和D8進(jìn)行中藥雄黃質(zhì)量檢測(cè)。測(cè)定的條件有負(fù)極管壓40kV、輻射CuKa、掃描范圍5°～55°、負(fù)極電流40mA、掃描速度5%min、接收縫寬0.1、發(fā)散縫寬1.0。

1.2 試藥

EDTA和磷酸二氫銨為分析純，鹽酸、甲醇、硝酸、超純水。

1.3 藥物性狀

雄黃的礦物部分是粒狀集合體以及塊狀集合體，為深紅色不規(guī)則塊狀或者橙紅色不規(guī)則塊狀，具有淡橘紅色的條痕，其晶面有著金剛石的光澤。

2 方法與結(jié)果

(1)通過140Ce、205TI、89Y、7Li、調(diào)諧ICP-MS，調(diào)節(jié)89Y和75As的靈敏度。使用全定量模式測(cè)定砷總量，通過Hamilton PRP-X100陰離子交換色譜柱，流動(dòng)向50mmol/L NH4H2PO4。

(2) 吸取適量的As(III)和As(V)、MMA、DMA、AsC與AsB 物質(zhì)溶液，通過0.05mol/L EDTA制作1L含有As(III)和As(V)、MMA、DMA、AsC與AsB的不同價(jià)態(tài)的砷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液[2]。

(3) 砷含有量檢測(cè)。 取0.05g雄黃和水飛雄黃，0.3～0.5g的含雄黃中藥放置在微波消解罐內(nèi)，然后加入消解液5mL，之后放置等待30min，把密封罐放入微波消解儀中，按照程序?qū)ζ溥M(jìn)行消解，如果消解效果不明顯，可以再添加1mL消解液，直到罐中的溶液澄清。 將消解之后的樣品轉(zhuǎn)到聚四氟乙烯量瓶?jī)?nèi)，通過稀釋液稀釋樣品溶液，通過ICP-MS進(jìn)行砷總量的測(cè)定[3]。見表1。

表1 總砷測(cè)定 (mg·kg-1)

(4) 精密度和準(zhǔn)確度。 取0.5g的茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，通過供試品溶液進(jìn)行方法制備，通過既定方法使用ICP-MS進(jìn)行砷總量的測(cè)定，其測(cè)定結(jié)果0.082mg/kg，其RSD7.6%。含雄黃復(fù)方制劑和雄黃酸可溶性砷總量占樣品含砷總量的0.12%～2.70%。見表2、表3。

表2 可溶性砷總量測(cè)定 (mg·kg-1)

3 討論

雄黃是一種礦物類中藥，其成分主要為四硫化四砷，主要作用是解毒殺蟲，還具有截瘧、燥熱祛痰。中醫(yī)可以醫(yī)治蛇蟲咬傷、瘧疾、蟲積腹痛和痛腫疔瘡[4]，廣泛使用在中成藥與復(fù)方中藥中?，F(xiàn)代藥理研究證明了中藥雄黃具有抗菌、抗腫瘤、止痛和鎮(zhèn)痙作用。通過長(zhǎng)期研究，中醫(yī)認(rèn)為中藥雄黃不可久用，雄黃有毒，內(nèi)服宜慎，孕婦禁用。

表3 可溶性砷總量和總砷含有量 (%)

雄黃的成分有As2S2或者As4S4，還會(huì)有微量的As2O3和As2O5，As2S2或者As4S4很難溶于水，可以微溶進(jìn)稀酸，較難吸收[5]。雄黃進(jìn)行水飛炮制后，可溶性成分會(huì)被去除，剩下不溶性的As4S4，同時(shí)還具有微量的可溶性成分。

砷形態(tài)分析可通過酸性溶劑提取出具有較大毒性的無(wú)機(jī)砷，也可以利用1∶1比例的甲醇和水進(jìn)行砷形態(tài)溶劑的提取，而且這種溶劑可以提取砷的有機(jī)形態(tài)與無(wú)機(jī)形態(tài)。富含雄黃的口服藥通過胃液消化進(jìn)入體內(nèi)，所以很多學(xué)者使用模仿手段來(lái)模擬人工胃液進(jìn)行可溶性砷的提取，結(jié)合1∶1比例的甲醇和水、鹽酸溶液0.16%通過水浴振蕩與超聲方法全面研究含雄黃重要的可溶性砷形態(tài)[6]。還可以通過無(wú)機(jī)砷以及有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加以研究，此方法具有較好的準(zhǔn)確度與精密度。

通過0.16%鹽酸溶液超聲提取和人工胃液振蕩提取出的可溶性砷量基本持平，在人體研究模擬中通過超聲方法替代振蕩方法，具有較高的提取效率。使用1∶1比例的甲醇與水進(jìn)行快速溶劑萃取和超聲發(fā)現(xiàn)，含雄黃和雄黃成藥通過甲醇與酸液提取之后，具有As(III)與As(V)兩類價(jià)態(tài)，沒有發(fā)現(xiàn)砷甜菜堿、砷膽堿、一甲基砷與二甲基砷。As(III)與As(V)這兩種砷形態(tài)具有較大的毒性，同樣是中藥復(fù)方內(nèi)具有一定療效的形態(tài)，可以對(duì)其進(jìn)入深入研究，完善質(zhì)量控制，確保用藥的安全性。

綜上所述，雄黃和復(fù)方制劑酸可溶性砷含砷量小，復(fù)方制劑中具有能夠抑制可溶性砷有毒形態(tài)的成分。

[1] 王兆基,關(guān)錫耀,徐樹棋,等. 毒性中藥雄黃質(zhì)量檢測(cè)方法研究[J].中國(guó)藥學(xué)會(huì),2011，2(11)：12-14.

[2] 張明發(fā),李淑君. 雄黃和含雄黃中成藥再認(rèn)識(shí)[J]. 中國(guó)執(zhí)業(yè)藥師,2009,2(11):26-29.

[3] 譚勇,李健,呂誠(chéng),等. 有毒中藥對(duì)證控毒科學(xué)內(nèi)涵的現(xiàn)代詮釋[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,10(3):1412-1415.

[4] 高雙榮,梁愛華,易艷,等. 雄黃中砷的不同形態(tài)及其毒性研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,24(7):243-247.

[5] 李麗敏,夏晶,王欣美,等. HPLC-ICP-MS法研究5種含雄黃中成藥的可溶性砷及其形態(tài)[J]. 中成藥,2012,11(8):2118-2123.

[6] 陳秋生,程奕,孟兆芳,等. 仿生提取-HPLC-ICP-MS測(cè)定含雄黃中成藥中可溶性砷含量[J]. 藥物分析雜志,2010,10(17):1829-1835.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

2014-05-18

岳玉紅(1975-)，女，山東省莘縣食品藥品監(jiān)督管理局中藥師，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。

R284

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1673-2197(2014)17-0027-02