楊艷 張婉婷

替硝唑(tinidazole)屬于硝基咪唑類衍生物，具有廣譜抗厭氧菌作用，是繼甲硝唑之后的一種療效更高、體內(nèi)分布更廣、耐藥性低的藥物[1]。除用于抗滴蟲和抗阿米巴原蟲外，近年來，廣泛地用于抗厭氧菌的系統(tǒng)與局部感染：如腹腔、婦科、手術(shù)創(chuàng)口以及腸道和肝阿米巴病等。頭孢替安(cefotiam，CEF)系第二代頭孢菌素類抗生素，抗酶性能強(qiáng)，對第一代頭孢菌素耐藥的革蘭陰性菌菌株也有效；抗菌譜廣，比第一代頭孢菌素抗菌譜有所擴(kuò)大，主要敏感菌有葡萄球菌屬、鏈球菌屬、肺炎球菌等，對奈瑟菌、部分腸桿菌屬等亦均有抗菌作用,有時臨床病例有厭氧菌與需氧菌引起的混合感染，臨床工作者將二者結(jié)合起來用。但目前未見有二者配伍穩(wěn)定性的報道。本文模擬臨床用藥濃度對替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的配伍穩(wěn)定性進(jìn)行考察，為臨床用藥安全提供參考依據(jù)。

1 材料

1.1 試劑和藥品

替硝唑葡萄糖注射液(四川科倫有限公司，規(guī)格100ml：葡萄糖5g，替硝唑0.4g，批號：E090520)，注射用鹽酸頭孢替安(商品名：佩羅欣， 哈爾濱制藥總廠，規(guī)格1g，批號B200907305)，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(中國醫(yī)藥上海化學(xué)儀器公司，批號：F990524；)，蒸餾水(實(shí)驗(yàn)室自制)。

1.2 儀器

TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；Sartorius BT125D電子分析天平(塞多利斯科學(xué)儀器有限公司)；SG5200HPT超聲波清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司)；SartoriusPH計(塞多利斯科學(xué)儀器有限公司)；GWF微粒分析儀(天河醫(yī)療儀器有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 貯備液的配制

取佩羅欣一支(以頭孢替安計)，取蒸餾水將藥物粉末溶解并轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，蒸餾水定容即得濃度為20mg/ml的貯備液A；0.4%替硝唑葡萄糖注射液為貯備液B。

2.2 測定波長的選擇

從上述配制的貯備液A中精密量取0.1ml于100ml容量瓶中，用蒸餾水定容至100ml得濃度為20μg/ml供試液A。精密量取0.5ml貯備液B于100mL容量瓶中，用蒸餾水定容即得濃度為20μg/ml供試液B。取供試液A、B以蒸餾水為空白在200～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果替硝唑在317nm波長處有一穩(wěn)定的最大吸收峰，與文獻(xiàn)一致[2]。頭孢替安在258nm波長處有一穩(wěn)定的最大吸收峰，掃描紫外光譜圖見圖1。從圖譜上可見，替硝唑在頭孢替安的最大吸收峰處有吸收，對頭孢替安的測定有影響，故采用紫外雙波長等吸收消去法測定頭孢替安的含量。根據(jù)紫外雙波長等吸收消去法等吸收原則選擇258nm為測定波長，參比波長為356.63nm。在替硝唑的最大吸收波長317nm處，頭孢替安在此無吸收，對替硝唑的含量測定無影響，故選擇317nm為替硝唑的測定波長。

圖1 替硝唑和頭孢替安紫外掃描光譜圖

2.3 驗(yàn)證葡萄糖無干擾實(shí)驗(yàn)

精密稱取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖0.0718g，置于小燒杯中，加適量純化水溶解并定容至250ml容量瓶中，搖勻即得無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0ml置于25ml容量瓶中，蒸餾水稀釋至刻度，搖勻即得濃度為22.976μg/ml的葡萄糖溶液。取此溶液于200～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行波長掃描，在此范圍內(nèi)無吸收。

2.4 頭孢替安標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取佩羅欣一支(以頭孢替安計),取蒸餾水將安瓿中的藥物粉末溶解并轉(zhuǎn)移于1000ml容量瓶中，蒸餾水并定容至刻度。再分別精密量取此溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml置100mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋并定容，搖勻即得頭孢替安系列溶液，以258nm為測定波長，356.63nm為參比波長，蒸餾水為空白，測定吸收度。以吸收度差△A對濃度C回歸，得回歸方程為C=38.19657△A-0.79735(r=0.9999)。結(jié)果表明，在5～25μg/ml范圍內(nèi)，吸收度差△A與濃度C呈良好的線性關(guān)系。

2.5 替硝唑葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

表1 替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(n=6)

精密量取0.4%的替硝唑葡萄糖注射液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml置100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋并定容，搖勻即得替硝唑葡萄糖系列溶液，以317nm為測定波長，蒸餾水為空白，測定吸收度。以吸收度A對濃度C回歸，得回歸方程為C=26.25457A-0.0523(r=0.9996，n=5)。從回歸方程結(jié)果可知，替硝唑葡萄糖在4～20μg/ml范圍內(nèi)，吸收度A與濃度C呈良好的線性關(guān)系。

表2 配伍液外觀及PH值(n=3)

表3 8h內(nèi)替硝唑葡萄糖注射液和頭孢替安配伍后的微粒變化(n=3)

2.6 回收率實(shí)驗(yàn)

精密量取替0.4%硝唑葡萄糖貯備液B和頭孢替安貯備液A，用蒸餾水配制成含替硝唑8、12、16μg/ml和頭孢替安10、15、20μg/ml的混合溶液，照標(biāo)準(zhǔn)曲線下的方法分別測定吸收度A，所得數(shù)據(jù)代入回歸方程，計算回收率。結(jié)果見表1。

2.7 配伍實(shí)驗(yàn)

模擬臨床用藥濃度，取佩羅欣(以頭孢替安計)，加入0.4%替硝唑葡萄糖注射液定容至刻度，搖勻即得配伍溶液。室溫下0，1，2，4，6，8h時間點(diǎn)觀察配伍溶液的外觀變化、測定PH值、微粒粒徑、替硝唑與頭孢替安各自的含量。

配伍溶液在室溫下0～8h內(nèi)，無沉淀及汽泡產(chǎn)生，均為淡黃色澄明液體。配伍液的PH值無明顯改變。詳見表2

2.8 不溶性微粒測定

室溫下，于各時間點(diǎn)取配伍液對其微粒(≥10um，≥25um)進(jìn)行測定。結(jié)果顯示不溶性微粒無明顯變化且符合2005版《中國藥典》[3]規(guī)定，詳見表3。

2.9 觀察吸收曲線形狀變化及測定含量室溫下，各時間點(diǎn)取配伍溶液稀釋至一定濃度，在選定的測定波長處測定替硝唑和頭孢替安的吸收度，代入回歸方程，以0h的含量為100%，計算出各自的百分含量。結(jié)果，配伍后替硝唑和頭孢替安各自含量無明顯變化，詳見表4。在測定吸收度的同時在200～400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果溶液的吸收曲線形狀未改變，亦未發(fā)現(xiàn)新的吸收曲線，最大吸收峰也未發(fā)生移動。

3 討論

在200～400nm波長范圍內(nèi)對頭孢替安和替硝唑葡萄糖注射液進(jìn)行掃描，頭孢替安的最大吸收波長在258nm處，替硝唑葡萄糖注射液的最大吸收波長在317nm處，但替硝唑在頭孢替安的最大吸收波長258nm處有吸收對頭孢替安的含量測定有影響，為了消除此影響本實(shí)驗(yàn)采用了紫外雙波長分光光度法測定頭孢替安的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明紫外雙波長分光光度法操作簡單、方便，可用于對頭孢替安的含量測定。但在選擇測定波長時，根據(jù)紫外雙波長分光光度法等吸收原則，盡可能使共有組分的△A趨于零[4]，否則會影響測定結(jié)果。

表4 配伍液8h內(nèi)的含量變化(%，n=3)

替硝唑葡萄糖注射液的溶媒是葡萄糖，為了考證葡萄糖對配伍液的含量測定有無影響，需用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液在200～400nm范圍內(nèi)掃描，掃描結(jié)果表明葡萄糖在此波長范圍內(nèi)根本無吸收，對配伍液的含量測定無影響。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在0～8h內(nèi)替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安配伍后溶液外觀均為淡黃色澄明，無沉淀及汽泡產(chǎn)生，替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安的含量基本無變化。紫外圖譜發(fā)現(xiàn)吸收曲線形狀未改變，最大吸收峰無位置改變，亦無新的吸收峰出現(xiàn)，說明替硝唑葡萄糖注射液與頭孢替安配伍化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，未有新的物質(zhì)出現(xiàn)；配伍液的PH值無明顯變化，且符合注射液的pH要求(4～9)[5]；不溶性微粒檢查亦符合2005版《中國藥典》規(guī)定。故認(rèn)為臨床上二者配伍后在8h內(nèi)可以使用。

[1]陳新謙,金有豫,湯光.新編藥物學(xué)[M].16版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:69-77.

[2]劉偉,張曉梅,王曉霞.替硝唑葡萄糖注射液中配伍止血芳酸的穩(wěn)定性[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2002,22(3):187-188.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:附錄ⅨC.

[4]孫毓慶.分析化學(xué)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:32-46.

[5]崔福德.藥劑學(xué)[M].6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:67-75.