張瑞姿

（山西省林木育種研究中心，山西 太原 030031）

植物生長調(diào)節(jié)劑是指由人工合成的、能夠調(diào)控植物生長發(fā)育的化學物質(zhì)。在觀賞植物的組織培養(yǎng)中，植物生長調(diào)節(jié)劑是培養(yǎng)基的關(guān)鍵物質(zhì)，雖用量極小，但在植物組織培養(yǎng)中起著重要和明顯的調(diào)節(jié)作用。在植物組培的過程中如果搭配的比例合適，組培才能成功。在植物組培中常用的生長調(diào)節(jié)劑有6芐氨基嘌呤（6-BA），萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA），吲哚丁酸（IBA），2,4-D,赤霉素（GA3）等。

1 誘導愈傷組織的形成

在觀賞植物的組織培養(yǎng)中，為避免發(fā)生變異，一般希望盡量少產(chǎn)生愈傷組織，盡快形成不定芽，所以生長素的用量應盡量控制。生長素一般要與適量的細胞分裂素配合才能達到誘導愈傷組織的目的，但在通常情況下，含量過高，則培養(yǎng)物會表現(xiàn)旺盛的愈傷組織生長，細胞團比較松散，甚至出現(xiàn)水漬狀和玻璃化，很難再分化出幼苗。相反，生長素濃度過低，則表現(xiàn)為愈傷組織生長緩慢，顏色暗淡，隨培養(yǎng)時間的增加還會出現(xiàn)褐化和死亡。

1.1 長壽花葉片再生體系研究

研究發(fā)現(xiàn)，生長素適中時，培養(yǎng)溫度25℃，培養(yǎng)時間40d時，材料明顯增粗或加厚，切口處有愈傷組織生長，進而分化不定芽，分化率達到70%。過于緊實和松散的愈傷組織均不利于分化和成苗。實驗證明，在長壽花葉片再生體系的研究中，細胞分裂素與生長素的搭配為BA1.0mg/l+NAA0.5mg/l時，誘導葉片形成愈傷組織效果最好。

1.2 菊花葉片組織培養(yǎng)

先暗培養(yǎng)15d，再移至光強2000勒克斯下，設置3組對照，研究生長素種類和濃度對誘導愈傷組織影響。第一組：MS基本培養(yǎng)基；第二組：MS+2,4-D（1-4）mg/l；第三組：MS+NAA（0.5-2.0）mg/l。通過實驗發(fā)現(xiàn)，不添加任何生長素的MS空白培養(yǎng)基培養(yǎng)的時間較長，誘導效果也最差，幾乎為零；單使用2,4-D在1-4mg/l時均可誘導愈傷組織，且濃度加大，誘導率升高；NAA在（0.5-2.0）mg/l時可誘導愈傷組織，0.5mg/l時為最好效果。通過實驗得出，生長素是誘導愈傷組織形成的生長物質(zhì)，2,4-D和NAA用量是決定愈傷組織誘導率的關(guān)鍵因素。

1.3 秋海棠葉片組培實驗

設定6-BA的濃度一定時，改變NAA的用量，對比實驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相同的培養(yǎng)時間40d內(nèi)，低濃度NAA在0.5mg/l時，生成極少數(shù)愈傷組織，且愈傷組織生長緩慢，繼而隨著培養(yǎng)時間的增加而出現(xiàn)死亡；高濃度NAA4mg/l時，愈傷組織生長旺盛，比較松散，不分化不定芽，隨著時間的增加而出現(xiàn)玻璃化；只有NAA在（1-2）mg/l時，才可以從葉片形成結(jié)構(gòu)密實的愈傷組織，進而分化不定芽，60d可獲得秋海棠的組培植株，其增殖率高達60%。

2 胚狀體的產(chǎn)生

胚狀體亦稱體細胞胚，指在組織培養(yǎng)過程中，由植物體細胞所形成的類似于合子胚的結(jié)構(gòu)。它具有根、莖結(jié)構(gòu)，能夠一次性形成再生植株。在組織培養(yǎng)過程中，通過胚狀體獲得的幼苗已經(jīng)在很多花卉種類上廣泛應用。在胚狀體發(fā)生過程中，植物生長調(diào)節(jié)劑對它們的形成是十分重要的，赤霉素、細胞分裂素等物質(zhì)會抑制胚狀體的發(fā)生，2,4-D等生長素對胚狀體的發(fā)生有很重要的作用。在長壽花胚狀體的誘導實驗中，不同生長調(diào)節(jié)劑的配比試驗結(jié)果顯示，胚性愈傷組織誘導產(chǎn)生胚狀體速度最快，誘導率最高的培養(yǎng)基是MS+BA2.0mg/l+2,4-D（1-4）mg/l時，當用培養(yǎng)基MS+BA2.0mg/l+NAA（0.1-0.3）mg/l時，僅有少量的胚狀體產(chǎn)生，或者無胚狀體產(chǎn)生。

3 誘導腋芽和不定芽

從細胞學上來說，腋芽的遺傳物質(zhì)十分穩(wěn)定，故用誘導腋芽的方法獲取組培苗，適合于花卉品種的快速繁殖。不定芽是指莖尖、腋芽以外的其他器官或組織上所形成的芽，細胞分裂素和生長素的濃度搭配決定了誘導腋芽和不定芽質(zhì)量。以月季為例說明。

3.1 細胞分裂素6-BA濃度對月季腋芽誘導的影響

在月季的組培中，用MS為基本培養(yǎng)基，6-BA加入量為（0.5-2.0）mg/l時，實驗過程發(fā)現(xiàn)，當6-BA為0.5mg/l時，腋芽誘導率為21%；6-BA為1.0mg/l時，誘導率為86%；6-BA為1.5mg/l時，誘導率為95%；6-BA為2.0mg/l時，誘導率下降為86%。結(jié)果表明，6-BA用于月季的最佳腋芽誘導濃度為1.50%。

3.2 不同生長素濃度對月季不定芽增殖的影響

在選擇生長素時，IAA不穩(wěn)定易分解，最好不用。GA有促進細胞伸長作用，對一些長勢弱的品種適量加入可以促進植物的生長。一般組培進行增殖時，最常用的是NAA和IBA，所以就這兩種生長素對月季不定芽增殖進行實驗，兩者濃度都在（0.05-0.5）mg/l時，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當濃度在0.05時，用NAA的增殖系數(shù)為2.1時，IBA增殖系數(shù)為2.5，效果不明顯；當濃度在0.2時，用NAA的增殖系數(shù)變化不大，而用IBA達到增殖系數(shù)4.5；當濃度提高到0.3時，加入IBA培養(yǎng)基增殖系數(shù)為6.5，且分化出的不定芽健壯，生長速度快；而當濃度達到0.5時，加入NAA的增殖不明顯，且出現(xiàn)玻璃化現(xiàn)象；而加入IBA的培養(yǎng)物，分化的不定芽矮小，且生長緩慢。結(jié)果表明，最佳不定芽分化增殖的生長素濃度為：IBA0.3mg/l。

4 試管苗的生根

在進行組培生產(chǎn)中，經(jīng)常會碰到有的種類長時間不會生根或生根率很低，有時又是平時生根良好的品種突然長根不良或長根時間延長，無論何種原因?qū)е碌纳缓?，這些苗木在出瓶后，在過渡培養(yǎng)中，都很難再長出新的根系。多數(shù)情況下，這種苗移栽后，不能適應外面的環(huán)境條件，很快死亡，導致組培失敗。長期以來，我們對生根不良原因分析，除環(huán)境、品種間的差異外，激素種類和濃度也是至關(guān)重要的一個因素。在生產(chǎn)上，從節(jié)減成本角度上講，NAA是最經(jīng)濟高效的生根激素，多數(shù)花卉要在0.1-1.0mg/l時培養(yǎng)15d左右就會生根。生根率不一定隨生長素的濃度升高而提高，如菊花在NAA1.0mg/l以上時，生根少，且短粗，移栽過程中極易碰傷根系，死亡率很高；而在0.2mg/l左右時，根系分布均勻，根的數(shù)量及粗細適中，移栽成活率高。在月季組培中，當NAA含量在（0.05-0.1）mg/l時，生根效果好，移栽成活率高。對于一些單獨使用NAA不能生根或生根不好的品種，要考慮與IAA、IBA混用。例如，在秋海棠的生根實驗中，NAA含量在0.5mg/l時，再添加適量IBA，才能達到生根的效果。實踐證明，若用IAA誘導生根，濃度只能在1.0以下，否則對生根的促進作用不明顯，反而會急劇降低移栽成活率。

5 結(jié)語

在植物組織培養(yǎng)中，植物生長調(diào)節(jié)劑用量小，但生理效應大，對植物組培成功與否起決定性作用，基本培養(yǎng)基保證培養(yǎng)物的生存與最低的生理活動，但只有配合恰當?shù)募に?，才能誘導細胞分裂的啟動、愈傷組織的形成和增殖以及芽與根分化等變化。培養(yǎng)物對激素的需求取決于它本身的激素水平對激素的敏感性，也因植物種類不同而各異。只有經(jīng)過無數(shù)次探索研究，才能總結(jié)出不同植物的各種規(guī)律，正確合理地應用于組織培養(yǎng)中，為植物組培快繁做出貢獻。

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