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(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院,吉林 長(zhǎng)春 130117)
人參果為五加科植物人參(PanaxgisengC.A.Meyer)的成熟果實(shí)。近年來(lái),隨著人們對(duì)人參地上部分利用的研究進(jìn)展,人參果具有高含量的人參皂苷和顯著的生理活性,已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視和研究。目前對(duì)人參果的化學(xué)成分研究報(bào)道較少[1-2],吉林省為人參主產(chǎn)地,每年產(chǎn)參果幾百噸,由于搓破取籽,種子用于繁殖,大部分果肉都作為廢物被扔掉。而按干品計(jì)算其中所含人參皂苷含量是人參根的3~4倍,極有開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。因此,為了給系統(tǒng)研究人參增添新的內(nèi)容,擴(kuò)大人參的藥用范圍,給正確評(píng)價(jià)人參果的質(zhì)量提供理論依據(jù),我們對(duì)人參果的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究[3-6],本文應(yīng)用日立-835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)人參果肉中氨基酸種類及其含量進(jìn)行了測(cè)定分析研究。為人參果的研究及綜合利用提供了初步的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
1.1 儀器 日本日立公司835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀。離子交換樹脂層析柱(2.6 mm×150 mm)填料為2619型磺酸型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂(日立株式會(huì)社)。
1.2 實(shí)驗(yàn)材料 人參果肉多采于長(zhǎng)白縣人參(PanaxginsengC.A.Meyer)新鮮成熟果實(shí),去籽得果肉,經(jīng)凍干,粉碎(60目)所得。
1.3 試劑 標(biāo)準(zhǔn)品溶液:17種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液;6 mol/L鹽酸:取優(yōu)級(jí)純鹽酸用去離子水稀釋定容制成。1%巰基乙醇:取巰基乙醇用去離子水稀釋定容制成。高純氮?dú)猓汉?9.99%。其它試劑均為分析純。
2.1 樣品液的制備 精密稱取人參果肉干燥粉末15.0 mg,置于水解管底部,用注射器注入6 mol/L鹽酸15 mL和1%的巰基乙醇1 mL,然后將水解管接通真空泵,抽至真空,迅速在噴燈上封口,置干燥箱內(nèi)于110℃±1℃水解24 h,取出放冷至室溫,打開(kāi)瓶口,將水解液過(guò)濾至50 mL容量瓶中,用去離子水沖洗水解安瓶及濾紙,繼而用去離子水定容至刻度,取此稀釋的水解液1 mL置小燒杯中,在水浴上蒸干,殘?jiān)萌ルx子水約1 mL溶解并蒸干,如此反復(fù)操作2~3次,揮盡氯化氫氣體,然后準(zhǔn)確加入0.02 mol/L鹽酸1 mL溶解殘?jiān)?,備用?/p>
2.2 氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)試條件 層析柱:2.6mm×150 mm (內(nèi)徑×柱高);柱填料:2619型磺酸型的強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹脂(日立株式會(huì)社);緩沖液流速:0.225 mL/min;茚三酮流速:0.30 mL/min;柱壓:80~130 kg/cm2;茚三酮泵壓:15~35 kg/cm2;緩沖液改變次數(shù):5;柱溫:53℃;氮?dú)鈮毫Γ?.28 kg/cm2;分析時(shí)間:50 min。
2.3 測(cè)定分析 取樣品液50 μL,按上述測(cè)試條件上機(jī)測(cè)定。人參果肉中的總氨基酸的分離是采用上述測(cè)試條件進(jìn)行,用樣品色譜圖與已知的混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)色譜圖核對(duì)進(jìn)行定性;根據(jù)已知濃度的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)樣的色譜圖峰面積與樣品色譜圖峰面積的比,計(jì)算出樣品中各氨基酸的量,再根據(jù)樣品的重量和水分,求出樣品中所含氨基酸的百分含量。
人參果肉中的氨基酸測(cè)定結(jié)果:見(jiàn)表1。
表1 人參果肉中總氨基的測(cè)定結(jié)果
表1結(jié)果表明,人參果肉含有16種以上氨基酸。人參果肉中的總氨基酸含量為10.423%。人參果肉中精氨酸含量最高(1.815%),天門冬氨酸次之(1.748%),谷氨酸居第三位(1.329%);其中酸性氨基酸、堿性氨基酸、中性氨基酸和必需氨基酸占總氨基酸的比例為中性氨基酸>必需氨基酸>酸性氨基酸>堿性氨基酸。
同植物體內(nèi)其它的化學(xué)成分一樣,由于植物的生長(zhǎng)周期不同,其各生長(zhǎng)部位的體內(nèi)生理代謝也有所不同,因而體內(nèi)的化學(xué)成分積累也有所差別,在不同的生態(tài)環(huán)境條件下,因植物的生長(zhǎng)不同,形成了體內(nèi)化學(xué)成分積累的差別,植物體內(nèi)化學(xué)成分的積累是一個(gè)隨時(shí)間和空間的變動(dòng),而呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程。由于時(shí)間和條件的限制,本實(shí)驗(yàn)對(duì)人參果氨基酸的種類及含量只初步進(jìn)行了分析,為人參果的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供初步的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。結(jié)果不夠全面和充分。因此,要全面了解和掌握人參果化學(xué)成分的積累變化規(guī)律,科學(xué)準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)其質(zhì)量,需有待今后進(jìn)一步深入研究。
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