程立華 張衛(wèi)東

（新疆克拉瑪依市中心醫(yī)院藥劑科 新疆 克拉瑪依市 834000）

刺山柑的提取工藝考察

程立華 張衛(wèi)東

（新疆克拉瑪依市中心醫(yī)院藥劑科 新疆 克拉瑪依市 834000）

目的 考察刺山柑乳膏中刺山柑的最佳提取工藝。方法 采用單因素實(shí)驗(yàn)，以鹽酸水蘇堿含量和醇浸出物得率為指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)，對(duì)影響提取效率的主要因素-乙醇濃度、提取溫度、加醇量、提取時(shí)間、提取次數(shù)進(jìn)行考察。在單因素的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選出最佳提取工藝。結(jié)果 刺山柑提取工藝條件在80℃水浴中，加10倍量95%乙醇提取2次，每次0.5h為最佳組合條件。結(jié)論 此方法提取刺山柑簡(jiǎn)單易行，產(chǎn)率較好，符合生產(chǎn)要求。

刺山柑 鹽酸水蘇堿含量 醇浸出物得率 提取工藝

本試驗(yàn)采用單因素實(shí)驗(yàn)[3]，以鹽酸水蘇堿含量和醇浸出物得率為指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)，對(duì)影響提取效率的主要因素-乙醇濃度、提取溫度、加醇量、提取時(shí)間、提取次數(shù)進(jìn)行考察。在單因素的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選出最佳提取工藝。

1 儀器、設(shè)備與材料

UV-2501PC型紫外分光光度計(jì)（日本島津制造所）；Sartorius電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；SZ-93自動(dòng)雙重純水蒸餾器（鞏義市英峪予華儀器廠）；KQ-100DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；101A-2型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海錦屏儀器儀表有限公司通州分公司）；DZKW-S-6電熱恒溫水浴鍋（北京永光明醫(yī)療儀器廠）；KDM型調(diào)溫電熱套（山東省鄄城永興儀器廠）。鹽酸水蘇堿對(duì)照品由中國藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)分別為712-200105、110712-200508；硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、白凡士林、甘油、十二烷基硫酸鈉、月桂氮卓酮、對(duì)羥基苯甲酸乙酯均為藥用規(guī)格。水為超純水，乙醇為藥用級(jí)；其余試劑均為國產(chǎn)試劑AR級(jí)。

表1 因素水平表

表2 L9(34)正交試驗(yàn)表

表3 方差分析表

2 方法

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取干燥至恒重的鹽酸水蘇堿對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含220μg的溶液，即得。

2.2 供試品溶液的制備

取醇/水提取液，濾紙過濾，精密量取續(xù)濾液25mL，置蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，精密加入0.1mol/L鹽酸10mL使溶解，加活性碳0.5g，置水浴中加熱半分鐘，攪拌濾過，濾液置25mL量瓶中，用0.1mol/L鹽酸溶液分次洗滌，備用。

2.3 測(cè)定法

精密量取對(duì)照品及供試品各10mL，置25mL容量瓶中，另取0.1mol/L鹽酸溶液20mL，置25mL容量瓶中，在對(duì)照品溶液、供試品溶液及0.1mol/L鹽酸溶液中，各精密加入新制的2%雷氏鹽溶液3mL，搖勻，加0.1mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，置冰浴中放置1h，用干燥濾紙濾過，取續(xù)濾液，以0.1mol/L鹽酸溶液為空白，照分光光度法，在520nm波長(zhǎng)處分別測(cè)吸收度，用空白試劑的吸收度分別減去對(duì)照品與供試品的吸收度，計(jì)算，即得。

2.4 單因素試驗(yàn)

(1)乙醇濃度：稱取刺山柑30g5份，分別加10倍量95%乙醇、75%乙醇、55%乙醇、35%乙醇、水提取3次，每次1h，濾液合并，定容至1000mL，考察總生物堿含量和浸出物得率，得出：乙醇濃度為95%時(shí)提取刺山柑達(dá)到最高。（2）加醇量考察：稱取刺山柑30g5份，分別加6倍、8倍、10倍、12倍、14倍量95%乙醇提取3次，每次1小時(shí)，濾液合并，定容至1000mL，考察總生物堿含量和醇浸出物得率，得出：加14倍量95%乙醇時(shí)提取的刺山柑量達(dá)到最大。（3）提取時(shí)間考察：稱取刺山柑30g5份，加10倍量95%乙醇提取3次，每次提取不同的時(shí)間(15min、30min、45min、60min、90min），濾液合并，定容至1000mL，考察總生物堿含量和醇浸出物得率，得出：60min為提取刺山柑的最佳時(shí)間。（4）提取溫度考察：稱取刺山柑30g5份，分別加10倍量95%乙醇提取3次，每次30min，用不同的溫度提取(50℃、60℃、70℃、80℃、90℃)，濾液合并,定容至1000mL，考察總生物堿含量和醇浸出物得率，得出：刺山柑提取溫度選擇為80℃。(5）提取次數(shù)考察：稱取刺山柑30g4份，分別加10倍量95%乙醇提取不同的次數(shù)(1、2、3、4次），每次30min，用80℃提取，濾液合并，定容至1000mL，考察總生物堿含量和醇浸出物得率，得出：提取次數(shù)為2次最合適。

由以上結(jié)果可見，刺山柑醇濃度，提取時(shí)間，加醇量對(duì)綜合指標(biāo)影響較大，故固定提取溫度為80℃，提取次數(shù)為2次，對(duì)醇濃度，提取時(shí)間，加醇量3個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，綜合考察各因素對(duì)綜合指標(biāo)的影響。

2.5 正交試驗(yàn)

通過單因素試驗(yàn)結(jié)果，初步確定了各因素各水平的大致用量范圍，在此基礎(chǔ)上，固定生藥粒度為飲片，采用L9（34）正交實(shí)驗(yàn)考察溶劑量、提取時(shí)間、提取次數(shù)三個(gè)因素對(duì)鹽酸水蘇堿含量和醇浸出物得率的影響，試驗(yàn)安排見表1，結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

由表1可知，各因素對(duì)綜合評(píng)分的影響大小順序?yàn)椋篈（醇濃度）>C（加醇量）>B（提取時(shí)間）；每個(gè)因素3個(gè)水平之間的趨勢(shì)為A3>A2>A1，B1>B3>B2，C3>C1>C2，直觀分析得提取工藝為A3B1C3，即加14倍量95%乙醇提取2次，每次0.5h。根據(jù)表7方差分析結(jié)果表明：A因素的影響有顯著性（P<0.05），B和C因素的影響均無顯著性（P>0.05），從大工業(yè)生產(chǎn)和節(jié)能降耗等全面綜合考察，以A3B1C1組合為佳。

2.6 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

對(duì)其進(jìn)行了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，確定刺山柑提工藝條件A3B1C1為最佳組合條件，即80℃水浴中，加10倍量95%乙醇提取2次，每次0.5h。

[1]黃丕振,陳洪軒.新疆生物[J],1979,1:95～101.

[2]中國科學(xué)院新疆生物土壤沙漠研究所編.新疆藥用植物志[M].新疆人民出版社,1977:74.

[3]謝秀瓊.中藥新制劑開發(fā)與應(yīng)用[M].第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000.

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1674-0742(2010)09(a)-0121-02

2010-06-24