譚愛(ài)華 劉發(fā)志 李方橋

（湖北三峽職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖北宜昌443000）

紫陀螺菌（Gomphus purpuraceus）是夏秋季生長(zhǎng)在闊葉混交林地的一種外生菌根菌，屬于擔(dān)子菌亞門(mén)（Basidiomycotina）、非褶菌目（Aphyllophorales）、陀螺菌科（Gomphaceae）、陀螺菌屬（Gomphus）[1]。1999年7 月，筆者首次在三峽地區(qū)西陵峽河谷區(qū)發(fā)現(xiàn)紫陀螺菌[2]，并對(duì)其營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了分析，認(rèn)為紫陀螺菌鮮菇肉質(zhì)脆嫩，味道鮮美，營(yíng)養(yǎng)豐富，干制后香味獨(dú)特，且易保鮮，易貯運(yùn)，是一種極具開(kāi)發(fā)潛力的珍稀食用菌[2]。為了有效地開(kāi)發(fā)利用紫陀螺菌，筆者在對(duì)紫陀螺菌生態(tài)[3］、菌種分離研究[4-5]的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了大量的培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)[6]。現(xiàn)將紫陀螺菌在8種供試平板培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)特性及培養(yǎng)基初步篩選結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 供試菌種

紫陀螺菌菌種為筆者從采自三峽地區(qū)西陵峽河谷區(qū)針闊葉林地的新鮮子實(shí)體分離得到。

1.2 供試培養(yǎng)基

1.2.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基

配方①：去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀 3 g，硫酸鎂 1.5 g，瓊脂 20 g，加純凈水1 000 mL，pH5.5 左右。此配方由前期試驗(yàn)篩選所得。

配方②：豆粕9 g，麩皮6 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀1 g，硫酸鎂0.5 g，蛋白胨3 g，瓊脂20 g，加純凈水1 000 mL，pH5.5 左右。此配方也由前期試驗(yàn)篩選所得。

配方③（即CYM 培養(yǎng)基）：葡萄糖20 g，硫酸鎂0.5 g，磷酸氫二鉀1 g，磷酸二氫鉀0.46 g，蛋白胨2 g，酵母浸膏2 g，瓊脂18 g，加蒸餾水1 000 mL，pH 5.5左右。此配方為種用培養(yǎng)基。

1.2.2 供試培養(yǎng)基配方

配方1：配方①+醫(yī)用復(fù)合VB0.025 g；配方2：配方①+蛋白胨2 g；配方3：配方①+醫(yī)用復(fù)合VB 0.025 g+蛋白胨2 g；配方4：配方①+酵母粉2 g；配方5：配方①+分析純VB10.025 g；配方6：配方①+纖維素酶0.02 g+木質(zhì)素酶0.02 g；配方7：配方②+分析純VB11 g；配方8：配方②+分析純VB11 g+纖維素酶0.02 g+木質(zhì)素酶0.02 g。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 平板培養(yǎng)基的制作

將配制好的各種供試培養(yǎng)基分別裝入9 cm 培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿裝18 mL。每一種培養(yǎng)基作為一種處理，每一處理重復(fù)5 次。待培養(yǎng)基凝固后用報(bào)紙包扎好水平放入高壓蒸汽滅菌鍋中，121 ℃滅菌30 min，冷卻后備用。

1.3.2 接種與培養(yǎng)

將供試的紫陀螺菌菌種接種于CYM 平板培養(yǎng)基[6]中培養(yǎng)50 d 后，用已滅菌的直徑為4 mm 的金屬打孔器沿菌落邊緣依次打孔取菌種，用接種針挑起菌種塊分別接種于各供試平板培養(yǎng)基表面中央，培養(yǎng)皿邊緣用封口膜封好后，置于23 ℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)避光培養(yǎng)。

1.3.3 菌絲體生長(zhǎng)速度的測(cè)定與分析

將坐標(biāo)紙裁成窄條，貼于培養(yǎng)皿底部，劃定測(cè)定起點(diǎn)，分別在接種后第10天、第20天、第30天、第40 天劃測(cè)定終點(diǎn)，測(cè)量起止點(diǎn)間菌絲體長(zhǎng)度，計(jì)算每一處理5 次重復(fù)的平均值，并進(jìn)行差異顯著性分析，觀察記錄各培養(yǎng)基中紫陀螺菌菌絲體的生長(zhǎng)狀態(tài)。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試培養(yǎng)基上紫陀螺菌菌絲的生長(zhǎng)速度

試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 紫陀螺菌菌絲在供試培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)速度

由表1 可見(jiàn)，紫陀螺菌菌絲在8 種供試培養(yǎng)基中培養(yǎng)40 d 的平均生長(zhǎng)速度順序?yàn)榕浞?＞配方4＞配方8＞配方3＞配方7＞配方5＞配方6＞配方1。差異顯著性分析結(jié)果表明，配方2 培養(yǎng)基與配方1、配方6 培養(yǎng)基的菌絲平均生長(zhǎng)速度有顯著差異，而配方4、配方3、配方8、配方7、配方5、配方6、配方1 之間的菌絲平均生長(zhǎng)速度均無(wú)顯著差異。

2.2 不同培養(yǎng)時(shí)段紫陀螺菌菌絲的生長(zhǎng)速度

試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 紫陀螺菌菌絲在不同培養(yǎng)時(shí)段的生長(zhǎng)速度

由表2 可知，紫陀螺菌菌絲在8 種供試培養(yǎng)基中均呈現(xiàn)出相同的生長(zhǎng)規(guī)律。即接種后1～10 d 內(nèi)長(zhǎng)速（平均，下同）較慢，11～30 d 長(zhǎng)速較快，其間21～30 d 長(zhǎng)速最快，30 d 以后長(zhǎng)速變慢。差異顯著性分析結(jié)果表明，紫陀螺菌菌絲在接種后1～10 d 與31～40 d 的生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異，在接種后11～20 d 與21～30 d 的生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異，但接種后11～20 d與 21～30 d 的生長(zhǎng)速度與接種后 1～10 d 與 31～40 d的生長(zhǎng)速度有顯著差異。

2.3 供試培養(yǎng)基上紫陀螺菌菌絲的長(zhǎng)勢(shì)

試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 供試培養(yǎng)基上紫陀螺菌菌絲的長(zhǎng)勢(shì)

由表3 可見(jiàn)，紫陀螺菌在配方7、8 培養(yǎng)基上菌落圓正、有放射狀溝紋，菌絲潔白、致密、生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)。而在配方1～6 培養(yǎng)基上菌落放射狀溝紋或有或無(wú)，菌絲顏色、密度及生長(zhǎng)勢(shì)均不及上述兩種培養(yǎng)基，其中，在添加酵母粉的配方4 培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)勢(shì)最弱。

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，在8 種供試培養(yǎng)基上紫陀螺菌的菌絲生長(zhǎng)速度均明顯高于之前筆者的試驗(yàn)結(jié)果，配方2 效果尤其明顯[6]?；A(chǔ)培養(yǎng)基添加醫(yī)用復(fù)合VB、分析純VB1、纖維素酶和木質(zhì)素酶對(duì)紫陀螺菌菌絲生長(zhǎng)無(wú)明顯促進(jìn)作用。而添加2 g 蛋白胨的配方2培養(yǎng)基和添加2 g酵母粉的配方4培養(yǎng)基菌絲長(zhǎng)速較快，且二者之間無(wú)顯著差異，但配方2培養(yǎng)基上菌絲長(zhǎng)勢(shì)明顯強(qiáng)于配方4培養(yǎng)基。在供試培養(yǎng)基上的紫陀螺菌菌落形態(tài)、菌絲生長(zhǎng)速度及生長(zhǎng)勢(shì)有差異，但生長(zhǎng)規(guī)律基本相同。紫陀螺菌菌種在接種后11～30 d轉(zhuǎn)接為宜。

綜合紫陀螺菌菌絲生長(zhǎng)速度及生長(zhǎng)勢(shì)，8 種供試培養(yǎng)基中最佳培養(yǎng)基為配方2 培養(yǎng)基（去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，蛋白胨 2 g，瓊脂 20 g，加純凈水 1 000 mL，pH 5.5左右）。

今后可進(jìn)一步探索紫陀螺菌的營(yíng)養(yǎng)機(jī)制，在配方2培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)一步試驗(yàn)篩選和優(yōu)化培養(yǎng)基配方，同時(shí)探索紫陀螺菌的培養(yǎng)條件及菌種生產(chǎn)工藝，為優(yōu)質(zhì)珍稀紫陀螺菌的開(kāi)發(fā)利用奠定良好的基礎(chǔ)。