高亞萍，陳拽生，邵 嵐，李國(guó)正，杜麗榮，李榮秀*

1.河北省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究院，河北石家莊 050071；2.石家莊市婦幼保健院，河北石家莊 050081

研究發(fā)現(xiàn)男性不育癥患者精漿中超氧化物歧化酶（SOD）活性降低[1]，丙二醛（MDA）含量升高。另有研究表明，汽車(chē)司機(jī)血液中SOD活性隨著血鉛水平的上升而降低，血液中MDA含量隨著血鉛水平的上升而升高[2]，提示男性不育患者精漿中SOD和MDA含量的變化可能與鉛污染有關(guān)。但是，男性不育者精漿中SOD和MDA的變化與血清和精漿中的鉛含量的研究數(shù)據(jù)，尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。近年來(lái)，由于電子產(chǎn)業(yè)、汽車(chē)和交通業(yè)的迅猛發(fā)展，含鉛物質(zhì)對(duì)環(huán)境的污染日益加劇，男性不育患者呈逐年上升趨勢(shì)。本研究對(duì)無(wú)明顯鉛污染接觸史的男性不育患者測(cè)定血清和精漿中鉛水平、SOD活力和MDA含量，與精液常規(guī)檢驗(yàn)正常男性進(jìn)行比較，旨揭示男性不育癥患者精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的因素，為尋求更有效的診治方法提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年9月～2010年11月在河北省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究院男科門(mén)診就診的患者，檢查前6個(gè)月內(nèi)無(wú)服用對(duì)精子有影響的食物或激素類(lèi)藥物，除去精液中白細(xì)胞異常增多和輸精管梗阻者。按照世界衛(wèi)生組織（WHO）的精液分析標(biāo)準(zhǔn)，隨機(jī)選擇精子密度≥20×106/ml，A、B級(jí)精子≥50%的精液常規(guī)正常者100例為對(duì)照組，均為無(wú)明顯鉛接觸史，無(wú)生殖道疾病，無(wú)開(kāi)車(chē)史和抽煙史，前來(lái)查體欲求優(yōu)生者。精子常規(guī)檢查為少、弱、畸精子癥的不育患者95例為不育組，兩組受試對(duì)象年齡22～38歲，平均（32.0±3.6）歲。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 樣品的采集與處理

1.2.1 精液標(biāo)本的收集 受試者禁欲3～5 d，手淫法收集精液，標(biāo)本置于37℃水浴中，液化30 min后作精液分析，余下精液3000 r/min離心5 min，分離精漿，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 血樣采集 取肘內(nèi)側(cè)經(jīng)脈血，采血區(qū)皮膚依次經(jīng)過(guò)0.2%硝酸、去離子水、碘酒、酒精棉球消毒，用一次性真空管采血管取靜脈血約2 ml，室溫靜置20 min后，2000 r/min離心5 min，取血清于塑料具塞離心管中，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 方法

SOD活力采用黃嘌呤氧化酶比色法測(cè)定，MDA采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定，試劑盒均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司，按說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作。鉛含量測(cè)定采用原子吸收光譜法。采用北京偉力精子輔助分析儀進(jìn)行精液分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 10.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用 t檢驗(yàn)，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清檢測(cè)結(jié)果

不育組血清中SOD活力與對(duì)照組相比無(wú)明顯變化，MDA含量與對(duì)照組相比，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。鉛含量與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。血清中各項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)據(jù)均為正態(tài)分布，見(jiàn)表1。

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表1 兩組男性血清中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數(shù) SOD（U/mL） MDA（nmol/ml）鉛含量（nmol/ml）不育組對(duì)照組t值P值951000.483±0.0630.491±0.0971.208＞0.050.140±0.0610.107±0.01510.041＜0.0129.833±4.86120.582±2.1131.781＜0.05

2.2 精漿檢測(cè)結(jié)果

不育組精漿中SOD活力與對(duì)照組相比顯著降低，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。MDA和鉛含量與對(duì)照組相比顯著升高（P<0.01）。不育組精漿中MDA含量和對(duì)照組鉛含量數(shù)據(jù)均為正態(tài)分布，見(jiàn)表2。

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

表2 兩組男性精漿中SOD活力、MDA和鉛含量比較（）

組別 例數(shù) SOD（U/mL） MDA（nmol/ml） 鉛含量（nmol/ml）不育組對(duì)照組t值P值951000.206±0.0450.312±0.10083.845＜0.010.149±0.1190.098±0.01316.666＜0.019.413±1.7123.961±1.4939.320＜0.01

3 討論

精漿中少量的氧自由基對(duì)精子獲能和完成頂體反應(yīng)是必需的，但過(guò)多的氧自由基可使精子線粒體膜精子質(zhì)膜發(fā)生質(zhì)脂過(guò)氧化，內(nèi)膜嵴減少、ATP合成減少，從而影響精子活動(dòng)力[3]。同時(shí)，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)生的降解產(chǎn)物，如MDA等，可抑制精子線粒體功能和包括腺苷酸環(huán)化酶在內(nèi)的多種酶的活性，影響精子的運(yùn)動(dòng)功能[4]。目前認(rèn)為精漿中SOD作為體內(nèi)清除氧自由基的主要酶，是抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)對(duì)精子損害的重要保護(hù)因子[5]。

導(dǎo)致體內(nèi)自由基增多的因素主要有炎癥性疾病，空氣污染（包括煙霧、臭氧）、致癌性化學(xué)物質(zhì)、油漆、石棉、某些藥物、農(nóng)藥、射線、鉛中毒等[6]。精子細(xì)胞是人體細(xì)胞對(duì)毒性物質(zhì)最敏感的細(xì)胞，微量毒性物質(zhì)便可造成精子的損傷。

由細(xì)菌感染因素[7]以及由炎癥導(dǎo)致的抗精子抗體陽(yáng)性患者[8]SOD活性降低和MDA含量升高已經(jīng)有研究證實(shí)，因此，本研究排除了精液中白細(xì)胞增多患者。

通過(guò)檢測(cè)無(wú)明顯鉛污染接觸史的男性不育患者與對(duì)照組血清中SOD活力比較分析，男性不育癥患者血清中SOD活力無(wú)明顯變化，而鉛和MDA含量較對(duì)照組顯著升高。男性不育癥患者與對(duì)照組精漿中SOD活力，MDA和鉛含量比較分析顯示，男性不育癥患者精漿中SOD活力較對(duì)照組顯著降低，而MDA和鉛含量較對(duì)照組顯著升高（P<0.01）。血清中SOD活力變化不明顯，可能是血清中過(guò)氧化反應(yīng)較輕，消耗SOD較少的原因。MDA含量在男性不育者血清和精漿中均有極顯著性差異，這一結(jié)果提示，在測(cè)定MDA含量時(shí)可根據(jù)患者情況決定收集血清樣本或精漿樣本，以達(dá)到同樣的診斷目的。

本文結(jié)果另一發(fā)現(xiàn)是無(wú)明顯鉛污染接觸史的男性不育患者，血清和精漿中鉛和MDA含量明顯升高，并伴有精漿中SOD活力降低和MDA含量升高，表明過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)與體內(nèi)鉛含量升高有關(guān)，精液中氧自由基和MDA的增多可能是造成男性不育和精子質(zhì)量下降的重要原因。這種結(jié)果會(huì)對(duì)精子的活力有較顯著的影響[9]。它不但影響精子的功能，而且還可以影響精子的生成和精子的形態(tài)[10]。表明男性不育的主要因素是受到了環(huán)境中鉛的污染，因?yàn)殂U的用途廣泛，涉及到人們的衣食住行，鉛可污染空氣和土壤，通過(guò)呼吸道、消化道和皮膚黏膜進(jìn)入人體，并且不易排出體外，可在體內(nèi)儲(chǔ)存幾十年，對(duì)人體造成潛在的危害，精細(xì)胞較人體其他細(xì)胞對(duì)于毒性物質(zhì)的損害敏感，容易受到傷害，這種傷害應(yīng)引起人們的高度重視，它可造成男性不育，還可影響到下一代人的身體健康。

綜上所述，血清和精漿中鉛含量的升高，可能是導(dǎo)致精漿中SOD活性降低，MDA含量升高的主要因素，為男性不育患者提供排鉛和抗氧化診治方案提供了可靠依據(jù)。

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