高文霞，雷新響，于 明，葉曉霞，張安將

(1．溫州大學(xué)化學(xué)與材料工程學(xué)院，浙江溫州 325035；2．溫州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，浙江溫州 325035；3．中國(guó)科學(xué)院寧波材料技術(shù)與工程研究所，浙江寧波 315201)

甌柑化學(xué)成分研究

高文霞1，雷新響1，于 明1，葉曉霞2，張安將3,?

(1．溫州大學(xué)化學(xué)與材料工程學(xué)院，浙江溫州 325035；2．溫州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，浙江溫州 325035；3．中國(guó)科學(xué)院寧波材料技術(shù)與工程研究所，浙江寧波 315201)

利用溶劑提取法和柱層析分離法，從甌柑籽中分離得檸檬苦素（C26H30O8），從甌柑果肉中分離得β-谷甾醇（C29H50O）．通過(guò)波譜分析（1H-NMR、13C-NMR、DEPT-NMR和2D-NMR）鑒定上述化合物結(jié)構(gòu)．這兩種化合物均為首次從甌柑中分離得到．

甌柑；檸檬苦素；β-谷甾醇

甌柑（Citrus suavissima Hort. ex Tanaka）是蕓香科柑橘屬植物的一種栽培變種，是浙江溫州的特色水果．甌柑在溫州已有上千年的栽培歷史，由于其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，維生素含量豐富，并具有祛熱生津、化痰止咳、清涼解毒等特殊的醫(yī)藥效能[1]，因此深受人們喜愛(ài)．食甌柑，對(duì)治療咳嗽、麻疹、高熱等均有很好的效果，在溫州民間素有“端午甌柑似羚羊”之說(shuō)．

本文對(duì)甌柑中有效成分進(jìn)行研究，對(duì)甌柑果籽、果肉的提取物進(jìn)行分離，得到兩種化合物，通過(guò)波譜鑒定，它們分別為檸檬苦素（C26H30O8）和β-谷甾醇（C29H50O），這兩種化合物均為首次從甌柑中獲得．

1 儀器與材料

AGILENT 6890N GC-5973N MS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；AVANCE-300型核磁共振儀（Switzerland Bruker）；EQUINOX 55型傅立葉變換紅外光譜儀（Bruker）；BUCHI R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士）；KQ3200E超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）．

甌柑采自溫州甌海茶山．

2 提取與分離

2.1 甌柑籽中化學(xué)成分提取

將250 g干燥甌柑籽碾碎，于索氏提取器中，用1 500 mL石油醚徹底脫脂24 h．將脫脂的甌柑籽用1 000 mL丙酮于索氏提取器中在（60 – 90）℃下提取8 h，濃縮提取液，進(jìn)行柱層析分離．以PE-EtoAc（VPE∶VEtoAc= 3∶7）為展開劑，以Ehrlich試劑為顯色劑，分離得到化合物I，再進(jìn)行1H-NMR、13C-NMR、DEPT、2D-NMR（COSY、HSQC、HMBC）測(cè)試．

2.2 甌柑果肉中化學(xué)成分提取

將25 kg甌柑果肉打碎成勻漿，先用乙醇萃取，再用等量石油醚提?。^(guò)濾提取液，在濾液中加等量飽和食鹽水，再用石油醚萃取，分離有機(jī)層并濃縮．柱層析分離得到化合物II，再進(jìn)行1H-NMR、13C-NMR、DEPT、2D-NMR（COSY、HSQC、HMBC）測(cè)試．

3 結(jié)構(gòu)鑒定

3.1 化合物I結(jié)構(gòu)分析

該化合物為無(wú)色結(jié)晶，分子式：C26H30O8．IR光譜表明有C=O（1 755 cm-1，1 709cm-1）和C-O-C（1 286 cm-1，1 165 cm-1）存在．13C-NMR譜給出了26個(gè)碳信號(hào)（具體NMR數(shù)據(jù)見表1），DEPT譜顯示有4個(gè)甲基，5個(gè)亞甲基，7個(gè)次甲基和10個(gè)季碳．1H-NMR譜中比較有特點(diǎn)的幾個(gè)峰為：δ7.41（1H，s）、δ7.40（1H，t）和δ6.34（1H，d），為呋喃中質(zhì)子信號(hào)；另外還可看出有四個(gè)甲基峰，分別為 δ1.58（s）、δ1.18（s，Me×2）和δ1.07（s）．由以上數(shù)據(jù)可判斷該化合物是具有呋喃環(huán)的一類三萜類化合物，其在1H-NMR譜中的重要特征是在高場(chǎng)區(qū)有多個(gè)甲基單峰，在13C-NMR中化學(xué)位移：CH3、CH2為20 – 45 ppm，季碳為30 – 55 ppm，與氧連接的碳為50 – 100 ppm，而羰基為180 – 220 ppm．

表1 化合物I的核磁共振譜(NMR)數(shù)據(jù)(CDCl3, 300 MHz)Table 1 Data of1H-NMR,13C-NMR and 2D-NMR for Compound I (CDCl3, 300 MHz)

結(jié)合文獻(xiàn)[2-3]以及檸檬苦素的NMR特征，對(duì)13C-NMR譜中的26個(gè)碳進(jìn)行歸屬，然后結(jié)合HMBC、COSY對(duì)1H-NMR譜中質(zhì)子信號(hào)進(jìn)行歸屬，確定化合物I為檸檬苦素，該化合物是首次從甌柑中提取的檸檬苦素類物質(zhì)．其結(jié)構(gòu)式見圖1．

3.2 化合物II結(jié)構(gòu)分析

該化合物為白色針狀結(jié)晶，分子式：C29H50O．13C-NMR譜給出29個(gè)碳信號(hào)，DEPT譜圖顯示有11個(gè)亞甲基和3個(gè)季碳．1H-NMR譜圖中δ5.37（1H，dd）、3.55(1H，td)、1.01(3H，s)、0.98（3H，d）、0.87（3H，t）、0.82（3H，d）、0.80（3H，d）、0.68（3H，s）為甾醇的重要特征峰．其具體NMR數(shù)據(jù)見表2．

結(jié)合文獻(xiàn)[4-5]，分析以上數(shù)據(jù)并結(jié)合HMBC和DEPT圖對(duì)這些碳原子和氫質(zhì)子進(jìn)行歸屬，確定化合物II為β-谷甾醇，結(jié)構(gòu)式見圖2．

圖1 化合物I (檸檬苦素)的結(jié)構(gòu)式Fig 1 Structure Formula of Compound I (Limonin)

圖2 化合物II (β-谷甾醇)的結(jié)構(gòu)式Fig 2 Structure Formula of Compound II (β-sitosterol)

表2 化合物II的核磁共振譜(NMR)數(shù)據(jù)(CDCl3, 300 MHz)Table 2 Data of1H-NMR,13C-NMR and 2D-NMR for Compound II (CDCl3, 300 MHz)

4 結(jié) 語(yǔ)

本文選用丙酮、乙醇和石油醚等有機(jī)溶劑，從甌柑籽中提取并分離得到化合物檸檬苦素（C26H30O8），從甌柑果肉中分離得到β-谷甾醇（C29H50O）．結(jié)合波譜分析（1H-NMR、13C-NMR、DEPT-NMR和2D-NMR）鑒定了上述化合物結(jié)構(gòu)，這兩種化合物均為首次從甌柑中分離得到．

[1] 徐象華, 顏?；? 葉榮華, 等. 甌柑研究進(jìn)展[J]. 浙江林業(yè)科技, 2008, 28(3): 75-77.

[2] 楊秀偉, 張虎, 胡俊. 蔬毛吳茱萸果實(shí)中新化合物吳茱萸塔寧的分離及結(jié)構(gòu)表征[J]. 分析化學(xué), 2008, 36(2):219-222.

[3] 張起輝, 高慧媛, 周蓮娣, 等. 吳茱萸內(nèi)酯的NMR研究[J]. 波譜學(xué)雜志, 2005, 22(1): 1-5.

[4] 張正付, 邊寶林. 榮莉根化學(xué)成分的研究: II [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2007, 19: 237-240.

[5] 李翔, 湯華釗, 茍小軍, 等. 白鮮皮的化學(xué)成分研究[J]. 中藥材, 2008, 31(12): 1816-1819.

Study on Chemical Constituents of Citrus suavissima Hort. ex Tanaka

GAO Wenxia1, LEI Xinxiang1, YU Ming1, YE Xiaoxia2, ZHANG Anjiang3

(1. College of Chemistry and Materials Engineering, Wenzhou University, Wenzhou, China 325035; 2. Pharmacy School, Wenzhou Medical College, Wenzhou, China 325035; 3. Ningbo Institute of Material Technology and Engineering, Chinese Academy of Sciences, Ningbo, China 315201)

Through solvent extraction and column chromatography separation, limonin (C26H30O8) and βsitosterol (C29H50O) were extracted from the seeds and pulp of Citrus suavissima Hort. ex Tanaka, respectively. Their structures were identified by spectral analysis (1H-NMR,13C-NMR, DEPT-NMR and 2D- NMR). It is the first time for these two compounds to be extracted from Citrus suavissima hort. ex tanaka.

Citrus suavissima Hort. ex Tanaka; Limonin; β-sitosterol

R248.1

：A

：1674-3563(2010)04-0011-05

10.3875/j.issn.1674-3563.2010.04.003 本文的PDF文件可以從xuebao.wzu.edu.cn獲得

(編輯：王一芳)

2010-01-10

溫州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(S2006A009)

高文霞(1979- )，女，浙江溫州人，講師，碩士，研究方向：天然產(chǎn)物分離．? 通訊作者，anjiang zhang@gmail.com