劉 博, 匡友誼, 佟廣香, 尹家勝,*

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所, 黑龍江 哈爾濱 150070;2. 上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院, 上海 201306)

微衛(wèi)星分析9個哲羅魚野生群體的遺傳多樣性

劉 博1,2, 匡友誼1, 佟廣香1, 尹家勝1,*

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所,黑龍江 哈爾濱150070;2.上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院,上海201306)

哲羅魚(Hucho taimen)是我國珍稀的土著冷水性魚類, 目前已處于瀕危狀態(tài)。為了解哲羅魚的種群遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu), 該研究利用20對微衛(wèi)星標(biāo)記對9個野生哲羅魚群體進(jìn)行了分析。結(jié)果表明：9個哲羅魚群體的觀測雜合度在0.0994～0.8882, 期望雜合度在0.2005～0.8759, PIC指數(shù)在0.3432～0.5261, 其中呼瑪河群體的遺傳多樣性較低。群體間的Fst在0.0246～0.2333 (P＜0.0001),Nm在0.8216～9.9292, 群體間遺傳分化較明顯, 基因交流少；群體的同胞系比例在27.78%～90.91%, 說明近交壓力較大, 可能經(jīng)歷過遺傳瓶頸或存在這樣的風(fēng)險(xiǎn)。AMOVA分析表明，群體間各基因座遺傳分化系數(shù)的均值為0.1081；聚類分析結(jié)果顯示北極江段群體獨(dú)立為一支,呼瑪河群體與烏蘇里江各群體聚為一支, 黑龍江中上游各群體聚為一支。這些結(jié)果表明，哲羅魚資源量的減少已經(jīng)影響了群體間的基因交流。應(yīng)杜絕對哲羅魚資源破壞性捕撈，同時加強(qiáng)群體間基因交流, 以期達(dá)到全面保護(hù)哲羅魚種質(zhì)資源的目的。

哲羅魚; 微衛(wèi)星; 遺傳多樣性; 遺傳結(jié)構(gòu)

哲羅魚(Hucho taimen)屬鮭形目(Samoniformes)鮭科(Salmonidea)哲羅魚屬(Hucho), 歷史上曾廣泛分布于東北歐的伏爾加河、皮喬拉河，西伯利亞的貝加爾湖流域及中國的黑龍江流域、額爾齊斯河流域(Holcik et al, 1988; Li et al, 1966)等地區(qū)。20世紀(jì)50—60年代, 在黑龍江、烏蘇里江、松花江各水系中均存在有哲羅魚群體, 但是, 由于近幾十年來?xiàng)⒌丨h(huán)境的惡化、產(chǎn)卵場的破壞及過度捕撈導(dǎo)致其野生資源量急劇下降。目前僅在黑龍江上游、烏蘇里江流域和新疆的哈納斯湖存在一定數(shù)量的哲羅魚群體, 其他原棲息地種群已經(jīng)消失或僅存零星個體 (Ren et al, 2002; Dong et al, 1998a), 1998年被列為我國瀕危物種(Le & Chen, 1998)。有學(xué)者研究了哲羅魚的種群結(jié)構(gòu)、資源量、分布區(qū)域等現(xiàn)狀 (Jiang et al, 2004; Yin et al, 2003; Ren et al, 2002; Dong et al, 1998b; Li et al, 1966), 發(fā)現(xiàn)近20年來哲羅魚的資源量下降較快, 尤其是從1998—2003年, 烏蘇里江流域的哲羅魚資源量下降了50%。由此可見, 保護(hù)哲羅魚的種質(zhì)資源及資源量勢在必行。為更好地?cái)U(kuò)大有效繁殖哲羅魚群體和恢復(fù)其資源量, 有必要從擁有更豐富信息量的基因組角度出發(fā), 利用分子生物學(xué)方法, 掌握哲羅魚的遺傳多樣性現(xiàn)狀和種群遺傳結(jié)構(gòu)。

目前利用分子生物學(xué)方法對哲羅魚種質(zhì)資源的研究報(bào)道較少, 且過去幾年, 由于已知的哲羅魚DNA序列較少, 其可用的微衛(wèi)星分子標(biāo)記較少, 研究多采用了AFLP標(biāo)記 (Kuang et al, 2007; Tong et al, 2009), 該方法對實(shí)驗(yàn)技術(shù)和DNA質(zhì)量要求較高,存在一定的局限性。在利用微衛(wèi)星標(biāo)記方面, 由于可用標(biāo)記缺少, 僅僅是對個別江段的哲羅魚群體分析(Liang et al, 2004)和在親子鑒定方面的應(yīng)用(Zhang et al, 2010)。隨著目前哲羅魚可用的微衛(wèi)星標(biāo)記逐漸增多 (Froufe et al, 2004; Hatakeyama et al, 2005; Tong et al, 2006a, 2006b), 有必要對黑龍江流域和烏蘇里江流域的哲羅魚野生群體的遺傳多樣性進(jìn)行更全面的分析。本研究利用20對微衛(wèi)星標(biāo)記對黑龍江流域和烏蘇里江流域哲羅魚9個群體的遺傳多樣性、遺傳結(jié)構(gòu)及基因流進(jìn)行了分析, 以期為哲羅魚的種質(zhì)資源保護(hù)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

九個野生哲羅魚群體共161尾, 剪取鰭條, 用75%乙醇固定保存, 采樣地點(diǎn)及樣本數(shù)量見表1及圖1。

表1 采樣地點(diǎn)與樣本數(shù)量Tab. 1 The sampling sites and the number of sample

圖1 采樣點(diǎn)圖示Fig. 1 Sampling sites were showed in the map

1.2 基因組DNA的提取

將鰭條樣品取出, 在超純水中反復(fù)清洗除去酒精后采用酚、氯仿提取樣品DNA, 用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測, 用紫外分光光度計(jì)測定其濃度和純度后備用。

1.3 微衛(wèi)星引物篩選

本研究篩選出20對能穩(wěn)定擴(kuò)增且條帶清晰的微衛(wèi)星引物, 用于9個群體的遺傳多樣性分析。其中，HtaCA25、HtaCA69、HtaCA63、HtaCA101由本實(shí)驗(yàn)室自行開發(fā) (Tong et al, 2006b), 其余標(biāo)記來自GenBank (Froufe et al, 2004; Hatakyama et al, 2005), 引物序列信息見表2。

1.4 PCR擴(kuò)增及電泳

PCR擴(kuò)增反應(yīng)采用15 μL體系, 其中包括20 ng/μLDNA模板1 μL,TaqDNA聚合酶0.6 U, 10×PCR Buffer 1.5 μL, dNTP (2.5 mmol/L) 1.2 μL, MgCl2(25mmol/L) 0.9 μL, 10 μmol/μL上下游引物各0.5 μL, 無菌水補(bǔ)足15 μL。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性5 min; 94 ℃變性30 s, 退火30 s, 72 ℃30 s, 30個循環(huán)；最后72 ℃延伸10 min。

表2 20對微衛(wèi)星引物信息Tab. 2 Twenty SSR primers available to Hucho taimen

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用8%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳 (8 V/cm, 4 ℃, 8～10 h)進(jìn)行檢測, 經(jīng)銀染后, 用掃描儀掃描成像。

1.5 數(shù)據(jù)分析

利用gel-pro軟件(version4.5)分析所獲得的微衛(wèi)星指紋圖, 由Genepop (version4.1)進(jìn)行各基因座間連鎖不平衡分析, 卡方檢驗(yàn)估計(jì)Hardy-Weiberg平衡偏離；用Popgene (version1.32)分析以下參數(shù)：基因頻率P、觀測等位基因Na、有效等位基因Ne、Shannon多樣性指數(shù)I、觀測雜合度Ho、期望雜合度He、Nei’s遺傳距離D和遺傳相似系數(shù)S、遺傳偏離指數(shù)d, 多態(tài)信息含量PIC使用Bostein公式計(jì)算(Bostein et al, 1980)。

用AMOVA方法分析群體間全局(Globle) F統(tǒng)計(jì)量及群體間配對的遺傳分化Fst (pariwiseFst),并進(jìn)行置換檢驗(yàn) (Permutaion tests,10 000次)。使用軟件NeEstimator (version 1.3), 采用Linkage Disequilibrium (Robin, 2006；Waples et al, 2008) 和Heterozygote Excess兩種方法估算有效群體的大小,用Kingroup (version20080229b)進(jìn)行全同胞和半同胞系的檢測(Konovalov et al, 2004)。

按照Wright的方法計(jì)算反映基因流強(qiáng)度的群體每代遷移數(shù)Nm, 其關(guān)系式為：Nm=(1?Fst)/4Fst。使用Bottleneck遺傳瓶頸分析軟件檢測各群體遺傳瓶頸, 采用Stepwise Mutation Model (SMM)、Infinite Allele Model (IAM)以及Two Permutation Model (TPM) (70% IAM, 70% SMM)這3種模型進(jìn)行評估(Comuet et al, 1996)。

采用phylip (version3.69)軟件, 以UPGMA (Unweighted Pair Group Method with Arithmetic mean)法進(jìn)行聚類分析并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹, 遺傳距離利用Nei’s公式計(jì)算。

2 結(jié) 果

2.1 遺傳多樣性分析

各群體的觀測等位基因Na、有效等位基因Ne、Shannon多樣性指數(shù)I、觀測雜合度Ho、期望雜合度He、遺傳偏離指數(shù)d、多態(tài)信息含量PIC等遺傳多樣性參數(shù)見表3。從表中可以看出,Na、Ne、I、PIC這4個參數(shù)的值都是北洪 (BH)群體最高, 呼瑪河 (HM)群體最低。9個群體的多態(tài)信息含量PIC為0.3432～0.5261, 其中北洪 (BH)群體最大, 呼瑪(HM)群體最小。

全局Hardy-Weiberg檢驗(yàn)表明, 20個位點(diǎn)除203A外均有不同程度的偏離Hardy-Weiberg平衡,而對各個群體的HW檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，除虎頭 (HT)群體外, 其余各群體均有30%左右的位點(diǎn)偏離HW平衡(P＜0.05), 其中BH群體最多達(dá)到了12個(表4)。分析各個群體的遺傳偏離指數(shù)d發(fā)現(xiàn), 除BH群體遺傳偏離指數(shù)d為正數(shù)外, 其他群體均為負(fù)數(shù), 說明大多數(shù)群體遺傳偏離平衡表現(xiàn)為雜合子缺失, 其中BH、GH 這2個群體遺傳偏離程度較高。

2.2 群體遺傳分化分析

群體間配對遺傳分化度 (Fst)和基因流 (Nm)分析見表5。全局Fst和群體間配對Fst分析結(jié)果發(fā)現(xiàn), 總的群體間遺傳多樣性為0.1081, 群體間方差組分占總方差的10.81%, 并達(dá)到極顯著水平(P＜0.0001), 種群的遺傳多樣性主要分布在種群內(nèi),占變異成分的89.19%, 配對群體間的Fst在0.0246～0.2333, 且均達(dá)到極顯著水平 (P＜0.0001),Nm在0.8216～9.9292, ZJ與HQ之間遺傳分化度最小, 基因流最大, BH與HM之間遺傳分化度最大,基因流最小。

表3 9個群體的遺傳多樣性檢測Tab. 3 Genetic diversity analyses for Hucho taimen in nine populations

表4 各位點(diǎn)哈代溫伯格平衡檢驗(yàn)Tab. 4 HW-equivalence results of each population at each locus

表5 群體間遺傳分化度Fst(對角線上)和基因流Nm(對角線下)Tab. 5 Pairwise Fst values (above diagonal) and Gene flowNm (under diagonal) between all pairs of geographic populations

2.3 遺傳瓶頸檢測

通過Bottleneck對各群體的遺傳瓶頸檢測發(fā)現(xiàn), ZJ和HM群體在IAM和TPM模型下都表現(xiàn)出雜合子過剩 (P＜0.001)現(xiàn)象, 且表現(xiàn)出偏離L-shaped分布；HQ和BH群體則在這兩種模型下都表現(xiàn)出雜合子過?，F(xiàn)象 (P＜0.001), 但未偏離L-shaped的分布； HT群體則在IAM模型下表現(xiàn)出極顯著的雜合子過?，F(xiàn)象 (P＜0.0001), 且表現(xiàn)出偏離L-shaped分布； 而GH、XK這兩個群體只檢測到偏離L-shaped分布, 而在3種模型下都未檢測到雜合子過剩。從總體來看, 以上這幾個群體在歷史上都很有可能經(jīng)歷過遺傳瓶頸(Comuet et al,1996)。

2.4 有效群體估計(jì)和同胞家系的檢測

使用軟件NeEstimator (version 1.3)檢測有效群體, 其中采用連鎖不平衡計(jì)算方法 (Linkage Disequilibrium)檢測時, HT群體的有效群體數(shù)量最大, 為74.6；BH群體最小, 僅為6.2。然而，BJ、HM、HQ、LG在內(nèi)的幾個群體通過該計(jì)算方法無法檢測到有效群體(Robin, 2006；Waples et al, 2008),而通過雜合子過剩計(jì)算方法 (heterozygote excess)檢測時XK群體的有效群體數(shù)量最大為41.4, 而HQ群體最小僅為4.6。從總體的趨勢來看, 9個群體的有效群體數(shù)量都較小, 通過同胞家系的檢測證明了這一點(diǎn)。在采用Kingroup進(jìn)行的同胞對檢測中9個群體中共檢測出66個同胞/半同胞對, 包含113個個體, 占所有個體數(shù)的70.18%, 除LG、XK、GH這4個群體同胞對比例低于50%, 其余各群體屬于同胞對的個體，占總樣本比例都高于70%, 其中BH最高, 達(dá)到了90.91%?？傮w來說, 各群體檢測到的同胞對比例都較大。

2.5 群體間遺傳距離及聚類分析

利用Popgene軟件計(jì)算了群體間Nei氏遺傳距離D和遺傳相似系數(shù)S, 見表6。各群體間以HM與BH之間遺傳距離最大 (D為0.3031), 而遺傳相似系數(shù)最低 (S為0.7386)；HQ與ZJ之間遺傳距離最小 (D為0.0436), 而遺傳相似系數(shù)最高 (S為0.9573)。

表6 群體間Nei氏遺傳距離D(對角線下)和遺傳相似系數(shù)S(對角線上)Tab. 6 Nei's genetic distance (under diagonal) and Genetic similarity coefficient(above diagonal) between all pairs of geographic populations

根據(jù)Nei氏遺傳距離運(yùn)用UPGMA法對9個哲羅魚群體進(jìn)行聚類分析, 見圖2。從聚類圖可以看出, 9個群體中, BJ群體獨(dú)立為一支, HT、ZJ、HQ、HM為一大類, BH、GH、LG、XK聚為一類。

圖2 9個哲羅魚群體的UPGMA聚類圖Fig. 2 Nine populations’ UPGMA dendrogram of Hucho taimen

3 討 論

3.1 群體遺傳多樣性

種群遺傳多樣性是衡量某個物種資源量的一個重要依據(jù), 也是生命進(jìn)化和適應(yīng)環(huán)境的基礎(chǔ)。有效等位基因Ne、觀測雜合度Ho、期望雜合度He、多態(tài)信息含量PIC等都是反映群體遺傳多樣性的度量, 其數(shù)值越大, 表示遺傳多樣性越高, 基因豐富度越高 (Robin, 2006)。期望雜合度He也稱為基因多樣度, 一般情況下都采用它作為度量群體遺傳變異的一個最適參數(shù)。期望雜合度大小近似的反映出遺傳結(jié)構(gòu)變異程度的高低 (Jurg, 2001), 而且很重要的一點(diǎn)是在樣本量較小的情況下, 實(shí)驗(yàn)中觀測到的每位點(diǎn)等位基因數(shù)、平均等位基因數(shù)及基因豐富度指數(shù)均會受到一定程度的影響, 但一般情況下卻和期望雜合度無明顯相關(guān)性 (Yan & Zhang, 2004)。哲羅魚由于野生種群數(shù)量少, 處于瀕危狀態(tài),樣本采集困難, 因而必須在小樣本量的情況下獲得足夠多的遺傳數(shù)據(jù), 因而在本實(shí)驗(yàn)中期望雜合度在反映群體遺傳結(jié)構(gòu)變異上具有非常重要的參考價值。本實(shí)驗(yàn)中觀測雜合度Ho在0.3818～0.6658,期望雜合度He在0.3467～0.6411, 處于中等偏低的水平。9個群體中, HM群體的期望雜合度較低, 這可能是由于HM群體位于黑龍江上游支流呼瑪河中,與其他黑龍江流域群體的基因交流相對較少。Hardy-Weinberg 檢驗(yàn)的結(jié)果顯示每個群體都有部分位點(diǎn)偏離平衡。近年來哲羅魚的資源量下降, 野生群體數(shù)量較少, 群體內(nèi)近交嚴(yán)重, 這很可能是造成位點(diǎn)偏離HW平衡的主要原因 (Antoro et al, 2006), 而對各群體同胞系檢測的結(jié)果也印證了這一點(diǎn)。而對多態(tài)性PIC指數(shù)的檢測也顯示9個群體中HM群體遺傳多樣性偏低, 進(jìn)一步說明了由于環(huán)境惡化及過度捕撈導(dǎo)致呼瑪河哲羅魚資源量嚴(yán)重下降, 特別是繁殖群體數(shù)量減少(Hong, 2003; Wright, 1978)造成了嚴(yán)重的近交行為, 從而導(dǎo)致其遺傳多樣性較低。而呼瑪河作為完全在我國境內(nèi)的河流, 其野生哲羅魚群體無法像其他黑龍江干流群體一樣存在和俄羅斯境內(nèi)群體的基因交流 (Yin et al, 2003), 因此有必要加強(qiáng)對其繁殖群體的保護(hù)以及和其它群體間的基因交流以防止過度的近交行為, 從而使群體的遺傳多樣性得到保護(hù)。

3.2 群體遺傳分化與基因流

本研究顯示群體間遺傳變異占總變異的10.81%, 群體間遺傳變異顯著；PairwiseFst在0.0246～0.2333, 大部分在0.05～0.25，表明9個哲羅魚群體間遺傳分化程度屬于較高的水平(Palstra et al, 2007), 這可能與哲羅魚的產(chǎn)卵習(xí)性有關(guān)。哲羅魚通常在一次繁殖時是一雄一雌繁殖 (Holcik et al, 1988), 容易造成不同江段的個體產(chǎn)生較為明顯的遺傳分化。而對基因流Nm的分析結(jié)果顯示, 9個群體之間除HM群體與GH、BH這2個群體之間的Nm＜1外, 其余Nm＞l, 平均值為2.4405, 該值大于佟廣香等 (Tong et al, 2009)研究黑龍江流域5個哲羅魚群體所得的Nm值。理論上Nm ＜1時, 遺傳漂變是群體間遺傳分化的主要因素, 遺傳漂變能夠?qū)е履承┑任换蛳? 改變?nèi)后w的遺傳結(jié)構(gòu)(Slatkin, 1987)；Nm＞l時, 基因流足以抵制遺傳漂變的作用,同時防止群體分化(Plosky et al,1993)。 本實(shí)驗(yàn)研究的9個群體之間的基因交流大部分能夠阻止遺傳漂變引起的遺傳分化, 但HM群體與GH、BH這三個群體之間基因交流較少, 遺傳漂變已經(jīng)成為遺傳結(jié)構(gòu)的主導(dǎo)因素, 需要引起足夠重視, 加強(qiáng)該群體與其他野生群體間的基因交流。

3.3 遺傳瓶頸和種質(zhì)資源保護(hù)

有研究表明, 在短期內(nèi), 遺傳瓶頸的發(fā)生可能只會導(dǎo)致基因豐富程度的下降, 但在今后較長的一段時期內(nèi)卻會導(dǎo)致雜合度的持續(xù)性降低。在經(jīng)歷過遺傳瓶頸之后, 種群的增長程度決定了雜合度下降的程度( Nei et al, 1975)。從長期來看, 單次的遺傳瓶頸(或建立者效應(yīng))對遺傳多樣性和遺傳變異的影響不會太大, 但連續(xù)性的瓶頸效應(yīng)卻會造成遺傳變異的增加和遺傳多樣性的降低(Clegg et al, 2002; Pruett & Winker, 2005)。如果此時種群的數(shù)量得不到恢復(fù), 由于遺傳漂變, 有可能是種群基因庫中有益基因的迅速丟失而最終導(dǎo)致物種的滅絕。本研究顯示哲羅魚野生群體面臨遺傳瓶頸的風(fēng)險(xiǎn), 而且群體之間的基因交流較低, 這與哲羅魚的資源調(diào)查顯示其資源量呈逐年下降的趨勢是分不開的(Dong et al, 1998a)。Bottleneck的檢測結(jié)果很可能是近期的有效群體(Ne)減少所帶來的經(jīng)歷遺傳瓶頸的風(fēng)險(xiǎn)(Cornuet & Luikart, 1996), 特別是近年來的資源調(diào)查顯示, 在我國境內(nèi)的內(nèi)河中, 哲羅魚的繁殖群體幾乎消失, 黑龍江和烏蘇里江干流中的個體多來自俄羅斯境內(nèi)的支流 (Yin et al, 2003)，而且本研究顯示呼瑪河作為我國境內(nèi)為數(shù)不多的尚有哲羅魚野生群體的內(nèi)河, 其種群多樣性較干流群體低, 如果不及時加以保護(hù), 其哲羅魚種群很可能也會面臨消失的威脅。

Chesser (1991)的社會模型揭示出通過保護(hù)現(xiàn)有的繁殖群體來保持遺傳血統(tǒng)的穩(wěn)定性能夠有效地維持遺傳多樣性。所以，在保護(hù)哲羅魚的工作中,設(shè)立自然保護(hù)區(qū), 保護(hù)好現(xiàn)有的產(chǎn)卵群體, 對維持其遺傳基因庫的豐富程度意義重大。但針對現(xiàn)在各野生群體間基因交流較少這一問題, 特別是對于呼瑪河群體這樣遺傳豐富度較低的群體, 可以引入與其親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的群體進(jìn)行交配以豐富其后代的遺傳信息量(Clegg et al, 2002; Pruett & Winker, 2005), 從而彌補(bǔ)由于基因漂變導(dǎo)致的遺傳信息的丟失。

本研究利用微衛(wèi)星標(biāo)記研究了9個野生哲羅魚群體的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu), 顯示了當(dāng)前黑龍江流域和烏蘇里江流域哲羅魚群體遺傳現(xiàn)狀。這表明哲羅魚較低的野生資源量致使哲羅魚群體內(nèi)近交現(xiàn)象嚴(yán)重, 導(dǎo)致其遺傳多樣性水平有降低的風(fēng)險(xiǎn),各群體經(jīng)歷遺傳瓶頸的風(fēng)險(xiǎn)增大。由于各群體間基因交流較少, 在對哲羅魚種質(zhì)資源進(jìn)行保護(hù)時,不僅僅要通過設(shè)立保護(hù)區(qū)和人工放流等方式增加自然群體數(shù)量, 同時更需要人為地增加群體間的基因交流, 避免種群遺傳多樣性的下降和消減群體內(nèi)部的近交壓力, 以期能全面的保護(hù)和恢復(fù)哲羅魚野生資源。

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Analysis of genetic diversity on 9 wild stocks of Taimen (Hucho taimen) by microsatellite markers

LIU Bo1,2, KUANG You-Yi1, TONG Guang-Xiang1, YIN Jia-Sheng1,*
(1. Heilongjiang River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Harbin 150070, China
2. College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China)

Taimen (Hucho taimen) is a native fish species in China and it is in the state of endangerment. To explain clearly the genetic diversity and genetic structure, 9 wild populations of taimen were investigated using 20 microsatellite markers. The results showed that their observed heterozygosity ranged from 0.0994 to 0.8882, the expected heterozygosity varied from 0.2005 to 0.8759, and the range of PIC index was from 0.3432 to 0.5261 while population from Huma River had low genetic diversity.Fst of matching group ranged from 0.0246 to 0.2333 (P＜0.0001)andNm varied among 0.8216 to 9.9292, which indicated that the genetic differentiation was remarkable among populations.The half/full-sib family tests detected a proportion of half/full-sib family groups varying among 27.78% to 90.91%, showing a high inbred pressure and a risk of bottlenecks experienced by most groups. The AMOVA results showed that the globalFst was 0.1081; the clustering result showed that individuals from Beiji tributary of Heilongjiang River clustered as one clade, all individuals from Huma River and Wusuli River clustered as one clade and all individuals from the upper reaches of the Heilongjiang River clustered as another clade. All these results indicated that the decrease of taimen resource has affected the gene exchange among their populations. In order to achieve full protection of taimen germplasm resources, we should put an end to the destructive fishing for taimen and promotegene exchange among their populations.

Hucho taimen; Microsatellite; Genetic diversity; Genetic structure

Q959.499; Q347; Q31; Q16

A

0254-5853-(2011)06-0597-08

2011-06-17；接受日期：2011-10-17

公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201003055)；中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2008HSYZX-SJ-08)

?通訊作者(Corresponding author), E-mail: xwsc20@tom.com

10.3724/SP.J.1141.2011.06597

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