■郭 利陳顯峰王 昊

(1.沈陽軍區(qū)政治部農(nóng)副業(yè)基地，遼寧沈陽 110112；2.遼寧博基原生態(tài)科技實業(yè)有限公司，遼寧沈陽 110031)

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)原種豬場提供20頭健康的體重約為60 kg杜長大肥育豬作為試驗動物。

1.1.2 試驗儀器

HG-101-1電熱鼓風(fēng)干燥箱；移液槍；LGJ-10冷凍干燥機；FA2004N電子天平；國華HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋；TDL-5-A低速臺式離心機；AMS18全自動生化分析儀。

1.1.3 試驗藥物

基礎(chǔ)日糧購自沈陽眾友牧業(yè)；

茶多酚購自鄭州華冶集團，純度98%；

維生素E購自沈陽眾友牧業(yè)，飼料級。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗地點

本飼養(yǎng)試驗在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)原種豬場進行，實驗室分析在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院動物生化實驗室、飼料分析實驗室、沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)分析中心完成。

1.2.2 試驗動物的飼養(yǎng)管理及屠宰

試驗豬分組后預(yù)飼l周，以適應(yīng)環(huán)境和飼料，于60 kg左右進入正式試驗，試驗期間所有試驗豬均自由采食和飲水，每天記錄健康狀況;試驗初、末稱量體重，其余按照豬場的飼養(yǎng)常規(guī)管理進行。

1.2.3 試驗設(shè)計

隨機將20頭體重為60 kg肥育豬隨機分為5個處理，每個處理2個重復(fù)，每個重復(fù)2頭，基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型飼糧，控制硒的用量為0.1 mg/kg。分別飼喂不含茶多酚(TP)與VE的基礎(chǔ)飼糧；只含200 mg/kgVE的飼糧，含有20 mg/kgTP與200 mg/kg VE，含有40 mg/kgTP與200 mg/kgVE，含有60 mg/kg TP與200 mg/kgVE,從肥育豬育肥期到出欄期間進行飼喂（共計2個月）。其處理見表1。

表1 試驗設(shè)計

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，禁食24 h，禁食期間自由飲水。全部按照規(guī)范程序送定點屠宰場進行屠宰，屠宰后取500 g眼肌進行肉質(zhì)分析。屠宰前1 d頸靜脈取血，離心后將血清-20℃冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 測定指標(biāo)和方法

1.3.1 丙二醛水平

1.3.1.1 測定原理：機體通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid,PUFA)引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并且因此形成脂質(zhì)過氧化物，如醛基(丙二醛Malefic Dialdehyde，MDA)、酮基、羰基、氫過氧基或內(nèi)過氧基，以及新的氧自由基等。脂質(zhì)過氧化物不僅能把活性氧轉(zhuǎn)化為非自由基的脂類分解產(chǎn)物，而且通過鏈?zhǔn)交蜴準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)放大活性氧作用。因此，初始的活性氧能導(dǎo)致很多脂類分解產(chǎn)物的形成，這些分解產(chǎn)物中一些是無害的，另一些則能引起細胞代謝及功能的障礙，甚至死亡。氧自由基不但通過生物膜中多不飽和脂肪酸(PUFA)的過氧化引起細胞損傷。因而，測試MDA的量常?？煞从硻C體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接地反映出細胞損傷的程度。TBARS(Thiobarbitu?ric Acid Reactive Substances)為2-硫代巴比妥酸(TBA)與脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛反應(yīng)生成的物質(zhì)，呈紅色，在波長532 nm時可測其吸光度，故常用來反映肉品脂質(zhì)氧化的程度。用每毫克蛋白中所含丙二醛的nmol數(shù)，表示硫代巴比妥反應(yīng)物的含量。按下列公式計算血漿中MDA的含量。

1.3.1.2 測定方法：采用南京建成生物工程研究所生化測試盒測定，操作步驟按照其說明書進行。

1.3.2 肌內(nèi)脂肪

取出冷凍保存的肉樣，用低溫真空冷凍機冷凍干燥。冷凍干燥后的肉樣粉碎，裝袋保存?zhèn)溆谩７Q取冷凍干燥后的肉樣按索氏抽提法(GB5009.6—85)測定干樣的脂肪含量，即將肉樣進行乙醚浸泡過夜，60℃抽提6～8 h，回收物烘2 h后稱量。

1.3.3 肉中膽固醇

按照GB/T5009.128—2003進行測定。

1.3.3.1 試劑

無水乙醇分析純；KOH 500 g/l；NaCl 50 g/l；石油醚分析純；混合指示劑：冰乙酸（分析純）4 ml和鐵礬顯色液2 ml。

1.3.3.2 操作步驟

將肉樣研磨，稱取磨碎后肉樣0.500 g（精確0.000 1）到具塞刻度管中，做一個重復(fù)。再加入4 ml無水乙醇和0.5 ml KOH(500 g/l),放入65℃水浴鍋中皂化1 h，取出約3 ml鹽溶液(NaCl 50 g/l)，10 ml石油醚，靜置1 h以上，取上層石油醚2 ml，置于10 ml具塞試管內(nèi)，在65℃水浴中用氮氣吹干。加入4 ml冰乙酸，2 ml鐵礬顯色液，混勻，放置15 min，在560～575 nm波長下比色，測吸光度值。按下式計算：

1.3.4 肉中維生素E

1.3.4.1 測定原理

維生素E在菲羅啉的存在下，可使三價鐵離子還原成二價鐵離子，后者在特定的環(huán)境下可與菲羅啉形成粉紅色復(fù)合物，通過比色，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上可查出VE的含量，或者通過公式可計算出VE的含量。

1.3.4.2 測定方法

采用南京建成生物工程研究所生化測試盒測定，操作步驟按照其說明書進行。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件統(tǒng)計程序進行方差分析，差異顯著者進行Duncan's多重比較(各表中數(shù)值表示為Means±Sd)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧中添加茶多酚和維生素E對眼肌中丙二醛水平的影響（見表2）

表2 茶多酚和維生素E不同添加量對杜長大肥育豬眼肌中丙二醛含量的影響（nmol/mgprot）

由表2可見，飼糧中添加茶多酚和維生素E可明顯降低眼肌中丙二醛的水平。處理Ⅰ與其他處理差異極顯著（P＜0.01），可見添加維生素E或茶多酚都可以增強機體的抗氧化性能，從而降低氧化產(chǎn)物丙二醛的含量。處理Ⅱ、處理Ⅲ、處理Ⅳ與處理Ⅴ差異顯著（P＜0.05），說明同時添加茶多酚60 mg/kg和維生素E 200 mg/kg能顯著降低肉中丙二醛的含量。并且隨著茶多酚添加量的增大，丙二醛含量成下降趨勢。說明在飼喂茶多酚和維生素E后，增強了肌體清除自由基的能力，提高了肌體的抗氧化能力。

2.2 飼糧中添加茶多酚和維生素E對眼肌中肌內(nèi)脂肪和背膘厚的影響（見表3）

表3 茶多酚和維生素E不同添加量對杜長大肥育豬眼肌內(nèi)脂肪含量的影響

從表3可看出，飼料中添加維生素E或茶多酚對背膘厚這個指標(biāo)影響不大（P＞0.05），因為這兩種抗氧化物質(zhì)對甘油三酯的生成和代謝無明顯影響，肌肉中甘油三酯與血液中的甘油三酯含量成正相關(guān)，本試驗測得的血液甘油三酯水平各處理間差異不顯著，所以肌肉中甘油三酯水平差異不顯著是正常的，反映在背膘厚上也是不顯著的。

另外，從表3還可看出，添加了茶多酚的處理組比處理Ⅰ（空白組）和單獨添加維生素E的處理Ⅱ肌內(nèi)脂肪含量差異不顯著（P＞0.05）；處理Ⅰ和處理Ⅳ、處理Ⅴ差異極顯著（P＜0.01），說明添加40 mg/kg的茶多酚和200 mg/kg VE與60 mg/kg的茶多酚和200 mg/kg的維生素E均可顯著增加肌內(nèi)脂肪的含量，并且肌內(nèi)脂肪的含量有隨著茶多酚添加量增加而增加的趨勢。處理Ⅰ和處理Ⅱ差異不顯著（P＞0.05），說明單獨添加維生素E對肌內(nèi)脂肪含量影響不大，進一步說可能是單獨添加維生素E，其抗氧化能力有限，防止磷脂被氧化的能力也有局限，所以對磷脂生成量不會有較大影響。處理Ⅲ與處理Ⅳ、處理Ⅴ差異顯著（P＜0.05），說明茶多酚添加量達到60 mg/kg時增加肌內(nèi)脂肪含量的能力顯著增強。所以建議飼料的茶多酚添加量達到60 mg/kg即可。

2.3 飼糧中添加茶多酚和維生素E對眼肌中膽固醇水平的影響（見表4）

表4 茶多酚和維生素E不同添加量對杜長大肥育豬眼肌中膽固醇含量的影響

從表4可看出，處理Ⅰ與處理Ⅱ、處理Ⅲ、處理Ⅳ和處理Ⅴ差異極顯著（P＜0.01），可見，添加了抗氧化劑的處理組眼肌中膽固醇含量明顯降低；處理Ⅳ與其他處理組差異也極顯著（P＜0.01），可見添加茶多酚40 mg/kg和維生素E 200 mg/kg對降低肉中膽固醇含量效果最明顯。

2.4 飼糧中添加茶多酚和維生素E對眼肌中維生素E水平的影響（見表5）

表5 茶多酚和維生素E不同添加量對杜長大肥育豬眼肌中維生素E含量的影響（μg/g）

從表5可看出，處理Ⅰ與處理Ⅱ差異極顯著（P＜0.01），可見在飼糧中添加維生素E可大量增加屠宰后肌肉中的維生素E的含量，這與前人的試驗結(jié)果相一致。結(jié)果表明，日糧中添加的維生素E可以在肉中沉積。處理Ⅱ與處理Ⅲ、處理Ⅳ和處理Ⅴ差異極顯著（P＜0.01），可見飼糧中同時添加維生素E與茶多酚比只添加維生素E更能增加肌肉中維生素E的含量，這證明了茶多酚確有重生維生素E的功能。其中以處理Ⅳ的肉中維生素E的含量最高。

3 結(jié)論

3.1 茶多酚與維生素E的聯(lián)合添加能增加肌肉中維生素E的含量，降低肉中膽固醇含量。

3.2 添加維生素E或茶多酚都可以增強機體的抗氧化性能，飼糧中添加茶多酚和維生素E可明顯降低眼肌中丙二醛的水平（P＜0.01）。處理Ⅱ、處理Ⅲ、處理Ⅳ與處理Ⅴ差異顯著（P＜0.05），說明同時添加茶多酚60 mg/kg和維生素E 200 mg/kg能顯著降低肉中丙二醛的含量。并且隨著茶多酚添加量的增大，丙二醛含量成下降趨勢。

3.3 添加60 mg/kg的茶多酚和200 mg/kg的維生素E可顯著增加肌內(nèi)脂肪的含量（P＜0.01），并且肌內(nèi)脂肪的含量有隨著茶多酚添加量增加而增加的趨勢，但對于背膘厚影響不大（P＞0.05）。

本試驗結(jié)果表明，茶多酚與維生素E兩者之間在豬肉脂質(zhì)品質(zhì)方面均存在顯著的互作效應(yīng)。茶多酚40 mg/kg×維生素E 200 mg/kg組合與茶多酚60 mg/kg×維生素E 200 mg/kg組合效果較好。綜合考慮，建議肥育豬生產(chǎn)實踐可考慮選用茶多酚60 mg/kg×維生素E 200 mg/kg這個組合。

（參考文獻若干篇，刊略，需者可函索）