胡曉燕， 聶 芳

(白銀市第一人民醫(yī)院檢驗科，甘肅白銀730900)

梅毒是由梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)感染致病，全身臟器和組織均可侵犯，導(dǎo)致機(jī)體功能失常、組織破壞乃至死亡［1］。目前對于梅毒發(fā)病的免疫機(jī)制尚不完全了解，有研究表明T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫對TP十分重要，而細(xì)胞因子也在其中起重要作用［2］。因此，我們檢測了早期顯性梅毒患者血清白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平，以探討早期顯性梅毒患者病程中免疫應(yīng)答的變化。

材料和方法

一、研究對象

2009年11月至2010年9月白銀市第一人民醫(yī)院門診及住院早期顯性梅毒患者53例，包括一期梅毒25例、二期梅毒28例，其中男27例，女26例，年齡19～57歲，診斷標(biāo)準(zhǔn):(1)均曾有冶游史;(2)具備梅毒典型臨床癥狀及體征;(3)經(jīng)快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗、螺旋體明膠凝結(jié)試驗檢測均為陽性，無獲得性免疫缺陷綜合征及其他感染性疾病;(4)無其他免疫性疾病;(5)就診前均未有任何治療。正常對照組為健康人群65名，其中男35名，女30名，年齡20～54歲，經(jīng)梅毒初篩的快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗、螺旋體明膠凝結(jié)試驗檢測均為陰性，且無其他感染性、免疫性等重大疾病，正常對照組與梅毒組在年齡及性別構(gòu)成比上差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

二、方法

采集靜脈血2 mL，收集于無菌干燥試管中，離心并得血清后，置－20℃冰箱保存待測。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(DAbS-ELISA)測定血清IL-2、IL-10和TNF-α水平。試劑盒均購自上海活樂生物科技有限公司，操作參照使用說明，在450 nm波長下用酶標(biāo)儀測吸光度(A)值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié) 果

一、梅毒組IL-2、IL-10和TNF-α水平均高于正常對照組(P＜0.01)，一期梅毒組IL-2、TNF-α水平高于二期梅毒組(P＜0.01)，IL-10水平則低于二期梅毒組(P＜0.01)，見表1。

表1 早期顯性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平比較(±s，ng/L)

表1 早期顯性梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平比較(±s，ng/L)

注:與正常對照組比較，*P＜0.01;與一期梅毒組比較，#P＜0.01。

正常對照組65 26.96±12.26 88.02±23.59 89.69±42.13

二、早期顯性梅毒患者血清IL-2與IL-10呈負(fù)相關(guān)(r= －0.760，P=0.000)，與TNF-α 呈正相關(guān)(r=0.633，P=0.000)，而 IL-10 與TNF-α 無明顯相關(guān)性(r= －0.063，P=0.575)

討 論

目前研究認(rèn)為，梅毒的發(fā)病與輔助性T(Th)細(xì)胞密切相關(guān)。Th細(xì)胞分為Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞。Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、白細(xì)胞介素-15(IL-15)等細(xì)胞因子，促進(jìn)機(jī)體的細(xì)胞免疫;Th2細(xì)胞主要分泌白細(xì)胞介素-4(IL-4)、IL-10等細(xì)胞因子，抑制機(jī)體的細(xì)胞免疫。其中IL-2具有刺激T細(xì)胞增生、誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生和增殖、刺激自然殺傷(NK)細(xì)胞的增殖和活化、誘導(dǎo)淋巴因子產(chǎn)生、增強(qiáng)單核-吞噬細(xì)胞活性、提高細(xì)胞免疫等功能，是參與免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞因子，具有抗感染、抗腫瘤和抗移植排斥反應(yīng)等多種功能。IL-10基本功能為抑制Th1細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子及其活性［3-4］，此外還具有抑制單核細(xì)胞表面主要組織相容性抗原Ⅱ類抗原分子表達(dá)、抑制NK細(xì)胞的活性、抑制反應(yīng)性氮氧化物的產(chǎn)生等作用。能夠促進(jìn)Th2型細(xì)胞因子模式產(chǎn)生及抗炎，是維持抗病原體免疫和有害炎癥間平衡的關(guān)鍵因子。TNF-α主要由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生［5］，是一種重要的炎癥因子，能夠直接抑制增殖的腫瘤細(xì)胞并使其凋亡，影響其他細(xì)胞的生長分化，激活T細(xì)胞，促進(jìn)IL-1、IL-2等產(chǎn)生及IL-2受體、主要組織相容性抗原Ⅱ類抗原等表達(dá)，促進(jìn)組織修復(fù)及調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，參與抵抗細(xì)菌、病毒等病原微生物感染。

本研究結(jié)果顯示，早期梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α水平均高于正常對照組(P＜0.01)，說明梅毒螺旋體感染機(jī)體后，機(jī)體隨即做出反應(yīng)，產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫，并分泌IL-2、IL-10及TNF-α等細(xì)胞因子參與機(jī)體免疫，最終使血液中三者的濃度上調(diào)。一期梅毒患者IL-2、TNF-α水平高于二期梅毒患者，IL-10水平低于二期梅毒患者(P＜0.01)，一期梅毒時CD4+T淋巴細(xì)胞分泌IL-2增多，患者血清IL-2濃度上升，從而刺激T淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞增殖與分化，促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，有助于早期梅毒病程中TP的清除［6-7］。二期梅毒時CD4+T淋巴細(xì)胞分泌IL-10逐漸增多，而IL-2的生成逐漸減少，且這一趨勢隨著病程的發(fā)展而更加顯著，導(dǎo)致細(xì)胞免疫抑制逐漸加劇，最終發(fā)生Th1/Th2免疫應(yīng)答失衡，從而引起TP感染的潛伏和持續(xù)，這與劉延菊等［7］的研究結(jié)果相似。

曹雙林等［8］在檢測二期梅毒患者IL-6、IL-8及TNF-α水平時發(fā)現(xiàn)，一期、二期和潛伏梅毒患者血清TNF-α水平明顯高于對照組，且銀屑病樣皮疹組血清TNF-α水平明顯高于其他二期梅毒患者(P＜0.05)，從而推測TNF-α參與TP感染后機(jī)體的病理反應(yīng)，且具有生長因子樣作用，可促進(jìn)表皮生長因子受體表達(dá)，協(xié)同表皮生長因子的促增殖功能，促進(jìn)二期梅毒銀屑病樣皮疹發(fā)生。本研究不僅發(fā)現(xiàn)了早期梅毒患者血清TNF-α水平高于對照組(P＜0.01)，而且還發(fā)現(xiàn)一期梅毒患者TNF-α水平高于二期梅毒患者(P＜0.01)，這表明隨著Th1型免疫應(yīng)答逐漸減弱，Th2型免疫應(yīng)答占據(jù)優(yōu)勢，具有促進(jìn)細(xì)胞免疫功能的TNF-α也發(fā)生了適當(dāng)下調(diào)以調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。

本研究結(jié)果還顯示，早期梅毒患者血清IL-2和IL-10的表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)，IL-2和TNF-α的表達(dá)之間呈正相關(guān)，IL-10和TNF-α的表達(dá)之間則無明顯相關(guān)性，進(jìn)一步表明IL-2和TNF-α能促進(jìn)機(jī)體的細(xì)胞免疫，IL-10抑制了機(jī)體的細(xì)胞免疫。

綜上所述，TP感染人體后，在早期梅毒的發(fā)展階段，IL-2、IL-10和TNF-α水平發(fā)生改變，造成Th1向Th2方向漂移，Th1/Th2免疫應(yīng)答出現(xiàn)失衡，抗體對TP的抵抗力下降，使TP發(fā)生免疫逃逸，最終導(dǎo)致病程慢性化。因此，檢測梅毒患者血清IL-2、IL-10和TNF-α的表達(dá)水平，一方面能夠使臨床對梅毒患者全身或局部的機(jī)體免疫狀況有正確的了解，另一方面也可以用于指導(dǎo)臨床免疫治療及預(yù)后觀察。

［1］袁文常，劉慧姝.梅毒致病分子免疫機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志，2007，34(1):49-51.

［2］Lusiak M，Podwińska J.Interleukin 10 and its role in the regulation of the cell-mediated immune response in syphilis［J］.Arch Immunol Ther Exp(Warsz)，2001，49(6):417-421.

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［8］曹雙林，傅玲玲，符 梅，等.二期梅毒患者血清白介素6、白介素8及腫瘤壞死因子α測定［J］.中華皮膚科雜志，2001，34(6):423-424.