高翠紅 趙玉萍 (河北省唐山市婦幼保健院檢驗(yàn)科，唐山 063000)

同型半胱氨酸Hcy(Homocysteine，Hcy)是蛋氨酸代謝過程中產(chǎn)生的一種含巰基的氨基酸，其代謝過程需要FA、VitB12 輔酶的參與，有報道惡性腫瘤患者如結(jié)直腸癌、卵巢癌及乳腺癌血漿Hcy 升高，乳腺癌患者血漿及囊液中血漿Hcy 升高，且其血清葉酸、維生素B12 水平顯著下降，并認(rèn)為低葉酸攝入可能是乳腺癌的危險因子［1］，另外糖類抗原CA15-3 是乳腺癌重要的特異性標(biāo)志物，國內(nèi)外尚少見乳腺癌患者中Hcy、CA15-3 與FA、VitB12 水平的變化及其相關(guān)性的報道，本文旨在探討四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測對乳腺癌患者的臨床診斷及病情的判斷中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院婦科及普外科乳腺癌初診住院病人55 例，平均年齡40.2 歲。其中Ⅰ、Ⅱ期25 例，Ⅲ期12 例，Ⅳ期18 例。乳腺良性腫瘤初診患者35 例，平均年齡38.9 歲。所有病例均為臨床確診病例，均經(jīng)影像學(xué)、B 超、CT 或MRI 證實(shí)及病理學(xué)明確診斷，均未行放、化療治療。正常人50 例為同期健康體檢人員，均為女性，平均年齡39.4 歲。所有體檢者均經(jīng)體檢和實(shí)驗(yàn)室檢測證實(shí)心、肝、腎和胰臟功能正常，實(shí)驗(yàn)前未服用任何藥物。在對照組病例的選取上，我們挑選一些與乳腺腫瘤病人年齡、性別相匹配的健康人的樣本與乳腺腫瘤病人進(jìn)行比較，從而盡量減少疾病以外的因素帶來的誤差。三組年齡經(jīng)方差分析及卡方檢驗(yàn)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P ＜0.05)。

表1 乳腺癌組和對照組血清Hcy、FA、VitB12 和CA15-3 濃度的比較(±s)Tab.1 Comparison of Hcy，F(xiàn)A，VitB12 and CA15-3 with breast cancer patients and control groups(±s)

表1 乳腺癌組和對照組血清Hcy、FA、VitB12 和CA15-3 濃度的比較(±s)Tab.1 Comparison of Hcy，F(xiàn)A，VitB12 and CA15-3 with breast cancer patients and control groups(±s)

Note:Compared with normal control group，1)P ＜0.05;Breast cancer compared with breast benign tumor group，2)P ＜0.05.

表2 乳腺癌組不同臨床分期Hcy、FA、VitB12 和CA15-3水平(±s)Tab.2 Different clinical stages of Hcy，F(xiàn)A，VitB12 and CA15-3 in the breast cancer group(±s)

表2 乳腺癌組不同臨床分期Hcy、FA、VitB12 和CA15-3水平(±s)Tab.2 Different clinical stages of Hcy，F(xiàn)A，VitB12 and CA15-3 in the breast cancer group(±s)

Note:1)P ＜0.05，compared with Ⅰand Ⅱstages.

1.2 方法 所有受試對象均于清晨空腹抽取靜脈血于促凝管中，離心后分離血清置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩２捎昧_氏2010 型電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和配套試劑盒檢測血清中FA、VitB12、CA15-3 水平。以葉酸水平＜6.59 nmol/L 為缺乏，VitB12 ＜180 pmol/L 為缺乏，以CA15-3 ＞30 U/ml 為陽性標(biāo)準(zhǔn)。Hcy 測定采用Beckman 全自動分析儀及其配套試劑測定，以Hcy ＞16 nmol/L 為陽性標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，各組數(shù)據(jù)以±s 表示，每組數(shù)據(jù)均行方差齊性檢驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上采用獨(dú)立樣本均數(shù)比較的t 檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用pearson 直線相關(guān)性分析方法，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌及乳腺良性腫瘤患者和正常對照組血清Hcy、FA、VitB12、CA15-3 水平的比較 見表1。乳腺癌患者與乳腺良性腫瘤患者和正常對照組之間Hcy、CA15-3 水平相比明顯升高，均有顯著性差異(P ＜0.05)，乳腺癌患者與乳腺良性腫瘤患者和正常對照組之間FA、VitB12 濃度顯著降低，差異有顯著性(P ＜0.05)，而乳腺良性腫瘤和正常對照組間均無明顯差異(P ＞0.05)。

2.2 乳腺癌不同分期Hcy、FA、VitB12、CA15-3 水平 見表2。表2 顯示，乳腺癌早期患者(Ⅰ、Ⅱ期)與晚期(Ⅲ、Ⅳ期)血清Hcy、FA、CA15-3 水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，Hcy、CA15-3 隨臨床分期遞增而遞增，F(xiàn)A 水平提示隨臨床分期遞增而遞減。VitB12 兩組間無顯著性差異(P ＞0.05)。Hcy、FA、CA15-3 可能與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

2.3 相關(guān)性分析 乳腺癌組血清Hcy 水平與FA、VitB12 濃度呈負(fù)相關(guān)(P ＜0.05)，相關(guān)系數(shù)分別為r=-0.34，r=-0.54。CA15-3 與Hcy 呈正相關(guān)r=0.378，CA15-3 與FA 呈負(fù)相關(guān)，r=-0.361。

3 討論

Hcy 是一種含巰基的氨基酸，人體內(nèi)不能自身合成，主要通過兩種途徑來調(diào)節(jié)Hcy 的代謝，一種是經(jīng)轉(zhuǎn)甲基轉(zhuǎn)換成蛋氨酸，此過程需要FA 和VitB12 及亞甲基四氫葉酸還原酶的參與;另一種是經(jīng)轉(zhuǎn)巰基作用轉(zhuǎn)換成胱硫脒，此過程需要5-硫酸吡哆醛參與。因此，F(xiàn)A 和VitB12 的缺乏或代謝過程中一些酶的缺陷，可導(dǎo)致血液中蛋氨酸的再生成，從而導(dǎo)致血液中Hcy 在體內(nèi)的蓄積。有報道稱各種腫瘤患者均可見血Hcy 升高，如肝癌、結(jié)直腸癌、婦科腫瘤［2］。本研究結(jié)果也表明，乳腺癌患者血清中Hcy 水平顯著高于對照組，這提示乳腺癌患者體內(nèi)可能存在蛋氨酸代謝障礙，主要原因可能是因?yàn)镕A和VitB12 的缺乏，使其作為輔酶參與核酸形成不足，客觀上造成蛋氨酸循環(huán)的速度減慢，使血清中Hcy 水平持續(xù)性升高。

CA15-3 作為乳腺癌的重要特異性標(biāo)志物已得到公認(rèn)，血清Hcy 水平的升高與血清腫瘤標(biāo)志物水平的升高一致，并且血清Hcy 水平更能反映體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的活性［3］，本組研究的乳腺癌組和水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明乳腺癌患者血清Hcy 水平的升高與其腫瘤標(biāo)志物CA15-3 水平的升高具有一致性，同時乳腺癌組FA 水平與CA15-3的變化呈負(fù)相關(guān)，表明乳腺癌患者FA 的降低也可導(dǎo)致的CA15-3 的上升。

葉酸是人體內(nèi)必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)，與細(xì)胞內(nèi)DNA 合成、修復(fù)以及正常甲基化有關(guān)，流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)葉酸狀態(tài)與宮頸癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、胰腺癌等有關(guān)。其缺乏可干擾DNA 甲基化和DNA 生物合成，從而改變腫瘤抑制基因的表達(dá)而增加了腫瘤的形成，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。VitB12 作為一碳單位代謝的輔酶，在甲基傳遞過程中起著重要的作用，其缺乏導(dǎo)致DNA 甲基化異常，最終導(dǎo)致乳腺癌的發(fā)生。

本資料還表明，F(xiàn)A 和VitB12 在乳腺組比對照組及乳腺良性腫瘤組顯著降低，與以往研究結(jié)果一致。FA 和VitB12 降低我們分析一是由于乳腺癌患者消化系統(tǒng)受損，其消化吸收功能有缺陷，導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)攝入不足，使FA 和VitB12 含量下降;二是由于乳腺癌患者S-腺苷蛋氨酸的缺乏，影響了調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，DNA 甲基化降低，激活原癌基因，改變了抑癌基因的表達(dá)，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)展。

國外學(xué)者報道［4，5］，高水平同型半胱氨酸。葉酸、維生素B12 的長期不足與患乳腺癌的風(fēng)險高度相關(guān)，說明其水平變化與乳腺癌的發(fā)生有一定聯(lián)系。血清Hcy 升高和血清FA 和VitB12 水平降低可能是乳腺癌的危險因子。有報道認(rèn)為CA15-3 是乳腺癌特異腫瘤標(biāo)志物，但其對腫瘤的早期診斷不足［6］。Hcy、CA15-3 隨臨床分期遞增而遞增，F(xiàn)A 水平提示隨臨床分期遞增而遞減，Hcy、FA、CA15-3 可能與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。因此，不能單采用某一單項(xiàng)作為乳腺疾病的評估指標(biāo)，Hcy 與FA、VitB12 四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測能提高疾病判斷的可靠程度，

［1］Tallova J，TomandJ ＆Bicikova M.Homocysteine in breast cyst fluid.Eur J Clin Invest，2001，31(8):623-627.

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［3］Sun CF，Haven TR，Wu TL，et al.Serum total homocysteine increases with the rapid proliferation rate of tumor cells and decline upon cell death :A potential new tumor marker［J］.Clinica Chimica Acta，2002，321(2):55-58.

［4］LIN CC，YIN MC.B vitamins deficiency and decreased antioxidative state in patients with liver cancer［J］.Eur J Nutr，2007，46(5):293-299.

［5］Ghoshal K，Li X，Datt AJ，et al.A folate and methyl deficient diet alters the expression of DNA methyltransferases and methyl CpG binding proteins involved in epigenetic gene silencing in livers of F344 rats［J］.J Nutr，2006，136(6):1522-1527.

［6］曾利軍，陳建魁，于 農(nóng)，等.血清CEA，CA153 和CYFRA21-1聯(lián)合檢測對乳腺癌的診斷價值［J］.臨床誤診誤治，2011，24(6):72-73.